一些生物制品的制造檢定規程(編輯修改稿)

　

【文章內容簡介】 /ml）?！　?菌形及純度　　染色鏡檢，應為革蘭氏陰性桿菌。至少觀察10個視野，平均每個視野內不得有10個以上非典型菌（線狀、粗大或染色可穎桿菌），并不應有雜菌?！　?無菌試驗　　按《生物制品無菌試驗規程》進行?！　?安全試驗　　 毒性試驗　　用體重18～20g之健康小白鼠5只，或用體重350～450g之健康豚鼠2只，觀察7日，應無死亡?！　　　∮皿w重18～20g之健康小白鼠2只，用苯酚作防腐劑的菌苗注射之小白鼠會發生戰栗癥狀，但不應超過半小時，觀察7日，不得有局部膿腫或死亡?！　? 保存與效期　　應保存于2～8℃。自稀釋之日起效期為1年半。如原液保存超過1年稀釋，應相應縮短效期（自原液采集之日起總效期不得超過2年半）。傷寒菌苗使用說明書　　本品系用傷寒菌培育后，取菌苔制成懸液，加甲醛殺菌，以磷酸鹽緩沖生理鹽水稀釋制成。用于預防傷寒?！　”酒窞槿榘咨幕鞈乙?，含苯酚防腐劑，不應含有異物或搖不散的凝塊。　　接種對象　　重點用于部隊、港口、鐵路沿線工地的工作人員，下水道、糞便、垃圾處理人員、飲食業、醫務防疫人員及水上居民，或有本病流行地區的人群?！　∮梅ā　?．上臂外側三角肌附著處皮膚經消毒后皮下注射。　　2．初次注射本菌苗者，需注射3次，每次間隔7～10天，注射劑量如下：　　1～6周歲：?！　?周歲以上～14周歲：?！　?4周歲以上：?！　〖訌娮⑸鋭┝颗c第3針相同?！　〗伞　?．發熱，嚴重高血壓，心、肝、腎臟病及活動性結核?！　?．孕婦，月經及哺乳期。　　3．有過敏反應病史者?！　》磻　【植靠沙霈F紅腫，有時全身有寒熱或頭痛。　　注意事項　　1．用前搖勻。瓶內有搖不散的凝塊、異物，或安瓿有裂紋，曾經發生過凍結者都不能使用?！　?．應備有1∶1000腎上腺素，以供偶有發生休克時急救之用。　　保存　　保存于2～8℃暗處。吸附百日咳菌苗、白喉、破傷風類毒素混合制劑制造及檢定規程本品系由百日咳菌苗原液、精制白喉類毒素及精制破傷風類毒素用氫氧化鋁吸附制成。供兒童預防百日咳、白喉及破傷風之用。　　1 抗原要求　　 百日咳菌苗原液應符合附錄1《百日咳菌苗原液制造及檢定要求》。　　 精制白喉類毒素應符合《吸附精制白喉類毒素制造及檢定規程》中4項的要求?！　?精制破傷風類毒素應符合《吸附精制破傷風類毒素制造及檢定規程》中4項的要求?！　? 制造　　 配方　　每ml制劑中各種抗原成份含量如下：　　百日咳菌45億～90億　　精制白喉類毒素20Lf　　精制破傷風類毒素5Lf　　 吸附劑配制，見《吸附精制破傷風類毒素制造及檢定規程》5項?！　?氫氧化鋁稀釋　　～ /ml。%（g /ml），%（g /ml），高壓蒸汽滅菌?！　?吸附　　按計算量將精制白喉類毒素、精制破傷風類素及百日咳菌苗原液加入稀釋好的吸附劑內。～?！　?分批　　同批吸附劑同批配合的原液同次吸附的制品為1批。如用大罐吸附時，所用抗原和吸附劑可以多批混合（精制類毒素不超過3批），每罐為1批?！　? 成品檢定　　 物理化學檢查　　 振搖后應呈均勻乳白色混懸液。不應有搖不散的凝塊或異物?！　　??！　?%～%(g /ml)?！　?%～%(mg /ml)?！　?%(g /ml)?！　?