基因工程的發展(更新版)

　　

【正文】 HkD２） 甲基化酶的用途 如： M.甲基化酶的種類與識別順序1.5.3.酶切位點與識別位點不一致，切點常在識別位點的一側， 1DNA重組2.（四）、異源同序酶（isoschizomer，同裂酶）２） ５ ’端突起 ，個數為２或４個核苷酸 Pst IT5’G5’ＧＧＡＴＧ (Ｎ )93’GGCC Not BamHI1.HindⅢ — Haemophilus　例如： HindⅢ 　　前三個字母來自于菌種名稱H. influenzae， “ ｄ ” 表示菌系為ｄ型血清型； “Ⅲ” 表示分離到的第三個限制酶。1.III型 ： 修飾酶與Ｉ型酶相同， hsdＭ與 hsdＳ基因產物結合成一亞單位，限制酶是獨立存在的。核酸連接酶 — 用 于 DNA和 RNA的連接 中藥化學組 ：中藥有效成分包括較單一的成分和多種成分種植面積迅猛發展。1960元 /ug胰島素 回報很高。生物制藥產業化特點高技術 ：高層次人才，高新技術手段，多學科滲透高投入 ：在國外，一個生物藥品平均要投入 1~3億美元，并隨著開發難度的增大 ,有逐步增高的趨勢長周期 ：國際上，一個新的生物藥品需要 6~8年時間高風險 :傳統的酶工程主要是指天然酶制劑在工業上的大規模生產與應用。蛋白質功能預測和分析蛋白質晶體結構分析 從這些篩選出來的受體細胞克隆，提取出已經得到擴增的目的基因，供進一步分析研究使用。重組 DNA技術 (rebination 利用 DNA體外重組或 PCR擴增技術從某種生物基因組中分離感興趣的基因，或是用人工合成的方法獲取基因，然后經過一系列切割，加工修飾，連接反應形成重組 DNA分子，再將其轉入適當的受體細胞，以期獲得基因表達的過程 .基因工程 (gene engineering)常和以下名稱混用遺傳工程 (geic基因工程中的工具酶第三節 基因與載體的重組與導入受體細胞第六節 cloning)。作名詞時指含有某目的 DNA片段的重組 DNA分子或含有該重組分子的無性繁殖系 .作動詞時是指基因的分離與重組過程。大學將人肥胖基因出售 美元 （ 1995年 3月）Amgen公司將 FKBP神經免疫因子配體轉讓達 （ 1997年）Millennium公司以 向 Bayer公司轉讓 225種基因的開發權（ 1998年 9月）蛋白質工程的概念在基因工程技術對編碼蛋白質的基因的了解基礎上，對蛋白質的氨基酸序列、結構和功能進行分析，進而通過對蛋白質的結構、氨基酸序列和翻譯后的修飾等手段改變甚至創造出新的和更有效的蛋白質。污染治理；廢物利用；污染物生物降解生物技術產業化生物技 術產業 ： 利用 細 胞和生物分子 進 行 藥品、 農產 品生 產 開 發 和 環 境治理的 產業 ，該產業 技 術 由醫 藥 生物技 術 、 農業 生物技術 和 環 境生物技 術 共同 組 成醫 藥 生物技 術 重點攻克癌癥、艾滋病、老年癡呆癥、帕金森病、心 臟 病、糖尿病等危害人 類 的 頑 疾農業 生物技 術 著眼于提高 農產 品的 產 量和質 量。一個新藥品的開發，經過一系列的程序 研發、中試、動物實驗、 I~III期臨床實驗，上市和嚴格的藥政監督管理。1072元 /ug白細胞介素 2遺傳疾病 53植物反應器生產稀有蛋白。中藥基因組 —— 利用現代生物技術研究分析中藥對人體（細胞）基因表達（蛋白質）的影響。中藥化學組 —— 利用現代儀器分析技術分析有效成分及其藥物代謝、動力學。限制酶的用途（一）、限制修飾系統的種類1.and(II)— StreptomycesNGATCN； AvaIIN3’ＣＣＴＡＣ (Ｎ )135’EcoRITG5’3’GACGTC5’粘性末端能與另一個相同的粘連末端相連接，任何兩個具有相同識別位點的 DNA分子經限制酶切割后能夠重新連接成新的重組 DNA分子。平齊末端GGG3’ａ）切點在識別順序之外的，如： FokI FokAvaI1.CCCGC（五）、 1.限制酶（物理）圖譜繪制2.EcoRIGGATmCC— BamHI(G?GATCC)２） b.３） M． TaqI（ TCGmA） HindII（ GTPyPuAC）：GTCAAC， GTTAAC， GTCGmAC， GTTGAC3.核酸酶 H活性：除去 DNARNA雜交分子中的RNA分子， pH反應底物：互補 dsDNA2)4.核酸（ DNA）標記斷口缺口 (gap)斷口 (cut)339。 339。539。HO339。OH339。339。3c 1a3c1a3ca4a539。I1.或 Ca2+DNA分子上將形成切口，不同類型二價陽離子對兩條鏈上切口位置形成有以下影響： Mg2)Mn++存在時 3’5’I四、 DNA聚合酶（一）、 DNA聚合酶 I（ polI）具 3’→5’ 外切酶活性IIIpolI的特點 3.DNA聚合酶I的兩倍 dNTP（三）、 Taq→ 5’3’5’DNA連接酶平整末端的相連5’AOHAOH3’TTCGAA5’TTCGAPAHOPAGCT質粒 DNA分子可以持續穩定地處于染色體外地游離狀態，但在一定地條件下又會可逆地整合到寄主染色體上，隨著染色體地復制而復制，并通過細胞分裂傳遞到后代。這樣的兩種質粒稱為不親和質粒。pCR, 這種指示可以是選擇性的（ Ampr氨芐青霉素抗性基因 （ Cmlr新霉素 (Neor)和 G418抗性 (G418r)基因AAs，基因產物裝配為四聚體后才有酶活。 lacZ（ lacZα）中含有多克隆位點，當無外源 DNA片段插入時，質粒表達 β— 半乳糖苷酶的 α肽，與缺失突變體宿主菌（不能編碼 α肽）表達的 lacZ基因產物（ lacZα編碼 5‘端可容許很大的變化（如加入多克隆位點）而不影響酶活性 病毒型載體 — 環狀、線狀、 ss和 dsDNA分子，形成病毒顆粒 （ 3） .混合型載體 — 具質粒和病毒特性，特性的轉換依賴于宿主細胞生物學特性 根據載體功能劃分用途 :酶切反應時仍未被作用的 pBR322或 pUC18分子 b. 酶切后的載體分子經自我連接又形成載體分子普通型載體 pBR322的結構圖pUC18和 pUC19載體（ 2）、表達型載體（ expressionb.Ⅰ 型 ：轉錄起始區（調控序列 +啟動子） +轉錄起始區終止子 Ⅲ 型 :a.TcS)Apr （ 3）、多克隆位點區（ MCS） 由人工合成的多個單一酶切位點構成。如： DH DH5α 、 E .coliDH5αF’ 1） 合適的克隆位點 單克隆位點和多克隆位點演講完畢，謝謝觀看！