生物技術制藥教案打印(編輯修改稿)

　

【文章內容簡介】 （ 2）、意義 對醫學有重大意義，療效優于傳統治療；對藥學，研究清楚這些藥物的結構和功能，可幫助利用生物技術來制備新藥。 二、人體來源藥物的種類和用途 血液是一種流動性結締組織，循環于心血管系統內，它將身體必須的營養物質和氧氣輸送到各個器官、組織、和細胞；同時將機體 不需要的代謝產物運送到排泄器官。血液還對入侵的微生物、病毒、寄生蟲等，以及其它有害物質發生反應，保護機體免遭損害；血液是體液的一個重要組成部分，在維持機體內環境相對穩定方面起著重要的作用。 體液，人體內含有大量液體，包括水分和其中溶解的物質，成人，約占體重的 60%，總稱為體液。體液三分之二在細胞內，三分之一在細胞外，存在于血管內的血漿、淋巴管內的淋巴液、細胞間隙的和組織間隙的組織液。 血液的組成：血細胞 45%（紅細胞、白細胞、血小板） +血漿 55%（水、蛋白質、脂質、糖類、無機鹽、代謝產物），容積百分比。從正 常人體抽出的血液，放入內有抗凝劑的試管中，經離心沉降，分為兩層，上層淡黃色透明液體為血漿，下層是血細胞，血細胞層中最上面一薄層為白細胞和血小板，下層呈紅色的是紅細胞。如果抽出的血液不加抗凝劑，幾分鐘后會凝固成血凝塊，血凝塊收縮，析出淡黃色澄明液體，成為血清。 人血液成分制品 可分為全血制品、血液成分制品、血漿成分制品和體液細胞內成分制品。血液成分制品包括紅細胞、白細9 胞、血小板和血漿。通過離心和過濾的方法得到。 （ 1）、紅細胞制劑 適用于需要提高血液攜氧能力和補充血紅蛋白，而又不需要補充維持血容量的場合。 壓積紅細胞可直接輸注，必要時可加入適量的生理鹽水稀釋，以改善流動性。是心臟病、慢性腎病和肝病患者補充血紅蛋白的手選品種，對于骨髓功能衰竭性貧血、術前和術后需要補充血紅蛋白者和其他原因造成的低血紅蛋白者都十分有效。 少含白細胞的壓積紅細胞，對于需要經常輸血的慢性病人特別適用。 冰凍儲藏紅細胞在零下 80 度到零下 196 度可長期保存，稀有血型的紅細胞可以包藏多年，重融后回收良好，缺點是保藏費用昂貴，適用于給腎臟移植患者輸用。 （ 2）、白細胞濃縮液 腫瘤病人經細胞藥物治療后，處于骨髓細胞抑制期間遭受感染且各種抗生素 治療無效時采用，療效顯著。 白細胞成分需用單采粒細胞技術（即將所有其他血液成分全部回輸給供體）自供血者血循環中采集。過濾或離心細胞存活率很低。 白細胞有幾個組織相容性的 HLA(human leucocyte locus A)位點，即人 A位點，使得輸入體內的白細胞存活率很低，應輸入 HLA組織抗原相容的白細胞，供體不易獲得。離體白細胞保存問題尚未解決。 白細胞是生產干擾素的重要原料，干擾素是由干擾素誘生劑誘導有關生物細胞所產生的異類高活性、多功能的誘生蛋白質，可用于提高人體免疫功能。 （ 3）、血小板制劑 適應癥 為白血病、淋巴瘤及其它腫瘤因治療而導致的骨髓抑制癥狀。血小板可促進止血和加速凝血，營養支持作用 — 維護毛細血管壁完整性。 人體輸注血小板很快會產生抗體，使輸入的血小板遭到破壞，還會引起短期的白細胞減少，最好使用 HLA相容的血小板輸入。 （ 4）、新鮮冰凍血漿（ FFP） FFP 能有效保存血漿中各種生物活性成分的功能，產品規定自采血到血漿冰凍的時間不超過 8 小時，在零下30 度保存。可用于先天性或獲得性凝血因子缺乏癥、免疫球蛋白缺乏癥。 血漿的綜合利用 血漿中除去水外，主要成分為蛋白，即白蛋白和球蛋白。 （ 1）、傳 輸蛋白類 能在血液中對機體的營養物質、代謝產物、激素、藥物等進行傳輸的血漿蛋白，第 28 頁表 22 列出了主要的血漿傳輸蛋白及其功能，含量最高的是白蛋白，白蛋白的主要功能是結合并傳輸脂肪酸、各種色素、陽離子、維生素 C，各種藥物（抗生素、磺胺類）；類脂蛋白傳輸脂質、固醇、和激素等；觸珠蛋白結合并傳輸循環中游離的血紅蛋白；血紅蛋白結合蛋白專一結合并傳輸游離的血紅蛋白。 （ 2）、免疫球蛋白 構成機體防御感染的體液免疫系統，和細胞免疫一起對機體抵抗外來病原物的侵襲，發揮重要作用。 G、 A、M、 D、 E。 （ 3）、凝血系統蛋 白 維持機體正常凝血機制，保護血管滲漏方面起重要作用。包括與凝血有關的蛋白質、酶或因子等。如纖維蛋白酶原、凝血酶原；與溶纖有關的酶，如纖溶酶原、纖溶酶，有溶栓作用。 （ 4）、補體系統蛋白 是機體的主要防御體系之一，在許多生物學反應中，如吞噬、趨化和細胞溶解等，均起重要作用。另外補體在自身免疫性及循環免疫復合物性疾病中起著損傷機體的作用。 （ 5）、蛋白酶抑制物類 抗胰蛋白酶含量最高，保護機體正常細胞不受蛋白酶的破壞和損傷，能協助控制感染和炎癥，維持機體內環境的穩定。 10 人體液細胞中的活性物質 體液細胞包括紅 細胞、白細胞、淋巴細胞、血小板、成纖維細胞等。活性物質主要是干擾素α、白介素 超氧化物歧化酶等。 人類來源的其他原料的利用 （ 1）、人胎盤的利用 主要有人胎盤丙種球蛋白、人胎盤白蛋白、人胎盤 RNA酶抑制劑，人胎盤能分泌多種激素如絨膜促性激素、絨膜促乳激素。 （ 2）、人尿的綜合利用 從健康男性尿液中可制備尿激酶、激肽釋放酶、尿抑胃素、蛋白酶抑制劑、睡眠因子、集落刺激因子、表皮生長因子。從妊娠婦女與絕經婦女尿液中可制備絨膜促性激素。 細胞因子 （ 1）、特點和生理作用 在體內或體外對效應細胞的生長、增 殖和分化起調節控制作用的一類物質。化學本質主要是蛋白質和多肽，許多生長因子在靶細胞上有特異性受體，如細胞生長因子和細胞生長抑制因子。 細胞因子可促進受損組織的恢復，對正常組織無作用， （ 2）、主要種類 100 種以上，大部分來源于動物，見表 28。 人體激素 激素是調節機體正常發育和活動的重要物質，是由一類動物體內腺體細胞和非腺體組織細胞所分泌的化學信息分子。 激素主要有：蛋白質激素、多肽激素、氨基酸衍生物激素、脂類激素。激素在體內含量很低，研究目的不是用生物體來提取，而是用于指導用其他原料進行生產和如何 正確使用激素藥物進行治療。 現在的生產方法有：用動物提取，半合成法，基因工程法。 三、人體來源藥物的制備實例 人血漿白蛋白制劑的制備 （ 1）、結構和性質 白蛋白又稱為清蛋白，約占血漿總蛋白的 65%，同種白蛋白制品無抗原性，可傳輸和維持血漿膠體滲透壓。 人體中分離的白蛋白有兩種，從健康人血漿中分離的人血清白蛋白和從健康產婦胎盤中分離的胎盤白蛋白。 （ 2）、工藝路線 人血漿在攪拌下加入碳酸氫鈉調節 pH 至 ，加入等體積的 2%的利凡諾溶液，充分攪拌后靜置 24 小時，分離上清夜與絡和物沉淀。 向絡和物沉淀中加 入無菌水，用 摩爾每升的鹽酸調節 pH 至弱酸性，加氯化鈉至 %%，攪拌下進行解離。 充分解離后， 65℃恒溫 1 小時，離心分離出上清夜。 熱處理， 60℃， 10 小時，滅活病毒。 將熱的處理液除菌過濾，收集濾液，即白蛋白溶液，將溶液進行冷凍干燥得到白色疏松物質。 檢驗方法：外觀為白色疏松物質，白蛋白含量達 95%以上，水分小于 1%，水溶后 pH 為 ，硫酸銨殘量小于 %，細菌學和熱源檢測合格。 工藝要點見上面。 尿激酶的制備 （ 1）、結構與性質 有多種分子形式，主要為 *103和 *103兩種，分子量為 *103的天然尿激酶是由分子量為 *103和 *103 兩條肽鏈通過二硫鍵連接而成的。該酶是絲氨酸蛋白酶、絲氨酸、組氨酸是活性中心必需的氨基酸。專一性很強，血纖維蛋白溶酶原是它唯一的天然底物，使纖溶酶原轉變為纖溶酶。該酶可廣泛應用11 于治療各種新血栓形成或血栓梗塞疾病。 （ 2）、工藝路線 收集男性尿液在 8 小時以內處理，在 10℃下調 ，離心收集上清夜。 將上清夜調 以下，電導 203摩爾每歐姆，細菌數 1000 個每毫升以下。 向處理好的尿液中加入 1%的硅藻土， 5℃下攪拌吸附 1 小時。 5℃下用無菌水洗滌硅藻土。 洗脫，將洗后的硅藻土裝柱，用 %氨水內含 摩爾每升氯化鈉的溶液洗脫，當洗脫液由清變渾時開始收集。 上述收集的洗脫液用飽和磷酸二氫鈉調 ，加氯化鈉調電導至 22 摩爾每歐姆，通過 DEAESephadexA50，收集流出活性部分，將熱源和色素吸附在柱子上。 上述收集液用 1 摩爾每升的醋酸調 ，用蒸餾水調電導至 1617 摩爾每歐姆，通過 CMC層析柱，吸附、濃縮。 洗脫，用 10 體積的 醋酸鈉緩沖液洗滌柱子，洗后 ，用 0. 1%氨水 0. 1摩爾每升氯化鈉溶液洗脫尿激酶，收集洗脫液。 洗脫液在 4℃下用水進行透析，將透析液冷凍干燥制成成品。 工藝要點見上面。 白介素 2 的制備 （ 1）、性質 由活化的淋巴細胞所產生含 133 個氨基酸殘基的糖蛋白。 （ 2）、工藝路線 人血液白細胞用雞瘟病毒和絲裂原培養液聯合刺激， 37℃下，通二氧化碳培養，收集誘生白細胞培養液。 將收集的誘生白細胞培養液用 6 摩爾每升的鹽酸調節 6 摩爾每升的氫氧化鈉調節 ，病毒滅活，離心除去變性雜蛋白。 硫酸銨分級沉淀：上清 夜加飽和硫酸銨溶液至 飽和度， 4℃靜置 24 小時，離心，棄去沉淀，上清夜中補加固體硫酸銨至 飽和度， 4℃靜置 24 小時，離心，收集沉淀。 除鹽：將沉淀溶