基因診斷與基因治療培訓教程-預覽頁

　

【正文】 抑癌基因的檢測 二、常見腫瘤的基因診斷 乳腺癌 結腸癌 目 ras胰腺癌、結腸癌、肺癌以 Kras突變為主，如第 12位密碼子突變，由編碼甘氨酸的 GGT突變為 TGT、GTT或 GAT，少數突變為 GCT。急性淋巴細胞白血病，慢性淋巴細胞白血病等以 Nras突變為主；泌尿系統腫瘤則以 Hras突變為主。PCR核苷酸雜交技術（如 ASO）： 檢測 ras基因第 12位密碼子點突變。n p53基因以密碼子第 175位、第 248位、第 249位、第 273位及 （ 3） PCRRFLP分析目 1．乳腺癌常見基因變異cancerBRAC1突變易致乳腺癌。錄目 APC（ adenomatouscolorectalDNA修復基因也與結腸癌有關。錄（ 1） PCRSSCP法： 對腺瘤樣息肉病人 APC基因 PCRSSCP技術進行分析。2．結腸癌基因診斷方法第五節 基因診斷在法醫學上的應用Application of Gene Diagnosis in Forensic Medicine目 n 串聯重復序列散在分布于染色體上。bp長，如（ TA） n,錄錄目 擴增片段長度多態（ amplifiedAmpFLP）Alec John JeffreysOxford, United Kingdom 目 錄二、 DNA指紋與法醫學診斷n 個體識別和親子鑒定： 錄目 父權指數（ Paternity錄目 目 第六節 基因治療的概念及策略 Concept and Strategy of Gene Therapy目 廣義基因治療： ① 外源正常基因導入病變細胞，產生正常基因的表達產物以補充缺失的或失去正常功能的蛋白質； ② 采用適當的技術抑制細胞內過度表達的基因； ③ 將特定的基因導入非病變細胞，在體內表達特定產物； ④ 向功能異常的細胞（腫瘤細胞）中導入該細胞中本來不存在的基因（如自殺基因），利用這些基因的表達產物達到治療疾病的目的。錄基因治療分類216。錄目 錄 一、基因治療的策略目 對缺陷基因的缺陷部位進行精確的原位修復，不涉及基因組的任何改變。n 基因同源重組技術又稱為 基因打靶 (geneaugmentation） 錄（三）基因干預 （ gene錄n 定義： 將 “自殺 ”基因導入宿主細胞中，這種基因編碼的酶能使無毒性的藥物前體轉化為細胞毒性代謝物，誘導靶細胞產生 “自殺 ”效應，從而達到清除腫瘤細胞的目的。Therapy)目 simplextk）基因編碼胸苷激酶，特異性地將無毒的核苷類似物丙氧鳥苷（ ganciclovir,“自殺基因 ”導入后，不僅使轉導了 “自殺基因 ”的腫瘤細胞在用藥后被殺死，而且與其相鄰的未轉導 “自殺基因 ”的腫瘤細胞也被殺死。effect）目 通過將抗癌免疫增強的細胞因子或 MHC基因導入腫瘤組織，以增強腫瘤微環境中的抗癌免疫反應。錄二、基因轉移技術 基因治療的兩種途徑載體目的基因in vivoex vivo 靶細胞目 基因轉移 (gene據統計，有 72%的臨床實驗計劃和 71%的病例使用了病毒載體，其中用得最多的是反轉錄病毒載體 。 p 含有負鏈 DNA轉錄的引物結合位點 (PBS)和正鏈 DNA轉錄的引物結合位點 。U3和 U5兩端分別有病毒整合序列 (IS)目 packaging反轉錄病毒載體的特點 反轉錄病毒載體的主要缺點kb以下的外源基因。kb)雙鏈無包膜 DNA病毒。目 目 腺病毒載體缺點l 宿主的免疫反應導致腺病毒載體表達短暫。l 不能整合到靶細胞的基因組 DNA中。錄（ 3）腺病毒相關病毒載體kb， 無包膜，外形為裸露的 20面體顆粒。Particles目 Virus錄目 這種靶向定點整合可以避免隨機整合可能帶來的抑癌基因失活和原癌基因激活的潛在危險性，而且外源基因可以持續穩定表達，并可受到周圍基因的調控，兼具反轉錄病毒載體和腺病毒載體兩者的優點。目 AAV載體的缺陷 可能會引起免疫排斥。腺相關病毒載體定點整合 (19號染色體特定區域 )不致病 分裂細胞、非分裂細胞5kb目 基本原理 :利用陽離子脂質體單體與 DNA混合后，可以自動形成包埋外源 DNA的脂質體，然后與細胞一起孵育，即可通過細胞內吞作用將外源DNA（ 即目的基因）轉移至細胞內，并進行表達。