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菌種分離篩選ppt課件(編輯修改稿)

2026-05-31 12:07 本頁面

　

【文章內容簡介】．用標準方法作對照來評價生態學分離方法； 8．根據待檢材料的生態參數需要，修改已知的方法； 9．運用特定的富集方法，富集那些可能具有篩選意義的微生物類群。四、自然界中細菌的分離 (一 )采樣和采集方法 ? 為了從一特定生態系統中分離出具有代表性的細菌菌群，特別是分離那些在唯一微環境區域中出現的菌群時，必須十分重視樣本的采集。 ? 樣本采集時所需的工具通常有無菌刮鏟、土樣采集器、鑷子、解剖刀、手套、無菌小塑料袋和塑料瓶等。采樣的注意事項采樣時應盡可能保持相對無菌；所采集的樣本必須具有某種代表性；采好的樣必須完整地標上樣本的種類及采集日期、地點以及采集地點的地理、生態參數等；應充分考慮采樣的季節性和時間因素，因為真正的原地菌群的出現可能是短暫的； ? 采好的樣應及時處理，暫不能處理的也應貯存于 4℃ 下，但貯存時間不宜過長。這是因為一旦采樣結束，試樣中的微生物群體就脫離了原來的生態環境，其內部生態環境就會發生變化，微生物群體之間就會出現消長 (二 )生態學參數及培養基的組成原則加入培養基中的天然提取物種類和用量、環境生物物理學參數以及用于平板涂布分離樣本的溶劑都會影響實驗中所要分離的細菌的數量和種類。就分離培養基的組成而言，部分培養基中含有1050%的天然提取物。加入培養基中的天然提取物，部分培養基中則應含有多種碳、氮源，如幾丁質、纖維素或果膠。所有分離培養基中都應含有抗真菌劑 (如放線菌酮和制霉素 )，摻加濃度一般為 50μg／ m1，以抑制真菌的生長。瓊脂平板在使用前應置于 37℃ 培養箱中孵育 l、2天。培養基的生物物理學參數，如 pH及鹽分也應調節到與試樣的生態系統參數值相近。二、分離 ? 目的微生物不純，需分離純化。采用簡便迅速，有一定準確性的檢出方法，提高篩選效率。常用平皿反應法： ? 紙片培養顯色法：浸有指示劑濾紙。 ? 透明圈法：混濁底物被分解后形成透明圈。如可溶性淀粉、碳酸鈣等。變色圈法：直接用顯色劑或指示劑。生長圈法：利用某些具有特殊營養要求的微生物作為工具菌，要分離的微生物能在一般培養條件下生長而合成該營養物而使工具菌能生長，形成生長圈。抑制圈法：瓊脂塊培養法。用剛果紅染色法鑒定篩選降解纖維素的菌株羧甲基纖維素鈉作培養物抗生素篩選檢定菌培養，加上發酵液五、放線菌的分離培養基的組成原則 ? 大多數放線菌的分離培養是在貧脊或復雜底物的瓊脂平板上進行的。除嗜溫性放線菌外，其他放線菌一般在培養 420天內在分離平板上緩慢形成菌落。 ? 在放線菌分離瓊脂中通常都加入抗真菌劑制霉菌素或放線菌酮，以抑制真菌的繁殖。 ? 選擇性地添加抗生素。 ? 分離瓊脂平板制備好后，一般皆應在 37℃ 培養箱中存放 3天。放線菌的分離 ? 土樣中放線菌的非選擇性分離：土樣風干，磨碎，無菌海綿壓印土樣后壓印平板后培養。 ? 植物體上放線菌的分離：無菌取植物組織，干燥以減少細菌數量，剪碎植物材料后植入平板表層后培養。也可洗下微生物后振蕩培養

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