基因工程體外重組(帶動(dòng)畫)(留存版)

　　

【正文】 末端？ 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 b）銜接物 (linker)連接 Linker:用化學(xué)合成法合成的一段 1012bp的特定限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)序列的 平端雙鏈 。 雙酶切 EcoRI BamHI EcoRI BamHI EcoRI BamHI 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 （ 2）起始密碼 尤其當(dāng) 載體上有 ATG起始密碼的時(shí)候，更要注意。第六章 DNA重組的操作 基因工程 生命科學(xué)學(xué)院 外源 DNA 載體 DNA 重組分子 擴(kuò)增或表達(dá) 表達(dá) 連接 轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo) 電穿孔或顯微注射 原核細(xì)胞 真核細(xì)胞 受體細(xì)胞 ？ 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 限制酶 — 分子剪刀 限制酶 — 分子剪刀 連接酶 — 分子膠水 重組 DNA分子 粘性末端連接效率最高！ 生命科學(xué)學(xué)院 黏性末端 黏性末端 粘性末端的連接 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 1. 粘性末端連接 創(chuàng)造互補(bǔ)粘性末端的方法有哪些？ 同種酶 同尾酶 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 （ 1）兩端具有相同粘末端的 DNA分子之間的連接 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 堿性磷酸酶 ：去掉其 5’末端的磷酸基，以防質(zhì)粒 DNA的自身環(huán)化 。 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 2. 插入基因的開放閱讀框（ ORF）正確 （ 1） DNA定向插入 由于產(chǎn)生的粘性末端不同，只能以固定方向連接。 GGAATTCC CC