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基因診斷(編輯修改稿)

2026-01-25 17:44 本頁面

　

【文章內容簡介】 CR擴增后電泳來檢出，并用于致病基因的連鎖分析，這種診斷方法稱為擴增片段長度多態性（ AFLP）連鎖分析法。 PCR擴增后，產物即等位片段之間的差別有時只有幾個核苷酸，故需用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離鑒定。此法多用于突變性質不明的連鎖分析。 2. AFLP（ amplified fragment length polymorphism）當基因的突變部位和性質已完全明了時，可以合成等位基因特異的寡核苷酸探針（ allelespecific oligonucleotide，ASO）用同位素或非同位素標記進行診斷。探針通常為長 20bp左右的核苷酸。用于探測點突變時需要合成兩種或兩種以上的探針，一種與正常基因序列完全一致，能與之穩定地雜交，但不能與突變基因序列雜交；另一種與突變基因序列一致，能與突變基因序列穩定雜交，但不能與正常基因序列穩定雜交，這樣，就可以把只有一個堿基發生了突變的基因區別開來 . PCR可結合 ASO，即 PCR－ ASO技術，即先將含有突變點的基因有關片段進行體外擴增，然后再與 ASO探針作點雜交，這樣大大簡化了方法，節約了時間，而且只要極少量的基因組 DNA就可進行。 3. ASO（ allelespecific oligonucleotide）異常探針 T A G 正常人患者 DNA DNA 正常人患者 DNA DNA 雜交結果點雜交正常探針 G A G 正常人患者 DNA DNA 雜交結果正常人患者 DNA DNA 點雜交等位基因特異的寡核苷酸探針 (ASO)檢測點突變基因診斷的臨床檢測應用 1. 基因診斷在感染性疾病檢測中的應用乙型肝炎病毒（ HBV）、人乳頭瘤病毒（ HPV）：其 DNA可以使用點雜交、 PCR方法直接檢出。丙型肝炎病毒（ HCV）、人免疫缺陷病毒（ HIV）：其 RNA可以使用 RTPCR方法直接檢出。結核桿菌和瘧原蟲的分型可以使用探針雜交和 PCR方法檢出。丙型肝炎 (HCV)基因診斷實例丙型肝炎為 RNA病毒， 9500mer，編碼 30113033個氨基酸，具有高變異性。基因組組成： E1 NS2 NS3 N

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