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豆科植物內生固氮菌的分離與篩選(編輯修改稿)

2026-06-25 16:15 本頁面

　

【文章內容簡介】 PCR和 16SrRNA 基因全序列分析【 J】。華南農業大學學報， 2020， 26（ 4）： 7376 【 3】李倍金。禾草內生固氮菌的促生效能研究【 D】。烏魯木齊：新疆農業大學碩士論文， 2020 三、研究方案（以下各項均可加頁）（包括研究目標、研究內容以及擬解決的關鍵問題，擬采取的研究方法、技術路線、實驗方案及可行性分析，本課題的特色與創新之處） 1. 研究目標：以阿須貝無氮培養基為選擇分離條件對豆科植物內生細菌進行初步篩選，并通過 nif 基因引物擴增確定其為具有固氮酶活性的菌株。 2. 研究內容：（ 1）豆科內生固氮菌的分離培養（ 2）通過 nif 基因引物擴增對菌種固氮酶活性進行測定：（ 1）目的菌株所在植物的選擇。（ 2）目的菌株的分離純化。（ 3）固氮酶活性的測定。 4. 擬采取的研究方法及技術路線：實驗過程中嚴格按照篩選固氮菌的實驗步驟，純化不可少，酶活力測定中產酶培養基微量元素的制備要準確，消耗性藥品由微生物實驗室提供。 5. 實驗方案：（ 1）：采豆科植物進行菌的培養。（ 2）：選擇培養，劃線培養。（ 3）：通過 nif 基因引物擴增測酶活力。 (4):酶活性的鑒定。（ 1）材料幾種阿拉爾地區豆科植物。（ 2）培養基及緩沖液營養瓊脂培養基 (NA， g／ L)：牛肉膏 5，蛋白胨 1O，蔗糖 10，酵母浸膏 1， pH值 7． 2。多碳源低氮培養基 (CCM)：目的植株的選擇利用無氮培養基對菌種進行篩選培養測酶活力酶活的鑒定溶液 I： KH2PO4 0． 2g， NaC1 0． 1g， K2HPO4 0． 8g， Na2FeEDTA 28mg，鉬酸鈉25mg，酵母浸膏 100mg，甘露醇 5g，蔗糖 5g，乳酸鈉 O． 5mL，蒸餾水 900mL。溶液Ⅱ： MgSO4 7H20 0． 2g， CaC1 2H2O 0． 06g，蒸餾水 100mL。．溶液 I、Ⅱ分別滅菌，冷卻至 50℃左右混合后再

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