厚樸中厚樸酚與和厚樸酚提取工藝研究畢業論文(編輯修改稿)

　

【文章內容簡介】 10H18O12αterpineolC10H18O13piperitoneC10H18O14borneolacetateC12H20O215copaeneC15H2416βelemeneC15H2417isocaryophylleneC15H24表 十五年生厚樸干皮（未發汗）的揮發油成分分析結果續[10]NotR／min化合物名稱分子式相對含量／%18caryophylleneC15H2419αcaryophylleneC15H2420γcadineneC15H2421αselineneC15H2422γselineneC15H2423δcadineneC15H2424αcalacoreneC15H2025caryophylleneoxideC15H24O26γeudesmolC15H25O27hinesolC15H26O28βeudesmolC15H26O29cadaleneC15H18301, 3, 5tris(1methylethyl) benzeneC15H2431nhexadecanoic acidC16H32O232linoleic acidC18H32O22．木脂素 木脂素類成分是厚樸中分離出來的最多的一類化合物，迄今為止已分離出20多種木脂素類化合物，多數屬于新木脂素。主要有厚樸中含量最多的也是起主要藥效作用的厚樸酚（magnolo1）與和厚樸酚（honokio1）[12]（）。厚樸酚與和厚樸酚是一對同分異構體，由兩分子苯丙素通過33’碳原子相連，主要從厚樸的樹皮、根皮中得到，也有從葉中獲得的[13]，還有厚樸酚與和厚樸酚結構類似的化合物及二聚體，如厚樸三醇B（Magnatriol B）、厚樸醛B，D（Magnoldehyde B，D）、單菇木脂素、木蘭醌、4Omethylhonokiol，3Omethylmagnolol、magnaldehyde B、magnolignan A 和magnolignan C等[14]。此外，還有厚樸木脂素F等雙木脂素[15]。 厚樸酚與和厚樸酚的分子結構圖3．生物堿 厚樸樹皮中含有生物堿，王洪燕等對凹葉厚樸Magnolia officinalis ，采用離子交換樹脂法提取總堿，硅膠柱層析法分離純化，最后分得9個異喹啉生物堿，分別為N降荷葉堿、lirinidine、羅默堿、番荔枝堿、lysicamine、鵝掌楸堿、瑞枯靈、isosalsoline和Nmethylisosalsoline[。Pyo等從日本厚樸Magnolia obovata葉中分得5個有活性的阿樸啡生物堿類化合物。其余生物堿類成分主要為厚樸堿（Mcurarine），此外還有木蘭花堿（Salicifoline）、武當木蘭堿（magnosprengerine）、白蘭花堿（michelarbine）、木蘭箭毒堿（magnocurarine）等[12，14]。4．其他 龍飛首次對厚樸葉化學成分進行了分離鑒定。分離得9個化合物，經理化和波譜分析，鑒定出7個成分，分別為棕櫚酮、槲皮苷、蘆丁、花生酸、二十六烷醇、β谷甾醇、胡蘿卜苷，均為首次從厚樸中分離得到[15]。 藥理作用1．對消化系統作用 厚樸的提取物厚樸醇有明顯抑制小鼠鹽酸性潰瘍的形成，厚樸50%乙醇提取物對鹽酸乙醇型潰瘍有顯著保護作用。厚樸活性成分厚樸酚有顯著抑制胃酸分泌和抗潰瘍作用。厚樸酚提取物明顯對抗番瀉葉性小鼠腹瀉，對大鼠膽汁流量有明顯促進作用，表明厚樸與溫里藥一樣具有促進消化系統的作用。厚樸主治病食不消、寒濕瀉痢、溫中止痛[3]。2．鎮痛抗炎藥理作用 厚樸為芳香化濕中藥，辛能散結；苦能燥濕、溫熱祛風寒，具有鎮痛抗炎活性。厚樸乙醇提取物5 g／kg、15 g／kg均有明顯鎮痛作用，明顯減少乙酸引起的小鼠腹腔毛細血管通透性升高，并明顯抑制二甲苯引起的小鼠耳腫及角叉菜膠引起的小鼠足跖腫脹。實驗表明厚樸有明顯抗炎鎮痛作用[4]。