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基因表達(dá)和基因重組-全文預(yù)覽

2026-01-19 17:44 上一頁(yè)面

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【正文】病的分子機(jī)制。 λ核酸外切酶 λ核酸外切酶末端轉(zhuǎn)移酶 + dATP 末端轉(zhuǎn)移酶 + dTTP T4 DNA連接酶 15186。 5180。 5180。 5180。目的基因限制酶或機(jī)械剪切限制酶 5180。載體 DNA 5180。 5180。C GATCC G G CCTAG + 目的基因用 Bam HⅠ 切割 GCC TA GGCC TA GGATCCGGATCCG載體 DNA用 Bam HⅠ 切割 GCC TA GGCC TA GGA TC CGGA TC CG重組體 GCC TA GGCC TA GGA TC CGGA TC CGGCC TAGCC TAGA TC CGGA TC CG載體自連目的基因自連同一限制酶切位點(diǎn)連接不同限制酶切位點(diǎn)（非配伍末端）的連接 GAATT CCT TAAG AGA TCTTC TAGAEco RⅠ 切割位點(diǎn) GCTTAAATCTAGA ATTCGGATCTABg lⅡ 切割位點(diǎn) AATTC GATC TAGA ATTCGGATCTAAATTC G ATC TAG+ EcoRⅠ + Bg lⅡ 雙酶切 Eco RⅠ + Bg lⅡ 雙酶切 GCTTAAATCTAGA ATTCGGATCTAT4 DNA連接酶 15186。經(jīng)改造后具有多克隆位點(diǎn) 。常用載體質(zhì)粒 DNA、噬菌體 DNA、病毒 DNA 宿主細(xì)胞基因載體載體的選擇標(biāo)準(zhǔn) ? 能自主復(fù)制； ? 具有兩個(gè)以上的遺傳標(biāo)記物，便于重組體的篩選和鑒定； ? 有克隆位點(diǎn)（外源 DNA插入點(diǎn)）即多個(gè)單一酶切位點(diǎn)； ? 分子量小，以容納較大的外源 DNA。基因組 DNA：代表一個(gè)細(xì)胞或生物體整套遺傳信息的所有DNA序列。這兩個(gè)相同的粘性末端稱(chēng)為配伍未端 (patible end)。 GGATCC CCTAGG G CCTAG GATCC G + Bam HⅠ 作用與甲基化酶共同構(gòu)成細(xì)菌的限制修飾系統(tǒng) ，限制外源 DNA，保護(hù)自身 DNA。末端 Klenow片段又名 DNA聚合酶 I大片段，具有完整 DNA聚合酶 I的 5??3?聚合、 3??5?外切活性，而無(wú) 5??3?外切活性。生物技術(shù)工程 : 基因工程、蛋白質(zhì)工程、酶工程、細(xì)胞工程等目的 ① 分離獲得某一感興趣的基因或 DNA ② 獲得感興趣基因的表達(dá)產(chǎn)物（蛋白質(zhì)）基因工程 (geic engineering) —— 實(shí)現(xiàn)基因克隆所用的方法及相關(guān)的工作稱(chēng)基因工程，又稱(chēng) 重組 DNA工藝學(xué) 。（三）轉(zhuǎn)導(dǎo)作用當(dāng)病毒從被感染的（供體）細(xì)胞釋放出來(lái) 、再次感染另一（供體）細(xì)胞時(shí) ，發(fā)生在供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之間的 DNA轉(zhuǎn)移及基因重組即為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用(transduction)。是最基本的 DNA重組方式，通過(guò)鏈的斷裂和再連接，在兩個(gè) DNA分子同源序列間進(jìn)行單鏈或雙鏈片段的交換。重組 DNA 質(zhì)粒 DNA 基因片段重組 DNA技術(shù)發(fā)展史 pSC101 EcoRI Boyer 和 Cohen的實(shí)驗(yàn) 和pR65 大腸桿菌 pSC101 pR65 抗四環(huán)素抗卡那霉素 EcoRI 抗卡那霉素基因 DNA連接酶重組 DNA分子培養(yǎng)平皿四環(huán)素平板卡那霉素基因四環(huán)素 \卡那霉素基因大腸桿菌人體生長(zhǎng)激素釋放激素 (SS) 抑制和調(diào)節(jié)多種激素的作用

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