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選修課臨床檢驗(yàn)9熒光定量pcr在臨床實(shí)驗(yàn)室診斷中的應(yīng)用-文庫(kù)吧在線文庫(kù)

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【正文】 en carrying feruses with trisomy 21 Clin chem, 1999 Oct, 45: 10, 174951 FQ— PCR技術(shù)用于植入前診斷移入前診斷是第三代試管嬰兒的核心技術(shù) 在胚胎分裂至 4— 8細(xì)胞階段時(shí)，取 1— 2個(gè)細(xì)胞作篩選技術(shù)難點(diǎn)：細(xì)胞數(shù)少，獲取核酸困難。 ?定量的實(shí) 現(xiàn) ： ? 熒光探針與擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)合 ? Taq酶外切作用，探針裂解，熒光被激發(fā) ? 熒光信號(hào)的檢測(cè) ? 熒光強(qiáng)度與定量核酸模板相關(guān)性 ? 實(shí)時(shí)定量與終產(chǎn)物定量 ? ? ? ? ? ? 熒光定量 PCR技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn) 一、真正的樣品原始核酸模板的準(zhǔn)確定量二、定量范圍寬（ 0— 1010/ml)，無(wú)需梯度稀釋三、封閉狀態(tài)檢測(cè)，避免擴(kuò)增產(chǎn)物污染四、探針使用使特異性更強(qiáng) 五、光譜分析技術(shù)使敏感性更高六、儀器讀數(shù)，結(jié)果判斷客觀真實(shí) 七、無(wú)需 PCR后處理，操作更簡(jiǎn)便、快速八、數(shù)據(jù)電腦管理，利于醫(yī)院管理熒光定量 PCR技術(shù)檢測(cè)的報(bào)告形式一、報(bào)告形式：熒光定量 PCR檢測(cè)的報(bào)告以：“拷貝數(shù)”（ copy) 二、拷貝數(shù)的意義：表示原始標(biāo)本內(nèi)可供探針結(jié)合的核酸片段數(shù)量。需要高靈敏度的檢測(cè)方法發(fā)展方向：篩選疾病基因、常見病基因、腫瘤基因等 FQ— PCR雙色及多色熒光標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用 FQ— PCR用于肺部感染的診斷一、肺炎支原體的檢測(cè)：二、肺炎衣原體的檢測(cè)：意義：快速診斷治療方案與細(xì)菌感染的治療方案不同 FQ— PCR技術(shù)用于幽門螺桿菌（ HP）的檢測(cè) HP與慢性胃炎、胃潰瘍、胃癌有密切的關(guān)系我國(guó)胃癌發(fā)病率高、發(fā)病年齡輕與 HP的感染與關(guān)系方法：取胃活檢標(biāo)本口腔標(biāo)本意義： HP感染的診斷探討 HP載量與治療的關(guān)系 FQ— PCR技術(shù)對(duì)性傳播疾病的檢測(cè) 一、梅毒螺旋體（ TP）二、淋球菌（ NG）三、沙眼衣原體、解脲脲原體（ CT、 UU）四、單純庖疹病毒（ HSV）五、乳頭瘤病毒（ HPV）六、人類免疫缺陷病毒（ HIV）七、其它病原體 FQ— PCR技術(shù)檢測(cè) CT、 UU 發(fā)病率最高的性傳播疾病治療與淋病完全不同 FDA批準(zhǔn)的 PCR檢測(cè)試劑盒意義：可作為首選方法 FQ— PCR技術(shù)檢測(cè) HIV HIV載量與感染的發(fā)展和愈后 Bagnarell:(92) HIV量高 ,免疫缺陷癥狀嚴(yán)重、潛伏期短 Pantaleo(95) HIV量低，潛伏期長(zhǎng)，癥狀輕根據(jù) HIV量預(yù)測(cè)發(fā)病時(shí)間和預(yù)后 FQPCR在腫瘤研究和診斷中的應(yīng)用一、病毒感染與腫瘤二、腫瘤相關(guān)基因的檢測(cè) :常見癌基因 CerbB cmyc、 Nmyc、 Kras、 int Nras、 Mdm Cfas、 Ksam、 Met. 三、腫瘤標(biāo)志物的 mR

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