鑒別試驗　　抽取樣品，另枸櫞酸鈉或用其他適宜方法將吸附劑溶解后，離心沉淀百日咳菌體和殘留的吸附劑，按《吸附精制白喉類毒素制造及檢定規程》、《吸附精制破傷風類毒素制造及檢定規程》《百日咳菌苗原液制造及檢定要求》?！　?無菌試驗　　按《生物制品無菌試驗規程》進行。　　 毒性試驗　　應符合附錄1《百日咳菌苗原液制造及檢定要求》。　　 安全試驗　　 小白鼠法　　用體重18～20g之健康小白鼠5只，不得有局部膿腫或死亡。　　 豚鼠法　　用體得300～400g豚鼠，每批制品不少于4只，分兩側，應符合《吸附精制白喉類毒素制造及檢定規程》《吸附精制破傷風類毒素制造及檢定規程》。　　 效力試驗　　 百日咳菌苗免疫力試驗　　每3批抽1批進行，應符合附錄1《百日咳菌苗原液制造及檢定要求》?！　?白喉及破傷風類毒素的效力試驗　　每更換1批類毒素時進行。取體重300～400g豚鼠4只，第30天采血，將分離的血清等量混合，進行白喉及破傷風抗毒素單位測定。　　 白喉抗毒素單位測定　　用Lr /300家兔皮內法?！　?破傷風抗毒素單位測定　　用L+/100小白鼠皮下法。　　 白喉類毒素的效力試驗亦可采用攻毒法。取體重300～350g豚鼠5只以上。第30天各皮下攻擊白喉毒素200個MLD，觀察7天，豚鼠死亡不得超過20%；同時另取體重240～270g豚鼠3只，各皮下注射1個MLD毒素作為對照，2只對照豚鼠應發病并于96小時內死亡，允許另1只較晚死亡或發病?！　?亦可按WHO推薦的效力檢定方法（見《吸附精制白喉類毒素制造及檢定規程》附錄和《吸附精制破傷風類毒素制造及檢定規程》附錄）。　　4 保存與效期　　應保存于2～8℃。自吸附之日起效期為1年半?！　「戒? 百日咳菌苗原液制造及檢定要求　　本品系用百日咳第Ⅰ相菌種經培育后取菌體制成懸液，加適當殺菌劑，以磷酸鹽緩沖生理鹽水稀釋制成，每ml含菌45億～90億。用于制備百日咳菌苗、白喉、破傷風類毒素混合制劑。　　1 菌種　　 制造百日咳菌苗之菌種、檢定用的Ⅰ相診斷血清、百日咳分型血清及百日咳參考菌苗，由中國藥品生物制品檢定所分發或經同意?！　?菌種檢定　　 培養特性　　于包姜（BordetGengou）氏或其他適宜的培養基上培育，各菌株應具有典型的形態及生化特性?！　?血清學特性　　將35～37℃培育40～48小時的菌苔，混懸于生理鹽水或磷酸鹽緩沖生理鹽水內，使每ml含菌20億個，與Ⅰ相血清做定量凝集反應，凝集效價應達到血清原效價之半。同時與單價分型血清做定量凝集反應，其型別應與該菌種標定型別相同?！　　　∮媒】导彝没螂嗍笾辽?只，用培育40～48小時的菌苔混懸于磷酸鹽緩沖生理鹽水內，然后稀釋為幾個不同濃度的菌液，經72小時觀察反應。，判為合格?！　?毒力試驗　　用體重16～18g之小白鼠至少3組，每組至少10只，在麻醉狀態下從鼻腔滴入經培育40～48小時，記錄小白鼠生死情況，按Reed Muench法計算LD50?！　?免疫力試驗　　 方法　　按附錄2《百日咳菌苗原液免疫力試驗方法》進行?！　　　?。若試驗菌液的效價低于此要求時，可復試，其結果的幾何平均值（如用概率分析法時，應用加權幾何平均值）≥，仍判為合格。　　 菌種保存　　 菌種應用凍干法保存?！　?凍干菌種應保存在2～8℃。，合格的菌種可使用2年，以后每年檢查1次，如仍合格可繼續使用1年。　　2. 制造　　 制造百日咳菌苗原液至少應選用2個菌株，制成的菌苗應含3型因子。　　 