厚樸酚對小鼠體內A23187引起的胸膜炎具有很好的抗炎療效，厚樸酚在濃度10 mg／kg的劑量時可減輕A23187引起的蛋白質泄漏，A23187引起的分葉核白細胞的滲透被厚樸酚抑制，同時，厚樸酚減少了胸膜液體中的前列腺素和白三烯水平，厚樸酚／L時還抑制由A23187引起的凝血唔烷B2（TXB2）和LTB4的形成。其抗炎機理是厚樸酚可能是一種環氧酶（COX）和脂肪氧化酶（LO）的雙重酶抑制劑，其抑制效果是在炎癥位置減少花生酸中間體的形成而實現的[38]。另外，抑制溶酶體酶的釋放也可能是厚樸酚抗炎作用機制之一。厚樸酚在l100μmol／L可以增加趨化三肽激活的大鼠中性粒細胞的超氧陰離子，在大于10 mol／L時可以明顯地抑制激活的中性粒細胞葡萄糖苷酸酶和溶菌酶的釋放。3．中樞性、末梢性肌松弛與抗痙攣作用 厚樸常用于極度精神緊張、興奮狀態及原因不明振顫。厚樸的提取物厚樸酚與木蘭箭毒堿具有神經肌肉接頭阻斷作用，能引起類似麥酚生的中樞性肌松弛作用。和厚樸酚具有鎮靜、抗焦慮作用。在超高劑量下，β桉葉油醇和二苯基乙內酰脲鈉顯示了更強的阻止電休克癲癇發作作用，β桉葉油醇有望成為鎮癲劑或二苯基乙內酰脲鈉抗癲療法中的協同治療劑[4]。4．心肌保護作用 厚樸的活性成分厚樸酚，試驗證實對心肌具有保護作用。進行冠脈結扎大鼠抗心律失常和防止心肌缺血的研究顯示，大鼠在冠脈結扎前15分鐘，分別靜注1010109 g／kg的厚樸酚后，10 7g／kg劑量即能顯著降低冠脈結扎30分鐘后大鼠的室性心動過速和室顫發生率和持續時間。在解除結扎后的10分鐘再灌注，室性心律失常的發生也大為減少。對冠脈結扎4 h的大鼠，1010109g／kg各劑量的厚樸酚能顯著減少心肌梗死范圍[5]。 5．抗茵作用 厚樸的乙醚和甲醇提取物對致齲變形鏈球菌有強抗菌作用，其抗菌活性成分確定為厚樸酚，對變形鏈球菌的最低抑菌濃度（MIC） g／ml，其抗菌作用（對變形鏈球菌）比黃連素更強。厚樸的初提成分厚樸堿與厚樸揮發油飽和水溶液對金黃色葡萄球菌，疊球菌和枯草桿菌有一定的抑菌作用，厚樸對肺炎雙球菌和痢疾桿菌也有抗菌活性。厚樸酚與和厚樸酚具有明顯抗真菌作用。厚樸酚與和厚樸酚對須癬毛癬菌、石膏狀小孢霉、絮狀表皮癬菌、黑曲霉、新生隱球菌、白色念珠菌的最小抑菌濃度（MIC）均為5100μg／mL[23] 。和厚樸酚對牙齒周圍的病原菌也具有顯著的抑制作用，馮瑾等研究了厚樸活性成分厚樸酚與和厚樸酚對5種致齲菌的生長和產酸的影響，5種致齲菌分別為變形鏈球菌、血鏈球菌、內氏放線菌、粘性放線菌和乳酸桿菌。實驗結果表明，厚樸酚及和厚樸酚對5種口腔致齲菌具有很強的抑制作用，／mL。在藥物、對致齲菌產酸能力的影響研究中發現，厚樸酚及和厚樸酚對致齲菌產酸均有一定的抑制作用，且隨著藥物濃度增加，抑制作用增強[24] 。Ho等人的研究表明，厚樸酚與和厚樸酚對牙周致病菌伴放線放線桿菌、牙齦卟啉菌、中問普氏茵、 mg／mL，具有良好的開發牙周保健藥物的潛力。構效關系研究表明，聯苯不顯示活性，厚樸酚與和厚樸酚強大的抗齲齒菌作用是由于聯苯環上同時存在親水的烯丙基和親脂的酚羥基，因而使其黏附于變異鏈球菌和其他革蘭氏陽性菌的細胞所致口。此外，厚樸酚與和厚樸酚對瘡皰丙酸桿菌和顆粒丙酸桿菌也具有強的抗菌活性，其MIC分別為9μg／mL和34μg／mL[25] ，和厚樸酚對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌抑菌質量濃度在10μg／mL以內[26]。6．抗腫瘤作用 厚樸酚與和厚樸酚在體內和體外均被發現可以抑制新生血管及腫瘤生長，并且在有效劑量范圍內能夠被宿主很好的耐受，其作用機制是在人的內皮細胞通過干擾血管內皮生長因子受體2（VEGFR2）的磷酸化來抑制血管生成[27,28]。厚樸酚（1040μmol／L）可抑制人肺鱗狀癌CH27細胞的增殖，80100μmol／L時可誘導其死亡。