植物生長過程葉綠素含量的分析研究畢業(yè)論文(存儲版)

　　

【正文】 the method of acetone and ethanol mixed with the same cubage has the best chlorophyll that it extracts is the The content of chlorophyll of Hua Bei Wei Mao’s leaves are higher than the content of chlorophyll a is higher than chlorophyll b’s.Key words: chlorophyll。具體時間安排：12月18日——12月30日 學習葉綠素提取及分光光度法的相關(guān)知識。使用浸提、紫外光譜分析和熒光分析等手段，對不同溶劑提取測定樹木葉片葉綠素的能力進行了對比分析，并對提取的葉綠素利用熒光顯微鏡進行觀察,分析葉綠體的結(jié)構(gòu)。植物體內(nèi)的葉綠素水平可以衡量光合能力。對于葉綠素的提取方法的研究，具有非?，F(xiàn)實的意義，所以很多科研工作者對葉綠素的提取方法做了很多的研究和探討。據(jù)統(tǒng)計，每平方毫米的蓖麻葉就含有3～5107個葉綠體。外膜和內(nèi)膜之間有10nm距離的電子半透明區(qū)。一個基粒類囊體與另一個類囊體接觸的區(qū)域稱為緊貼區(qū)域，不與其他類囊體接觸的區(qū)域稱為非緊貼區(qū)域。例如，煙草葉綠體的基粒有10～15個類囊體，玉米則有15～50個；同是冬小麥，基粒類囊體數(shù)目隨葉位上升而增多，至旗葉達到高峰。它們在結(jié)構(gòu)上的差別，僅在于1個CH3被1個CHO所取代。葉醇是1個由4個異戊二烯單位所組成的雙萜，是1個親脂的脂肪族鏈。下圖描述了22種作物的作用光譜。因葉綠素浸提法受到重視，陳福明、陳順偉[6]和張憲政[4]分別對不同配比的丙酮、乙醇和水的混合液的浸提效果進行了研究，證明利用混合液進行葉綠素浸提的可行性。后來又經(jīng)Humphrey和Wooton在1966年證實90%丙酮是提取海洋浮游植物中葉綠素的一種理想溶劑(Humphrey et al., 1966)。1974年Jeffery建議先用100%丙酮提取葉綠素，進行光譜測定時再稀釋成90%的丙酮。為避免溶劑遺漏可能帶來的危險，操作者應(yīng)注意保護眼睛和手，佩戴安全眼罩和手套。研究證明傳輸功率大小很大程度上會影響提取時間的長短。（4）于相麗對牡丹葉綠素提取的研究[8]方法：將新鮮的牡丹品種趙粉葉片洗凈、用濾紙吸干，去大葉脈后剪碎混勻，稱取0. 05g，放人比色管中，分別加人l0ml 1丙酮；295%乙醇；380%丙酮；4丙酮:95%乙醇1:1；5丙酮:95%乙醇2:1；6丙酮：無水乙醇：：：1；7丙酮:95%乙醇:：：1 ；880%乙醇提取液，定容。1942年Comar以乙醚作溶劑用分光光度法分別測定了葉綠素a和b(Comar, 1942)。1984。葉綠素a 和葉綠素b 在645nm 和663nm 處有最大吸收，且兩吸收曲線相交于652nm 處。(3) 易于穿透細胞壁葉綠素在海藻細胞結(jié)構(gòu)中位于細胞質(zhì)的葉綠體中，細胞壁內(nèi)層是纖維素，外層是果膠質(zhì)或藻膠質(zhì)。配制丙酮：乙醇體積比為1：１的溶液，將三種剪碎的樹葉分別放入100ml的小廣口瓶中，分別加入25ml丙酮與乙醇1：１提取液，振蕩，用報紙遮光包好后放在避光處提取(要至少浸泡八個小時).（2）對（1）的分光光度計掃描的結(jié)果進行分析,應(yīng)用分光光度計的軟件具體操作為:掃描結(jié)束后,打開視圖讀圖譜工具,分別于波長為645nm和663nm處讀取吸光度數(shù)值,葉綠素含量測定方法為:分別以提取溶劑作空白，測定葉綠素提取液吸光度A 645 , A 663，利用Arnon公式:葉綠素a濃度(mg/l ): Ca = 645。