光譜分析技術(shù)huppt課件(編輯修改稿)

　

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 s ，則觀察到的吸光度為： ?隨著儀器制造工藝的提高，絕大部分波長(zhǎng)內(nèi)雜散光的影響可忽略不計(jì)。 ?但在接近紫外末端處，因在短波長(zhǎng)光源強(qiáng)度和檢測(cè)器靈敏度均減弱，雜散光的比例相對(duì)增大，測(cè)定時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)假峰。 ?如用鎢燈作為光源時(shí)， 350400nm波長(zhǎng)雜散光影響顯著；若用紫外光源時(shí)， 220nm以下的雜散光迅速增大。 散射光和反射光 ?吸光質(zhì)點(diǎn)對(duì)入射光有散射作用，吸收池內(nèi)外界面之間入射光通過(guò)時(shí)又有反射作用。 ?散射光和反射光均由入射光譜帶寬度內(nèi)的光產(chǎn)生，對(duì)透射光強(qiáng)度有直接影響。散射和反射作用致使透射光強(qiáng)度減弱。 ?真溶液散射作用較弱，可用空白進(jìn)行補(bǔ)償。混濁溶液散射作用較強(qiáng)，一般不易制備相同的空白溶液，常使測(cè)得的吸光度偏離，分析中不容忽視。 非平行光 ?通過(guò)吸收池的光，一般都不是真正的平行光，傾斜光通過(guò)吸收池的實(shí)際光程將比垂直照射的平行光的光程長(zhǎng)。使厚度增大而影響測(cè)量值。 ?這種測(cè)量時(shí)實(shí)際厚度的變異也是同一物質(zhì)用不同儀器測(cè)定吸光系數(shù)時(shí)，產(chǎn)生差異的主要原因之一。 干擾的產(chǎn)生及其消除 干擾物質(zhì)的影響有以下幾種情況： ?干擾物質(zhì)本身有顏色或無(wú)色但與顯色劑形成有色化合物，在測(cè)定條件下也有吸收； ?在顯色條件下，干擾物質(zhì)水解，析出沉淀使溶液混濁，致使吸光度的測(cè)定無(wú)法進(jìn)行； ?與待測(cè)離子或顯色劑形成更穩(wěn)定的配合物，使顯色反應(yīng)不能進(jìn)行完全。 控制酸度 ?根據(jù)配合物的穩(wěn)定性不同，可以利用控制酸度的方法提高反應(yīng)的選擇性，保證主反應(yīng)進(jìn)行完全。 ?例如，雙硫腺能與 Hg2+、 Pb2+、 Cu2+、 Ni2+、Cd2+、等十多種金屬離子形成有色配合物，其中與 Hg2+生成的配合物最穩(wěn)定，在，而上述其他離子在此條件下不發(fā)生反應(yīng)。 選擇適當(dāng)?shù)难诒蝿? ?使用掩蔽劑消除干擾是常用的有效方法。 ?選取的條件是掩蔽劑不與待測(cè)離子作用； ?掩蔽劑以及它與干擾物質(zhì)形成的配合物的顏色應(yīng)不干擾待測(cè)離子的測(cè)定。 利用生成惰性配合物 例如鋼鐵中微量鈷的測(cè)定 ? 常用鈷試劑為顯色劑，但鈷試劑不僅與 Co2+發(fā)生反應(yīng)，而且與 Ni2+、 Zn2+、 Mn2+、 Fe2+、等都有反應(yīng)。 ? 鈷試劑與 Co2+在弱酸性介質(zhì)中一旦完成反應(yīng)后，即使再用強(qiáng)酸酸化溶液，該配合物也不會(huì)分解。 ? Ni2+、 Zn2+、 Mn2+、 Fe2+、等與鈷試劑形成的配臺(tái)物在強(qiáng)酸介質(zhì)中很快分解，從而消除了上述離子的干擾，提高了反應(yīng)的選擇性。 選擇適當(dāng)?shù)臏y(cè)量波長(zhǎng) 例如在 K2Cr2O7存在下測(cè)定 KMnO4時(shí) ? 不是選 λmax(525nm)，而是選 λ=545nm。這樣測(cè)定 KMn04溶液的吸光度， K2Cr2O7就不干擾。 選擇適宜的空白溶液 ?空白溶液又叫參比溶液。空白溶液除用以校正儀器透光率 100％或吸光度為零，除作為測(cè)量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)外，在中藥制劑分析中還用于消除干擾吸收。 ?溶劑、試劑、器皿及試樣本身都可能引入干擾因素。 ?常見(jiàn)的空白溶液有： 溶劑空白、 試劑空白、試樣空白、不顯色空白、平行操作空白等。 溶劑空白 ? 在測(cè)定入射光波長(zhǎng)下，溶液中只有被測(cè)組分對(duì)光有吸收，而顯色劑和其他組分對(duì)光無(wú)吸收，或雖有少許吸收，但所引起的測(cè)定誤差在允許范圍內(nèi)，在此情況下可用溶劑作為空白溶液。 試劑空白 ? 相同條件下只是不加試樣溶液，依次加入各種試劑和溶劑所得到的溶液稱為試劑空白溶液。適用于在測(cè)定條件下，顯色劑或其他試劑、溶劑等對(duì)待測(cè)組分的測(cè)定有干擾的情況。 試樣空白 ? 與顯色反應(yīng)同樣的條件取同量試樣溶液，不加顯色劑所制備的溶液稱為試樣空白溶液。