20xx年第一期(編輯修改稿)

　

【文章內容簡介】 在羊、馬和貓也找到免疫缺陷病毒，至于如何傳播給人類的，從譜系分析尚不能得出解釋。 如果對現今有關 SIV和 HIV的研究作仔細的探討，總結它的地理分布、蔓延的歷史、對人類和猿猴不同的致病性以及 HIV— O的存在，可以設想還有其他 HIV變異株在傳播，發現引起免疫 缺陷病的 HIV變異株，在 HIV1和 HIV— 2試驗陰性的病人技術上是簡單的，可以將這類變異株稱之為HIV— U，如果變異株不引起典型的臨床癥狀，其發現則甚困難。 結論：今后對 HIV的診斷，必須針對那些已有的或新傳播的 HIV變異株，研究確診的方法。 （ 摘自：德國醫學 第 12卷 第 3期 同濟醫科大學附屬同濟醫院 郝連杰譯） 滴金法同步檢測甲、乙、丙型肝炎病毒免疫標志物方法學建立及評價 馬文君 目的： 建立同步檢測甲、乙、丙型肝炎病毒免疫標志物的金免疫滲濾法 (GIFA)的實驗方法，并對其性能作評價。 方法： 采用膠體金作為免疫示蹤物 ,標記羊抗人 IgG單克隆抗體 ,將相應的病毒抗原 HAVAg、HBcAg及 HCVAg包被在硝酸纖維素薄膜表面 ,標本中所含抗體與相應的抗原結合后 ,加入金標記抗體 ,即可在薄膜表面形成肉眼可見的紅色斑點。 結果 :自制的 GIFA紙條法檢測 645份血清標本 ,與 ELISA、 RIA法作對比 ,符合率分別為 %、%、 %,最低檢測濃度分別為 2ng/ml、 1ng/ml、 1ng/ml。本實驗方法具有較高的特異性和靈敏度 ,操作簡便。 討論： GIFA法由于其方法的局限法 ,檢測靈敏度較 ELISA及 RIA低 ,檢測 ELISA靈敏度為,而我們的實驗表明 ,我們建立的方法檢測靈敏度在 1ng/ml以上，稍遜一籌的靈敏度可能將部分滴度較低的標本漏判。但該方法簡便 ,不需特殊設備 ,實驗耗時較短；成本較低 ,可有效降低患者的經濟負擔 ,減輕肉體痛苦 ,三份不同標本用同一載體 (GIFA紙片 )一次檢測即可得出 3種肝炎病毒的感 染狀況。 （摘自：現代診斷與治療 2020年 3月第 15卷第 3期） １８ 血清反復凍融對 HBsAg 和抗 HBs 抗體檢測的影響 徐美艷 一、引言 :對 183份血清標本凍融前、凍融 3次、凍融 6次后的 HBsAg和抗 HBs進行了檢測和分析比較。 二、材料和方法： 材料：西京醫院門診乙肝 5項檢測血清 183份，年齡、性別、診斷不限。 方法：于初次檢測 HBsAg和抗 HBs后置 20℃過夜，連續凍融 3次、凍融 6次后分別檢測HBsAg和抗 HBs。科華試劑。 3次檢測用同一批號試劑，嚴格按說明書方法判斷陰陽性結果。 三、結果： HBsAg：凍融前、凍融 6次后均陽性 61份，均陰性 115份，凍融前陰性凍融 6次后陽性者 1份，凍融前陽性凍融 6次后陰性者 6份，符合率為 % 抗 HBs：凍融前和凍融 6次后均 陽性 97份，均陰性 10份，凍融前陰性凍融 6次后陽性者 2份，凍融前陽性凍融 6次后陰性者 10份，符合率為 % 四、討論： 血清反復凍融對 HBsAg的檢測沒有影響，凍融 3次和凍融 6次與凍融前相比，無論陽性率和 S/N值均無明顯差別 抗 HBs凍融 3次與凍融前沒有顯著差別，而凍融 6次后與凍融前相比，其陽性率有明顯下降，經對凍融前和凍融 6次后抗 HBs檢測相關性進行分析，發現凍融 6次后和凍融前無相關性，凍融前陽性標本 107份，而凍融 6次后下降至 99份，說明凍融對血清抗 HBs的檢測結果確有 影響， 原因尚不清楚 臨床上或血清流行病學調查研究中，血清可以放置在 20℃貯存，反復凍融將不會影響HBsAg的檢測結果；而對抗 HBs的檢測，應盡量避免反復凍融，進行多指標檢測時，應提前將所有試劑盒準備好，短時間內完成。 （摘自：經驗交流 文章編號： 10002790(2020)12108401） 凍融前 凍融 3次 凍融 6次 陽性數 陽性率 S/N均值 陽性數 陽性率 S/N均值 陽性數 陽性率 S/N均值 HBsAg 67 % 64 % 62 % HBsAb 107 % 110 % 99 １９ 對乙肝“二對半”檢測中“ HBsAg 陰性 HBeAg 陽性”現象的分析 楊海 背景介紹： 在乙型肝炎病毒 (HBV)血清標記物中 ,在一般情況下 ,HBeAg只出現于 HBsAg陽性血清中 , HBeAg是一種可溶性的蛋 白抗原 ,是完整的 HBcAg肽鏈的一部分 ,當 HBcAg被蛋白酶裂解時 ,HBeAg即游離出來分泌到外周血中 ,在血循環中與 Dane顆粒 ,出現時間相平行 ,與 HBV、 DNAP的消長動態也基本一致 ,而消失較早 ,是 HBV體內復制與具有傳染性的重要指標。而我們在用 ELISA法檢測 HBV五項血清學標記物時 ,發現 6例 HBsAg陰性而 HBeAg陽性的血清。 臨床資料及方法： 6例血清均來自 1997年 3月至 1998年 8月門診收檢的疑為乙型肝炎的患者。 試劑及方法試劑盒均由上海科華公司提供 (ELISA),嚴格按說明書操作。 結果 6例 血清 HBeAg均為陽性 ,而其他 4項標記物均為陰性。 HBeAg陽性的臨床意義： 作為急性乙型肝炎輔助診斷和預防的重要指標 。 有助于確定乙肝患者、無病狀 HBV攜帶者及孕婦的傳染性強弱 。 HBeAg單獨陽性表示病毒仍在體內復制 。 血清轉換期如用敏感方法檢測 HBeAb,可能同時陽性 ,但滴度較低。 分析： 筆者通過查閱文獻 ,及時對 6例患者的臨床資料綜合分析 ,認為以下因素可能是導致這一現象的主要原因 : 檢測方法不夠靈敏 ,HBV的檢測方法眾多 ,而近年來的臨床實驗室較普遍地采用 ELISA法 ,該方法要求血清中必須含一定量的 病毒顆粒 ,才可能顯示陽性結果 ,其靈敏度與 RIA相比 ,僅是 1/20,而現代發展起來的分子生物學方法 ,對病毒的敏感性更是提高了數百倍。在這 6例血清中 ,當我們送至上級醫院用 RIA法檢測時 ,有 3例 HBsAg陽性。 血清中類風濕因子 (RF)干擾。 RF本質為免疫球蛋白 IgM、 IgG,在抗原性上與 HBeAg具有類似的性質 ,而 ELISA法的本質為抗原 抗體復合反應 ,故 RF陽性的血清 ,HBV的檢測可能受到干擾 ,出現HBeAg假陽性。經檢測 ,在這 6例血清中 ,有 2例 RF陽性。據報道 ,此種血清熱聚變 IgG中和 HBeAg可轉陰 ,或用 F(ab)2片段制備的酶結合物 ,也可除去 RF的干擾。由于實驗條件限制 ,此點我們未加以驗證。 ２０ HBsAg與 HBsAb形成免疫復合物而致的影響 ,機體的免疫狀態與 HBV的消長密切相關。在正常狀況下 ,HBeAg的產生晚于 HBsAg而消失較早。對于一些免疫功能亢進的患者 ,由于抗 HBS產生過早 ,中和了 HBsAg,使之無法檢測出 ,而呈現 HBeAg陽性。 HBsAg主要以小球形顆粒存在 ,HBeAg僅存在于 Dane顆粒上 ,在 HBsAg消失與 HBsAb出現后 ,仍有部分 HBV遺留在血液中 ,其 Dane顆粒表面的 HBsAg被抗體包 裹 ,故檢測結果陰性。 試劑盒批間或批內的差異 ,而致 HBeAg假陽性。由于包被試劑的純度及工藝流程等的影響 ,試劑盒本身允許有一定的假陽性 (1%～ 2%)存在 ,導致實驗有誤差。 有文獻報道 [3],高滴度的 HBsAg易發生假陰性 ,即鉤狀效應或前帶現象 ,用生理鹽水稀釋后可排除干擾 ,我們做了 1∶ 10,1∶ 20,1∶ 100倍血清稀釋后 ,結果未變。可能是我們的標本量少的緣故。 HBV是具有高度變異性的病毒 (尤其是編碼 HBsAg的基因區 )為逃避人體免疫系統的攻擊 ,HBV經常發生突變而使我們現有的方法無法檢出。 討論 ： 乙型肝 炎是危害人類健康最嚴重的傳染病之一 ,而我國乙肝患者眾多 ,預防和治療負擔都很重 ,怎樣才能盡早盡快地發現 HBV感染或攜帶者 ,是廣大臨床實驗工作者應予關心的問題。對 HBV研究和檢測近年來有了迅速發展 ,但仍有許多現象無法解釋清楚。在全國各大小醫院里 ,ELISA法以其經濟、簡便、易于開展和掌握已成為確診乙型肝炎最直接的實驗診斷方法 ,其結果具有相當的可信性。但我們的發現說明 ,僅僅 HBsAg陰性 ,也不能認為無 HBV在體內復制。在本報道所列舉的6例血清中 ,有 3例 HBeAg假陽性 ,而另 2例 HBsAg假陰性 ,說明體內仍有 HBV復制。