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維生素的測定(編輯修改稿)

2025-08-28 13:46 本頁面

　

【文章內容簡介】苯，先采用反相 C18柱分取維生素 D，除去大部分雜質。進一步采用正相色譜分離，紫外檢測定量。 ? 反相色譜條件色譜柱： Nucleosil C18,*300mm 流動相：乙腈＋甲醇（ 1＋ 1）流速： mL/min 紫外檢測波長： 254nm ? 正相色譜條件色譜柱：正相柱 Zorbax SIL,*250mm 流動相： %異丙酮的己烷溶液流速： mL/min 紫外檢測波長： 254nm 注意事項 ? VD2 與 VD3分不開 ? 皂化時加入焦性沒食子酸作為抗氧化劑 ? 標樣與試樣在同樣條件下皂化，消除了 VD的熱異化性損失。 ? 也可用硅藻土及皂土柱層析，除去甾醇、 VA、胡蘿卜素的干擾。第三節水溶性維生素的測定水溶性維生素 B B2和 C，廣泛存在于動植物組織中，飲食來源充足。但是由于它們本身的水溶性質，除滿足人體生理、生化作用外，任何多余量都會從小便中排出。為避免耗盡，需要經常由飲食來提供。水溶性維生素都易溶于水，而不溶于苯、乙醚、氯仿等大多數有機溶劑。在酸性介質中很穩定，既使加熱也不破壞；但在堿性介質中不穩定，易于分解，特別在堿性條件下加熱，可大部分或全部破壞。它們易受空氣、光、熱、酶、金屬離子等的影響；維生素 B2對光，特別是紫外線敏感，易被光線破壞；維生素 C對氧、銅離子敏感，易被氧化。三、維生素 C的測定維生素 C是一種己糖醛基酸，有抗壞血病的作用，所以又稱作抗壞血酸。維生素 C廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果、蔬菜，特別是棗、辣椒、苦瓜、柿子葉、獼猴桃、柑桔等食品中含量尤豐富。維生素 C具有較強的還原性，對光敏感，氧化后的產物稱為脫氫抗壞血酸，仍然具有生理活性。進一步水解則生成 2， 3 二酮古樂糖酸，失去生理作用。根據它具有的還原性質可以測定維生素 C的含量。常用的測定方法有（ 1） 2， 6二氯靛酚法（還原型 VC）（ 2） 2， 4二硝基苯肼法（總 VC）（ 3）碘酸法（ 4）碘量法（ 5）熒光分光光度法 (一 ) 2， 6— 二氯靛酚滴定法 1．原理還原型抗壞血酸可以還原染料 2， 6二氯靛酚。該染料在酸性溶液中呈粉紅色 (在中性或堿性溶液中呈藍色 )，被還原后顏色消失。還原型抗壞血酸還原染料后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質干擾時，一定量的樣品提取液還原標準染料液的量，與樣品中抗壞血酸含量成正比。試劑 ⑴ 1%草酸溶液：稱取 10g草酸，加水至 1000mL； ⑵ 2%草酸溶液：稱 20g草酸，加水至 1000mL； ⑶ 維生素 C標準液：準確稱 20mgVC溶于 1%草酸中，并稀釋至 100mL，吸 5mL于 50mL容量瓶中，加入 1%草酸至刻度，此溶液每毫升含有； ⑷ % 2， 6二氯靛酚溶液：稱取 2， 6二氯靛酚50mg，溶于 200mL含有 52mg碳酸氫鈉的熱水中，冷卻后，稀釋至 250mL，過濾于棕色瓶中，貯存于冰箱內，應用過程中每星期標定一次。標定一吸標液（ VC） 5mL于三角瓶 → 加 6%KI溶液 → 加 1% 淀粉 3滴 → 用 KIO3標液滴定到淡蘭色。計算：抗壞血酸濃度（ mg/mL） =（ V1 ） /V2 V1 滴定時消耗 KIO3標液的體積（ mL） V2 維生素 C重量（ g） 1mL KIO3標液 ≈ 維生素 C的量（ mg/mL）標定二吸 5mL已知濃度 V C標液 → 加 5mL1%草酸 → 用染料 2，6二氯靛酚滴定至溶液呈粉紅色，在 15秒不褪色為終點計算：每毫升 2， 6二氯靛酚相當于維生素 C的毫克數等于滴定度（ T） T= （ C V1） / V2 C 維生素 C的濃度（ mg/mL） V1 維生素 C的體積（ mL） V2 消耗 2， 6二氯靛酚的體積（ mL）樣品測定提?。悍Q樣 50g→ 加 2%草酸 100mL→ 入搗碎機中處理 → 過濾 → 顏色若深可加白陶土滴定：吸 5mL樣液 → 于三角瓶 → 用染料滴定至粉紅色 → 15秒內不褪色計算： VC（ mg/100g） =（ V T） / W 100 V 消耗染料體積（ mL） T 1mL染料所能氧化維生素 C的毫克數 W 滴定時所有濾液中含有樣品的克數注意事項 ⑴ 所有試劑的配制最好都用重蒸餾水； ⑵ 滴定時，可同時吸二個樣品。一個滴定，另一個作為觀察顏色變化的參考； ⑶ 樣品進

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