制造百日咳菌苗原液用活性炭半綜合培養基或其他適宜的培養基。如用液體培養基，不得含有已知引起人體毒性或變態反應的成分。　　 原液制造　　 菌種　　凍干菌種啟開后接種于改良包姜氏或活性炭半綜合培養基或其他適宜的培養基上。于35～37℃培育不超過72小時，以后各代不超過48小時，傳代菌種保存不得超過14天，凍干菌種啟開后用于生產時不應超過10代?！　?培育　　可用固體法或液體法培育。培育時間不得超過48小時，經檢查為純菌后，用適當方法收集菌體，～。　　 殺菌　　%（ml /ml）甲醛溶液殺菌，放37℃2～3天。亦可用其他適宜的殺菌劑和殺菌方法殺菌。　　　　原液應逐瓶（罐）抽樣接種普通瓊脂斜面及普通血液瓊脂斜面（或活性炭半綜合培養基）各1管，放35～37℃培育2天，然后放24～26℃1天。有雜菌生長者應廢棄。　　 原液合并　　固體法工藝生產經純菌試驗合格的原液應進行合并。不同菌株不同日期制造2的原液應分別合并。合并后，可加適量防腐劑，并保存于2～8℃?！　?原液檢定　　 濃度測定　　每瓶原液應按中國細菌濁度標準與質量檢定部門會同測定濃度。稀釋菌苗時即按此濃度計算?！　?鏡檢　　每瓶原液取樣稀釋至成品濃度，涂片染色鏡檢，應為革蘭氏陰性球桿菌。至少觀察10個視野，應無雜菌。　　 凝集反應　?、裣嘌遄龆磕囼灒淠r應達血清原效價之半，如僅達到或低于血清原效價1/4時，應作免疫力試驗，合格后方可使用；同時應用單價分型血清做定性凝集試驗，其所含型別應與制造原液的菌種型別相同?！　?無菌試驗　　每瓶原液除按《生物制品無菌試驗規程》進行無菌試驗外，并做特異無菌試驗。如特異無菌試驗有百日咳菌生長，可復試一次，若仍有百日咳菌生長，原液應判為不合格?！　?毒性試驗　　　　按附錄3《百日咳菌苗原液毒性試驗方法》進行?！　?判定　　試驗組小白鼠注射后72小時的總體重不少于注射前總體重，第7天小白鼠增加的體重不少于對照組增加體重的60%，并不得有死亡，該批原液毒性試驗判為合格?！　≡囼灲Y果達不到上述要求，可復試一次。仍達到不過要求?！　?原液保存　　應保存于2～8℃。原液自采集之日起至成品發出不得少于4個月。原液自采集之日起效期為3年。附錄2 百日咳菌苗原液免疫力試驗方法　　1 免疫　　 動物　　選用體重10～12g同性或雌雄性各半的健康NIH小白鼠。　　將動物隨機分為三組，每組16只或20只（同性或雌雄性各半，為保證攻擊后有16只或20只小白鼠，可適當多免疫幾只小白鼠），同時飼養健康小白鼠55只，備做對照用?！　?免疫原稀釋　　177。，、百日咳參考菌苗稀釋至每ml含8IU，（）、（）（）。　　 免疫方法　　將不同稀釋度的免疫原分別免疫小白鼠。　　2 攻擊菌及攻擊菌液的制備　　 菌種　　小白鼠腦內攻擊用58030（18323）菌株。　　 培養基　　可用包姜氏培養基（含羊血20%～30%）或其他適宜的培養基?！　?培養溫度及時間　　放35～37℃培育，第一代不超過72小時，攻擊時菌種的培育時間為20～24小時。原代菌種放2～8℃可保存2周?！　　　⑴嘤?0～24小時的菌苔經肉眼檢查為純菌后，177。，用滅菌脫脂棉過濾，測定濃度，～、作為試驗組的攻擊菌液，然后再連續稀釋，、800、80及8個菌，以上5個不同稀釋度的菌液，作為對照組的攻擊菌液?！　?工作起止時間　　自攻擊菌液制備（開始刮菌）。　　　　