厚樸酚（3l0μmol／L）能抑制人癌細胞（COLO205和HepG2）的增殖，100μmol／L時可使COLO205和HepG2細胞出現凋亡。和厚樸酚在骨髓的微環境內能夠抑制血管形成，并且能夠殺死耐藥的多發性骨髓瘤細胞。Fong等通過在體外使用人早幼粒白血病細胞系HL60進行實驗觀察到和厚樸酚在小劑量的l，25二羥維生素D3和全反式維甲酸的協同下可以作為細胞分化的強化因子，增強人早幼粒白血病細胞系HL60細胞的分化作用[29] 。 臨床研究1．厚樸防齲 齲病是一種多因素的慢性細菌性疾病，口腔內主要致齲細菌為變形鏈球菌，對主要致齲菌為變形鏈球菌有抑制作用的中藥，其中作用力最強的是厚樸。厚樸的有效成分為厚樸酚，厚樸酚的藥理作用主要有抗菌、鎮靜中樞神經、肌肉松弛等。其中，在抗菌作用方面，厚樸酚對格蘭氏陽性菌、耐酸性菌、絲狀真菌有顯著的抗菌活性。特別是變形鏈球菌有更加顯著的抗菌作用，其抗菌活性強于典型的抗菌生物堿，[6]。2．治療慢性肺心痛 患者肺氣腫體征，咳痰氣促，心律失常，肺動脈高壓和右心室增大，桂枝加厚樸杏子湯能溫中散寒，活血逐淤，助心陽化水飲，疏通絡脈，改善微循環。用桂枝、杏仁各15 g、白芍30 g、厚樸12 g每日1劑，水煎服，1日3次，半個月1療程，治3療程，使肺動脈壓力減低，減低心臟的前后負荷。改善心肺功能及血液循環，全方達到宣肺降氣、化痰平喘之功，總有效率達到94%。3．厚樸治慢性咽炎 健脾行氣，化痰散結，養陰利咽。慢性咽炎突出癥狀表現均有咽中異物感、舌苔白膩、脈弦滑等，而這些癥狀正是半夏厚樸湯的辨證要點。方劑以半夏、川厚樸、甘草等，每日1劑，2次水煎服。服藥后癥狀消失，檢查咽部充血消失，后壁淋巴濾泡增生消退 諸藥合用有健脾行氣，化痰散結，養陰利咽之功效[7]。4．厚樸湯治療頸淋巴結腫大 頸淋巴結腫大，多由氣、郁、痰、火互結所致。疏郁化痰、軟堅散結解毒是其治法，半夏厚樸湯療氣解郁，化痰散結，加夏枯草、連翹、香附是增強其軟堅散結之功及消炎解毒之用[8]。5．促進胃十二指腸術后胃腸功能恢復 胃、十二指腸術后患者68例，隨機分為兩組。治療組38例，術后6 h開始將厚樸三物湯（厚樸1218 g、大黃912 g、枳實912 g）顆粒劑沖溶200 ml，分兩次經硅膠管緩慢注入空腸，每次100 ml，6 h1次；對照組術后不給特殊治療，等待胃腸功能自然恢復，比較兩組肛門排氣情況、術后5 d體重下降情況及平均住院時間。結果為治療組平均排氣時間為（177。）h，術后體重下降（177。）kg，術后住院時間為（177。）d；對照組分別為（177。）h、（177。）kg和（177。）d；兩組比較差異均有顯著性（P均﹤）。厚樸三物湯確有促進胃、十二指腸術后胃腸功能恢復、縮短排氣時間的作用，從而減少患者術后消耗并縮短住院時間[9]。6．厚樸三物湯治療腸粘連 腸粘連是腹部手術后的常見并發癥，中醫把腸粘連歸入腹痛腹脹范疇，病機為腑氣不通，氣血阻滯。方中厚樸行氣導滯，再加理氣的延胡索、木香使之與厚樸相得益彰；白芍緩急止痛；桃仁善治下焦蓄血；失笑散活血止痛。給予厚樸三物湯加味治療，方藥厚樸15 g，延胡索10 g，木香10 g，烏藥10 g，失笑散10 g。每日1劑，腹痛、腹脹、嘔吐消失，大便通暢，胃納正常。如此則腑易通，氣乃順，血得和而諸癥愈。 厚樸中的厚樸酚與和厚樸酚提取方法概況中藥材厚樸的有效成分和藥理作用是以厚樸酚、和厚樸酚為主，其提取方法也是針對以上兩種物質。以下介紹其提取方法。 堿提酸沉法取厚樸粗粉，加入1／5量（W／W）的生石灰粉，攪拌均勻后，用1520倍量的蒸餾水滲漉，得滲漉液。加入HCl溶液調至pH23，靜置，收集析出的沉淀，用蒸餾水洗滌沉淀物至pH67。得粗提物干燥后，用環己烷，索氏提取，提取液濃縮后放冷析出白色結晶[16]。 溶劑提取法中藥成分的提取、分離和精制，一般以利用溶劑為多，溶劑不同，浸出的成分也不同。除溶劑外還可利用其他化學試劑。近年來，物理方法，如色譜、逆流分溶進展很快，縮短了對