20xx年醫學專題—第三章細菌的生長和遺傳變異-1(編輯修改稿)

2025-11-16 00:37 本頁面

　

【文章內容簡介】 ,稀釋平板計數法—固體(g249。tǐ)培養法,第一步：菌樣巧妙(qiǎomi224。o)稀釋,,得到(d233。 d224。o)不同稀釋度（10x）菌液,第二十八頁，共六十八頁。,各取1ml，均勻涂布于冷固體培養基平板上或與溫熱液態固體培養基混合(h249。nh233。)冷卻。,第三步：培養(p233。iyǎng),稀釋度過(d249。 ɡu242。)低，菌落密集無法計數,可以計數，但數量過多，費時費力,數量合適，統計計算，作為結果,數量太少，誤差因素太大，不做計數,第二步：接種平板,每一個細菌會生成一個菌落,一般計數平板的細菌生長菌落數以30~300個為宜。,第二十九頁，共六十八頁。,第四步：計數(j236。 sh249。),細菌數量=？細菌數量=數出的菌落數/稀釋度例如：105稀釋度時菌落數為125個細菌數量=125/105=1.25107個/mL 平板計數法是采用(cǎiy242。ng)最廣的一種活菌計數法如國標法水中細菌總數的測定。注意：作空白及取平行樣（2～3組）均值減小誤差,第三十頁，共六十八頁。,第三十一頁，共六十八頁。,間接(ji224。n jiē)計數法——一種活菌計數法,②濾膜法：過濾到濾膜上（把膜放在固體培養基上培養），然后把濾膜貼到培養基上，細菌獲得(hu242。d233。)營養而生長，形成菌落。——大腸菌群測定,第三十二頁，共六十八頁。,間接(ji224。n jiē)計數法——一種活菌計數法,③液體計數法（MPN法，most probable number法）最可能數法特點：液體培養、統計學查表計數主要用于不能在平板培養基上形成菌落的菌（硝化菌、反硝化菌、硫酸還原(hu225。n yu225。n)菌）將菌接種于液體培養基，經過一段時間培養，采用一定的技術來檢測是否有細菌生長。例如硫酸鹽還原菌的檢測是利用它們生長時產生的硫化亞鐵黑色特征進行檢測，按MPN法進行計數。,第三十三頁，共六十八頁。,,,,（1）稀釋(xīsh236。),（2）稀釋(xīsh236。)接種樣品,在液體表面(biǎomi224。n)加一層無菌液體石蠟隔絕氧氣,恒溫37℃培養14天,記錄變黑的試管情況,（3）培養,1ml,+ 9ml,培養基,提問：為什么有些試管變黑有些沒有？,稀釋程度、取樣概率,第三十四頁，共六十八頁。,(4)統計(tǒngj236。)－查表－計算,①統計數量指標的確定根據不同(b249。 t243。nɡ)稀釋度變黑試管，得到三位數及其中最低稀釋度取重復管數都有菌生長的最高稀釋度的生長管數，為數量指標的第一位數字，后面兩個稀釋度的生長管數后兩位數提問：上例情況而言統計數量是幾？ 320 104,第三十五頁，共六十八頁。,,,MPN三管法測數統計表（個菌/毫升(h225。o shēnɡ)）,水中大腸菌群、鐵細菌(x236。jūn)、硝化菌、亞硝化菌也用這種方法進行數量統計。,上面例子中數量指標“320” 對應(du236。y236。ng)的細菌最可能數為9.5個菌/毫升，最低稀釋度為104，折算出樣品中菌濃度為 9.5x 104個菌/毫升。,②查MPN表,第三十六頁，共六十八頁。,（二）測生長量法,（1）測體積：粗放(cūf224。ng)的方法，離心或自然沉降后觀察體積；,（2）測細胞干重(ɡ224。n zh242。nɡ)：離心法、過濾法兩種； 105~110186。C下干燥后稱重（干重約為濕重的10~20%）,活性污泥濃度(n243。ngd249。)測定方法：,第三十七頁，共六十八頁。,細菌不完全(w225。nqu225。n)透光，一定范圍內菌溶液的混濁度與菌數量成正比,（3）比濁法/光密度法 OD（optical density）Λ＝450~660nm, 可見光,第三十八頁，共六十八頁。,①制標準(biāozhǔn)曲線（OD~No）,②測菌液濁度，查圖表得出(d233。 chū)細菌數量,濁度儀或721分光光度儀,第三十九頁，共六十八頁。,（5）細胞(x236。bāo)含氮量細菌含氮量12.5%、酵母為7.5% 粗蛋白量＝6.25N量,（6）DNA、蛋白質同一(t243。ngyī)細菌所

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