適用于試樣基體有色并在測(cè)定條件下有吸收，而顯色劑溶液無(wú)干擾吸收．也不與試樣基體顯色的情況。 不顯色空白 ? 某些顯色反應(yīng)，當(dāng)改變?cè)噭┘尤腠樞蚧蚰骋徊僮鳎ㄈ缂訜岣臑椴患訜幔r(shí)，可使被測(cè)組分與顯色劑的顯色反應(yīng)不發(fā)生，這樣配制的溶液稱為不顯色空白溶液。這種空白能夠同時(shí)消除試樣基體和試劑的干擾。 平行操作空白 ? 如果容器、器材、溶劑、試劑以及環(huán)境可能帶入被測(cè)組分或干擾組分時(shí)．可采用不含被測(cè)組分的試樣基體作為空白試樣，與試樣在完全相同條件下平行操作，然后用此溶液為空白溶液，這種空白可當(dāng)作一個(gè)試樣來(lái)處理，測(cè)得的結(jié)果稱為空白值，應(yīng)從試樣測(cè)得結(jié)果中減去。 分離 ?若上述方法不宜采用時(shí)，也可以采用預(yù)先分離的方法，如沉淀、萃取、離子交換、蒸發(fā)和蒸餾以及色譜分離法等。 ?此外，還可以利用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法實(shí)現(xiàn)多組分同時(shí)測(cè)定。 定性分析 定量分析 分光光度法的具體應(yīng)用 第四節(jié) 分光光度法的應(yīng)用 比較吸收光譜曲線。 比較最大吸收波長(zhǎng)。 比較吸光度比值。 定性分析 定性分析缺點(diǎn)： ?紫外和可見(jiàn)光譜的特征吸收帶是主要的定性依據(jù)，但在定性分析上的應(yīng)用是有限的，因?yàn)槠湮諑Ш軐挘狈?xì)結(jié)構(gòu)的特征，在定性方面不如紅外吸收光譜。 ?如果只有一兩個(gè)發(fā)色團(tuán)相同，其它部分的結(jié)構(gòu)略有不同，對(duì)紫外和可見(jiàn)光譜影響變化不大，往往具有十分接近的吸收光譜。 ?所以在鑒定化合物時(shí)要注意，即使是光譜相同，未必是同一種化合物，要采用其它分析方法配合進(jìn)一步鑒定。 定量分析 ?定量分析的依據(jù)是比耳定律、在液層厚度一定時(shí)，溶液的濃度與吸光度要成正比關(guān)系。 ?標(biāo)準(zhǔn)曲線法、對(duì)比法、標(biāo)準(zhǔn)增量法，多組分混合物分析法，雙波長(zhǎng)分光光度法。 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 ? 將一系列濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液按照一定操作過(guò)程顯色后，分別測(cè)吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 ? 在相同條件下處理待測(cè)物質(zhì)并測(cè)定其吸光度，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線找出相對(duì)應(yīng)的濃度。 對(duì)比法 ? 先配制一種己知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液 C標(biāo)，測(cè)其吸光度為 A標(biāo) ，再在相同條件下測(cè)得樣品溶液的吸光度為 A樣 ，根據(jù)下列公式求得樣品濃度。 ? 此法可不做標(biāo)準(zhǔn)曲線．但要求溶液中的待測(cè)物質(zhì)能嚴(yán)格符合光的吸收定律，而且樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值較為接近．這種方法的測(cè)定誤差比標(biāo)準(zhǔn)曲線法要大一些。 標(biāo)準(zhǔn)增量法 ?采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法使未知樣與標(biāo)準(zhǔn)樣保持一致，在實(shí)際中并不是總能做到的， 采用增量法可以彌補(bǔ)這一缺點(diǎn)。 ?方法是將未知樣分成體積相同若干份，除其中一份不加已知被測(cè)組分外，其余都加，在合適條件下測(cè)定．如未知樣不含被測(cè)組分，吸光值 A應(yīng)為零，曲線過(guò)原點(diǎn)。 ?但實(shí)際沒(méi)過(guò)原點(diǎn)，上截矩 A1，校正后，曲線延長(zhǎng)至 OO’濃度為 Cx如圖。 ?此法還可以檢查實(shí)驗(yàn)過(guò)程的系統(tǒng)誤差．設(shè)樣品中校測(cè)組分真實(shí)含量為 Cx．實(shí)驗(yàn)值為C1，在樣品中增加已知量 b時(shí)，測(cè)得實(shí)驗(yàn)值為 C2，實(shí)驗(yàn)過(guò)程系統(tǒng)誤差為 k則： ?必要條件是當(dāng)被測(cè)組分含量的變化時(shí) K不隨其改變