在攻擊前后，接種于包一姜氏培養基或其他適宜的培養基平皿中，每次不得少于2個平皿，其菌落形成單位約為濁度測定的1/4。　　3 攻擊　　動物免疫后14天，（含8萬個菌），4號針頭。在試驗組攻擊后再進行對照組毒力測定，對照組每稀釋度攻擊10只小白鼠?！　? 記錄結果　　動物攻擊后觀察14天。攻擊后第2天，將試驗組動物處理成每組16只或20只。以后逐日觀察動物并記錄死亡數，最初3天死亡的動物不作統計，至第14天有麻痹、頭部腫脹、弓背及明顯聳毛的動物按死亡計算。　　5 結果計算　　　 按WilsonWorcester氏法計算參考菌苗及待檢菌苗的ED50177。SD%，每個ED50標準差的范圍一般應為64%～156%?！　?按ReedMuench氏法計算對照組LD50，1個LD50的菌數應不高于800個菌?！　?計算均質性因子“α”?！　　　〈龣z原液每ml應含IU=參考菌苗ED50/待檢原液ED50參考菌苗每ml的IU數　　6 效力評價　　百日咳原液按成品菌苗嘗試稀釋后。附錄3 百日咳菌苗原液毒性試驗方法　　1 選用體重14～16g健康小白鼠，每批原液不少于10只（同性或雌雄性各半）?！　? 177。（含成品菌苗相同量的防腐劑），將百日咳原液稀釋至成品菌苗濃度的1/2。　　3 。另取同數量同體重的小白鼠（同性或雌雄性各半），177?！　? 注射后的小白鼠應逐日觀察，并于喂食后2小時進行稱重?！　? 于注射前、注射后72小時及7天，分別稱試驗組及時對照組小白鼠的體重?！　? 試驗組小白鼠注射后72小時的總體重不少于注射前的總體重；7天小白鼠平均增加的體重不少于對照組平均增加體重的60%，并不得有死亡，該批原液毒性試驗判為合格?！　? 試驗結果若達不到上述要求，可進行復試，仍達不到上述要求，原液可放置2～8℃保存3～4個月再進行復試，如仍達不到上述要求，該批原液的毒性判為不合格。吸附百日咳菌苗、白喉、破傷風類毒素混合制劑使用說明書　　本品系由百日咳菌苗原液、精制白喉類毒素及精制破傷風類毒素用氫氧化鋁吸附制成。每ml中含百日咳菌8個效力單位，精制白喉類毒素20Lf、精制破傷風類毒素5Lf。供兒童預防百日咳、白喉及破傷風之日。　　本品為乳白色懸液，含硫柳汞防腐劑，放置后菌體易下沉，但經振搖后能均勻分散?！　〗臃N對象　　3個月～6周歲兒童?！　∮梅ā　??！　　　∽?月齡開始免疫，至12月齡完成三針次免疫，每針間隔4～6周。18～24月齡注射第4針?！　〗伞　∮邪d癇、神經系統疾患及抽風史者禁用。急性傳染?。òɑ謴推冢┘鞍l熱者暫緩注射?！　》磻　∽⑸浔酒泛螅植靠捎屑t腫、疼痛、發癢，或有低熱、疲倦、頭痛等，一般不須特殊處理即行消退，如有嚴重反應應及時診治?！　∽⒁馐马棥　。绯霈F搖不散之凝塊，有異物，安瓿有裂紋，制品曾經凍結，標簽不清和過期失效者不可使用。　　，局部可能有硬結，可逐步吸收。注射第2針時應更換另側部位。　　∶1000腎上腺素，供偶有發生休克時急救用?！　?、驚厥等異常情況者，不再注射第二針。　　保存　　應保存于2～8℃暗處，不得凍結。凍干皮內注射用卡介苗制造及檢定規程本品系卡介菌經培育后凍干制成。用于預防結核病?！　? 菌種　　 制造卡介苗的菌種，應由中國藥品生物制品檢定所分發或經同意。嚴禁使用通過動物的菌種制造卡介苗。　　 如果采用次代種子批，單批收獲培養物的總代數