傳統的肝功能實驗僅檢測 HBsAg,而不檢測其他 4項 HBV標記物 ,按照我們的發現來估計 ,會有相當量的乙肝患者的漏診 ! 個人小結： 據上述文獻所報道就我公司 HBeAg項目前所出現的問題來分析，造成假陽性的原因是否與上述 7種原因有關，是否說明有一些假陽性是酶標試劑所共同存在的必然結果，針對此文摘所講述的內容并結合目前我公司 HBeAg項目存在的假陽性問題，通過系統調整可以解決一部分假陽性問題，那么無法解決的假陽性問題是否與上述 7種原因有關，我們的假陽性問題主要還是與原料有關，原料本身所造成的假陽性解決起來有一 定難度，是否可以找一些大量的 HBeAb強陽性的血清進行沉淀，純化，然后標記再進行檢測，若可行的話，是否可以減少原料所造成的假陽性問題。 （摘自《臨床薈萃》 2020年第 15卷第 15期） ２１ 電化學發光與酶聯免疫檢測血清甲胎蛋白的比較 梁崴 背景介紹：目前，臨床實驗室常規檢測血清甲胎蛋白（ AFP）多采用酶聯免疫法。近年來，電化學發光免疫法以其敏感、快速、穩定等優點，在固相標記免疫測定技術上居領先地位。為進一步了解電化學發光免疫法的特點，本文應用電化學發光免疫法與酶聯免疫法對比檢測 165 份臨床血清標本的 AFP含量， 對數據進行統計分析和比較。 目 的：電化學發光與酶聯免疫檢測血清甲胎蛋白的比較 方 法： 標本：隨機抽取 165份臨床送檢血清標本，包括正常和異常標本。 儀器與試劑：全自動酶免疫分析系統 ES300 和全自動電化學發光免疫分析系統Elecsys2020 及其配套試劑，質控品，羅氏公司提供。 方法：按儀器操作手冊，用配套試劑測定質控品，數值在標定值允許的變異范圍內，繼做線性、相關性、回收率、精密度測試。 結 果： 線性：電化學發光法在 ，酶聯法在，可見電化學發光法檢測范圍更寬，更能充分滿足臨床要求。 相關性：結果表明，兩法差異無顯著性，兩法相關性良好。 回收率：用電化學發光法與酶聯法測得平均回收率 。 精密度：結果表明，電化學發光法的重復性較酶聯法更好。見表 討 論： 電化學發光免疫法檢測結果的穩定性、靈敏度、精密度均優于酶聯免疫法。電化學發光免疫分析技術采用電促化學發光，使用非同位素金屬三聯吡啶釕作為標記物，由電極激發 ，在三丙胺的參與下，迅速穩定發光，使得檢測結果穩定可靠。磁性微珠包被技術的應用提高了檢測的靈敏度。 電化學發光免疫法檢測的線性范圍更寬。電化學發光采用磁性微珠包被技術，由于磁珠體積小，可以吸附更多的抗原或抗體，同時磁珠的核心是鐵，在磁場中很快下沉，因此容易進行洗滌和固相載體分離。發光信號檢測的寬線性加上獨特的標記物本身循環發光，使電化學發光檢２２ 測的線性范圍更寬。 試劑穩定性好，有效期長。由于非同位素金屬三聯吡啶釕在自然環境下非常穩定，因此用它標記的試劑也非常穩定。而酶聯免疫法采用酶作為標記物，通過 顯色強度反映待測物質的濃度，由于許多因素影響酶和底物的活性，因而試劑的穩定性、靈敏度略顯不足。 快速進行免疫反應，較酶聯免疫法大大縮短了時間，提高了工作效率。一次性加樣頭的使用及流動沖洗過程，徹底避免了交叉污染。 隨著檢驗醫學的飛速發展，免疫測定的新方法、新技術不斷出現，電化學發光免疫技術的應用實現了免疫測定的自動化，具有靈敏度高、結果穩定、線性范圍寬、測定速度快、試劑保存期長、應用范圍廣等優點，顯示出很好的應用前景。 （摘自：中華醫學檢驗雜志 2020年 7月第 24卷第 4期） 盧龍縣戊性肝炎流行特征調查 蔡芳 為了解本地區戊型肝炎 (HE)流行特征， 1994年 5月至 1995年 4月對 1 57例散發性肝炎病人和 57例急性暴發流行的肝炎病人進行戊性肝炎的病原和流行病學調查。結果：散發性急性肝炎中戊型肝炎感染率為 %，急性爆發肝炎病人中戊肝感染率為 %，沒有顯著性差異，流行特點為散發； 31例（占 100%）戊型肝炎病人均有接觸肝炎病人史和不潔飲食史；與甲肝混合感染率高，為%；男女發病比例為 1:，發病平均年齡為 ，大于甲肝的發病年齡。發病多為 8~10月份與甲肝發病月份相似。 （摘自 ：現代預防醫學 1997年第 24卷第 2期 唐景裕等） 369 例病毒性肝炎患者抗 HEV 的檢測與分析 蔡芳 1992 年 1月至 1992 年 12月住院的 369 例病毒性肝炎患者血清中抗 HEV 的檢出率