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dna的結構ppt課件(編輯修改稿)

2026-05-28 18:15 本頁面

　

【文章內容簡介】 ? 已有實驗結果表明－－真核細胞端粒中存在四鏈結構可能的功能 A、穩定真核生物染色體結構 B、保證 DNA末端準確復制 C、與 DNA分子的組裝有關 D、與染色體的 meiosis amp。 mitosis 有關 Hoogsteen Bonding 5’TTAGGGTTAGGGTTAGGGT 3’AATCCCAATCCC GGG T A 第四節 DNA的物理、化學性質 DNA雙股鏈的互補是其結構和功能上的一個基本特征也是 DNA研究中一些實驗技術的基礎一、 DNA分子的變性變性（ denaturation 或融解 melting）： DNA雙螺旋區的氫鍵斷裂，使雙螺旋的兩條鏈完全分開變成單鏈，這一雙鏈分離的過程叫做變性條件：加熱 , 極端 pH,有機溶劑（尿素、酰胺 )，低鹽濃度等變性過程的表現 164。是一個爆發式的協同過程，變性作用發生在一個很窄的溫度范圍 164。導致一些理化性質發生劇烈變化表現為： ※ 熔液黏度降低 ※ 沉降速度加大 ※ 浮力密度上升 ※ 此外吸收值升高（ A260nm），即增色效應指在 DNA變性的過程中，他在 260nm的吸收值先是緩慢上升，達到某一溫度時及驟然上升天然 DNA和變性 DNA的吸收值相差可達 34％ DNA A260 = DNA A260 = dNTPs A260 = 當濃度為 50μg/ml時： OD ℃ Tm = OD增加值的中點溫度 (一般為 8595℃ ) 或 DNA雙螺旋結構失去一半時的溫度熔解曲線與融解溫度 (Tm值 ) 緩慢而均勻地增加 DNA 溶液的溫度（現可做到 ℃ ／分）可根據各點的 A260值繪制成 DNA 的熔解曲線這也是一般 PCR實驗技術中把變性溫度定為 94 ℃ 的原因影響 Tm值的因素（ 1）在 A, T, C, G 隨機分布的情況下，決定于 GC含量（ 2） GC%含量相同的情況下 GC%愈高 → Tm值愈大 GC%愈低 → Tm 值愈小 AT形成變性核心，變性加快， Tm 值小堿基排列對 Tm值具有明顯影響 5` GC 3` CG n ＞＞ 5` CG 3` GC n 5` TA 3` AT n ＜＜ 5` AT 3` TA n ℃ ℃ Tm ℃ ℃ ※ 嘌呤嘧啶的排列順序對雙螺旋結構（穩定性）的影響即－－氫鍵數目相同，但相鄰堿基的堆積力不同從嘌呤到嘧啶方向的堿基堆積力作用顯著地大于同樣組成的嘧啶到嘌呤方向的堿基堆積作用 PyrimidinePurine Steps Have Little Base Stacking 5’ 3’ 3’ 5’ C G A T 5’ CA 3’ 3’ GT 5’ PurinePyrimidine Steps Have Extensive Base Stacking 5’ 3’ 3’ C A T G 5’ 5’ AC 3’ 3’ TG 5’ ? 生物體內僅 UAA為最有效的終止密碼子因為： UAA AUU 的 Tm值是最低的一個，即使生理溫度下也不穩定（ 3）大片段 DNA分子之間比較片段長短對 Tm值的影響較小 , 與組成和排列相關（ 4）小于 100bp 的 DNA分子比較片段愈短，變性愈快， Tm值愈小（ 5）變性液中含有尿素，甲酰胺等尿素，甲酰胺與堿基間形成氫鍵改變堿基對間的氫鍵 Tm 值可降至 40℃ 左右（ 6）鹽濃度的影響每升 Na+是常用的標準條件

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