錄多聚陽離子與配體共價連接后，又通過電荷相互作用與帶負電荷的 DNA結合，將 DNA包圍，只留下配體暴露于表面。錄動物實驗表明：接受注射外源 DNA的小鼠能夠按其基因編碼合成相應的蛋白質，并能維持數月之久。錄 基因直接注射法的優點p 制備具有調控部件的質粒 DNA重組體的技術較容易；p 排除病毒載體可能潛在的致癌性或其他副作用；p 導入的基因不需整合即可表達，避免了反轉錄病毒載體導入整合后，一旦發生副作用不易中止或逆轉的缺點；p 基因直接注射法可反復使用，而病毒載體則可能誘導體內免疫應答，致使反復治療效果下降。錄（一）反義 RNA（ antisense利用反義 RNA對體外培養的細胞進行基因表達調控，通常采用的方法有兩種：目 目 可以抵抗環境中的核酸酶的降解作用。3.（ 3）具有劑量調節效應 在基因治療時，利用核酶分子結合到靶RNA分子中適當的部位，形成錘頭狀核酶結構，將靶 RNA分子切斷，通過破壞靶 RNA分子而達到治療疾病的目的。錄 （ 1）選擇合適的靶部位，該部位具有核酶切割位點，能與核酶分子結合并組成酶活性結構域。目 在此過程中，與雙鏈RNA有同源序列的信使 RNA（ mRNA） 被降解，從而抑制該基因的表達。這與傳統上對反義 RNA技術的解釋正好相反。silencing錄目 錄RNA干擾機制示意圖 RNA干擾技術具有高度的序列專一性和有效的干擾能力，可以使特定基因沉默或功能喪失，因此可以作為功能基因組學的一種強有力的研究工具。目 穩定地生成。錄（一）遺傳病的基因治療研究 (一 )遺傳病基因治療必須符合以下要求 DNA水平明確其發病原因及機制；，而且屬隱性遺傳；；達并發揮其生理作用； (如不治療難以存活等 )。n 珠蛋白生成障礙性貧血和血紅蛋白病 n 家族性高膽固醇血癥 錄（二）惡性腫瘤基因治療研究 （ 1）通過基因置換和基因補充，導入多種抑癌基因以抑制癌癥的發生、發展和轉移； 腫瘤發生是一個極為復雜的過程，許多基因的突變會導致腫瘤的發生。腫瘤基因治療的常用方法?自殺基因治療：直接殺死腫瘤細胞。 錄（ 2）大劑量的化療可能導致患者的正常細胞，特別是骨髓造血細胞的功能受到抑制。藥物增敏基因治療：為了使化療藥物能夠最大程度地殺死腫瘤細胞，可以將某些藥物增敏基因導入腫瘤細胞，特別是對化療藥物原本不敏感的腫瘤細胞，使其對抗腫瘤藥物的敏感性大大增加，從而達到增強化療效果的目的。錄多藥耐藥（ mdr1） 基因編碼的 P糖蛋白、多藥耐藥相關蛋白（ MRP） 以及肺耐藥相關蛋白等；向腫瘤患者的骨髓細胞導入某種耐藥基因，增強骨髓細胞的抗藥性，以便耐受大劑量的化療藥物，達到徹底殺滅腫瘤細胞的目的。病毒還是造成先天畸形的重要因素之一。錄 1．調節機體免疫應答 （ 1）將細胞因子 (如干擾素、白細胞介素等 )的基因，導入機體免疫細胞，激活免疫細胞并促進其增殖分化，增強機體的細胞和體液免疫應答，促進機體清除病毒感染的細胞和游離病毒。 （ 2）干擾病毒基因組的轉錄起始和調控。 （ 5）將抗病毒蛋白質基因，如 239。錄目 錄目 錄靜夜四無鄰，荒居舊業貧。 13:18:5913:18:5913:18Monday, March 22, 20231乍見翻疑夢，相悲各問年。 2023/3/22 13:18:5913:18:5922 March 20231做前，能夠環視四周；做時，你只能或者最好沿著以腳為起點的射線向前。 三月 2113:18:5913:18Mar2122Mar211世間成事，不求其絕對圓滿，留一份不足，可得無限完美。 三月 211:18 下午 三月 2113:18March 22, 20231少年十五二十時，步行奪得胡馬騎。 13:18:5913:18:5913:183/22/2023 1:18:59 PM1越是沒有本領的就越加自命不凡。 三月 21三月 2113:18:5913:18:59March 22, 20231意志堅強的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 1:18:59 下午 1:18 下午 13:18:59三月 21MOMODA POWERPOINTLorem ipsum dolor sit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blanditut cursus. 感謝您的下載觀看專家告