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20xx年醫學專題—第五章-細胞融合與體細胞雜交-預覽頁

2025-11-15 00:50 上一頁面

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【正文】交是解決遠源雜交不親和性的有力手段之一，更好地利用自然界基因資源，培育(p233。,問題：有沒有可能培育出地下結土豆，地上結番茄(fānqi233。,本章主要內容(n232。ngy236。親本細胞是體細胞，也叫“體細胞雜交（somatic cell hybridization）”。,第九頁，共五十九頁。（2）異核體（Heterokaryon）：來自不同基因型的融合細胞。,三發展(fāzhǎn)歷史,自發融合現象最初在動物細胞中發現。 20世紀70年代初，華裔加籍科學家高國楠發現聚乙二醇(PEG)能促使植物原生質體融合，開拓了植物細胞融合的研究。,細胞膜的結構(ji233。ng)出現通道,——細胞橋,四細胞融合原理,第十二頁，共五十九頁。,原生質體及其制備(zh236。diǎn)：無細胞壁，可以方便地進行遺傳操作、人工誘變、細胞器轉移、細胞融合等操作。b232。使植物細胞融合技術得以建立。o)游離的裸露原生質體。離心法：低速離心，收集沉淀。滲透壓調節劑：葡萄糖、甘露醇、山梨醇等。n)：細胞核的融合,沒發生(fāshēng)細胞核的融合，僅發生(fāshēng)了細胞質的融合，則可能成為嵌合細胞。,第十七頁，共五十九頁。原因可能是病毒的磷脂外衣與動物細胞膜相似，病毒外殼上的某些糖蛋白有促進細胞融合的功能。缺點：提前大量培養病毒；滅活后才能作為(zu242。,第十九頁，共五十九頁。ng)，使細胞聚集在一起。,第二十頁，共五十九頁。,第二十一頁，共五十九頁。ji232。,第二十二頁，共五十九頁。n)質膜的表面電荷，利于細胞融合。常用的PEG平均分子量在200－20,000之間，分子量1,000以下者為液體，1,000以上者為固體。ng)與另外一個原生質體中帶負電的基團相連，導致原生質體融合。因此，PEG結合高pH的高濃度Ca2+離子誘導(y242。,第二十五頁，共五十九頁。,第二十八頁，共五十九頁。lǐ)法,電融合誘導法（Electrofusion）：利用電場來誘導細胞(x236。優點：融合率高、重復性與可控制性強。n hua)細胞電融合,（1）聚集：在直流電脈沖的誘導(y242。（4）融合細胞：細胞核融合。 he)親本原生質體（59105），0.7M山梨醇。參數：電壓：1.53V，超過2V破裂，選1.5V。,融合(r243。lǐ)過程，經融合后細胞將以多種形式出現，需要通過培養和篩選，除去不需要的細胞，分離出需要的雜種細胞，從而解決融合細胞的選擇問題。,六融合(r243。bāo)篩選方法,（1）細胞形態大小差異（2）選擇性培養基篩選法：利用(l236。親本原生質體生長要求外源激素，而有的雜種細胞由于雙親互補作用會產生內激素，從而使雜種細胞能在無激素的培養基上生長。ngguāng)染料法,兩個親本原生質體在融合前用能發不同顏色熒光的熒光染料進行染色。,第三十八頁，共五十九頁。ng)抗性標記進行的融合細胞篩選,第四十頁，共五十九頁。ngy242。nɡ)不親和性，實現遠源遺傳重組。,細胞質遺傳(y237。,二技術(j236。 zi) ：屬間體細胞雜交,三植物新品種培育(p233。 z236。,第五十頁，共五十九頁。,KM8P主要(zhǔy224。,雜種植物(zh237。f,內容(n232。由于種屬間存在著種種隔離機制，致使遠緣雜交常表現不親和或獲得的遠緣雜種表現不育。——

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