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分子生物學緒論7468584239(編輯修改稿)

2026-01-19 03:23 本頁面

　

【文章內容簡介】維結構。理論知識深厚、富于創造性；視野廣闊、收集信息全面并善于分析利用。基于已有的研究成果， Waston和 Crick于1953年提出了他們的第三個 DNA雙螺旋結構模型。（被公認為分子遺傳學建立的標志）隨后證明了 DNA 半保留復制的機理，解決了基因的自我復制和傳遞的問題Waston， Crick和 Wilkins于 1962年獲得了諾貝爾生理學及醫學獎。DNA雙螺旋結構模型的意義o DNA雙螺旋模型結構同時表明了 DNA復制的明顯方式 —— 堿基互補配對原則上的半保留復制。o 提示了基因和多肽成線性對應的一個可能理由： DNA核苷酸順序規定該基因編碼蛋白質的氨基酸順序； DNA中的遺傳信息就是堿基序列；并存在某種遺傳密碼，將核苷酸序列譯成蛋白質氨基酸順序。o 在其后的幾十年中，科學家們沿著這兩條途徑前進，探明了 DNA復制、遺傳信息表達與中心法則等內容。o 確定了遺傳信息的傳遞方式n 1961 年 Monod 和 Jacob 提出了操縱子學說；n 1964 年 Nirenberg 等提出了 “三聯體密碼說 ”；n Crick 提出了遺傳信息流向和表達的中心法則o 這三大發現大大促進了生命科學的迅速發展，為基因工程的誕生奠定了重要的理論基礎．　　　Gene Expressiono 中心法則 (central dogma)闡述了生物世代、個體以及從遺傳物質到性狀的遺傳信息流向，即遺傳信息在遺傳物質復制、性狀表現過程中的信息流向o 最初由 Crick提出，并經過了多次修正 o 基因操作的工具酶的發現n 限制性核酸內切酶的發現與限制性核酸內切酶的發現與 DNA的切割的切割n DNA連接酶的發現與連接酶的發現與 DNA片段的連接片段的連接 GGATCCCCTAGGGCCTAGGATCC G+Bam HⅠ限制性核酸內切酶o 限制性核酸內切酶 (restriction endonuclease, RE)是識別 DNA的特異序列 , 并在識別位點或其周圍切割雙鏈 DNA的一類內切酶。o 分類n Ⅰ 、 Ⅱ 、 Ⅲn （基因工程技術中常用 Ⅱ 型）o 作用n 與甲基化酶共同構成細菌的限制修飾系統，限制外源 DNA，保護自身 DNA。第一個字母取自產生該酶的細菌屬名，用大寫；第二、第三個字母是該細菌的種名，用小寫；第四個字母代表株；用羅馬數字表示發現的先后次序。限制酶命名Hin dⅢ 屬系株序Haemophilus influenzae d株流感嗜血桿菌 d株的第三種酶Ⅱ 類酶識別序列特點 —— 回文結構 (palindrome)切口：平端切口粘端切口GGATCCCCTAGGBam HⅠGTCCAGGCCTAGGATCC G+GGATCCCCTAGGHindⅡGTCGACCAGCTGGACCTG+平端切口粘端切口n 當一個 DNA分子含有 6個拷貝的 GAATTC: 它將被酶切成 7個片段，可用凝膠電泳方法將其分離。(The largest fragment) (The smallest fragment)o 采用幾種限制性內切酶組合可以使 DNA分子產生特定的片段 . n . EcoRI + HindIIIDNA連接酶 (DNA ligase )o 1967年在三個實驗室同時發現的。o 活性：封閉 DNA鏈上缺口，借助 ATP或NAD水解提供的能量催化 DNA鏈的 5’PO4與另一 DNA鏈的 3’OH生成磷酸二酯鍵。o 要求：這兩條鏈必須是與同一條互補鏈配對結合的 (T4DNA連接酶除外 )，而且必須是兩條緊鄰 DNA鏈才能被 DNA連接酶催化成磷酸二酯鍵。DNA連接酶的作用機制細菌的 DNA連接酶以 NAD為能源，動物細胞和噬菌體的連接酶以

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