其中，等量樹葉提取的情況下，華北衛(wèi)矛的葉綠素含量最高，并且華北衛(wèi)矛葉綠素中葉綠素b的含量高于葉綠素a的含量，其它樹種都是葉綠素a含量高于葉綠素b含量，此種情況的出現(xiàn)，具體是由于華北衛(wèi)矛的葉綠素含量與結(jié)構(gòu)特殊還是由于提取液與實驗條件及誤差的影響還不確定，有待于進一步研究探討。參考文獻[1] Arnon ,. Copper Enzymes in isolated chloroplasts polyphenoloxidase in Beta Vulgaris. Plant , 24:1一15[2] Mackinney, G..Criteria for purity of chlorophyll preparations. .Chem.,1940, 132:91一109[3]Volk, S. L., Bishop, N. I. Photosynthetic efficiency of a phycocyanineless mutant of Cyanidium.Photochem. Photobiol., 1968, 8: 213221[4] 張憲政．植物葉綠素含量測定一丙酮乙醇混合液法．遼寧農(nóng)業(yè)科學，1986， 3：2628[5] 洪法水，魏正貴等．，2001,18(7)：532535[6] 陳福明，陳順偉．混合液法測定葉綠素含量的研究．林業(yè)科技通訊，1984, 1：48[7] 李得孝．混合液浸提法測定玉米葉綠素含量的研究．玉米科學，2006，14（1）：117119[8] 于相麗．牡丹葉綠素的提取及其性質(zhì)研究．洛陽師范學院學報，2005，5：107109[9] 馮雙華．水稻葉綠素含量的簡易測定．福建農(nóng)業(yè)科技，1997，4：78[10]楊敏文．快速測定植物葉片葉綠素含量方法的探討．光譜實驗室，2002，19：478481[11]劉絢霞．油菜葉綠素提取方法的研究．有機農(nóng)業(yè)與食品科學，2004，20：6263[12]彭運生，劉恩．關(guān)于提取葉綠素方法的比較研究[J]．.北京農(nóng)業(yè)大學學報，1992，18 (3)：247250[13]陳福明，陳順偉．混合法測定葉綠素含量的研究[J]．林業(yè)科技通訊，1984,，(2)：48[14]沈偉其．測定水稻葉片葉綠素含量的混合液提取法．植物生理學通訊，1988，3：6264[15]劉秀麗等．植物葉綠素測定方法的再討論．江蘇農(nóng)業(yè)研究，1999，20(3)：4647[16]蘇正淑，張憲政．幾種測定植物葉綠素含量的方法比較．植物生理學通訊，1989，5：7778[17]北京化學試劑公司編．化學試劑目錄手冊．北京:北京工業(yè)大學出版社，1993．74668[18]程能林編著．溶劑手冊．第三版．北京:化學工業(yè)出版社，2002．298844[19]，．，2004．462505[20]高信曾主編．植物學實驗指導(dǎo)（形態(tài)、解剖部分）．高等教育出版社，1986．19[21]武漢市園林技工學校主編．植物生理學．北京科學技術(shù)出版社，1988．5667[22]張維銘主編．現(xiàn)代分子生物學實驗手冊．科學出版社，2003．920[23]翟中和主編．細胞生物學．.高等教育出版社，1995．149170致 謝我的論文從選題、查閱資料到整個的撰寫過程，東北林業(yè)大學理學院魏崇老師都傾注了大量的時間和精力，進而，我的論文才會在魏崇老師的精心指導(dǎo)下完成。 本論文由于時間緊促，錯誤及不當之處在所難免，誠請各位老師及廣大讀者指正。一種好的提取溶劑應(yīng)該提取速度快，葉綠素得率高，穩(wěn)定性好，測定結(jié)果精密度高，吸收光譜與傳統(tǒng)丙酮法一致，能用Arnon公式計算葉綠素含量。4 結(jié)果與與討論從表1可以看出,在常溫條件、同一種提取溶劑的情況下