生物化學(第三版,課后答案-資料下載頁

　　

【正文】 His： [（ 1） Ala、 Ser、 Phe 和 Leu 以及 Arg 和 His 向負極， Asp 移向正極；（ 2）電泳時，具有相同電荷的較大分子比較小分子移動得慢，因為電荷 /質量之比較小，因而引起每單位質量遷移的驅動力也較小。（ 3） Glu移向正極， Lys移向負極 ,Val、 Ala和 Thr則留在原點。 ] ？為什么？ 答：凝膠過濾層析中每一個凝膠珠相當于一個分子篩，故小分子所經過的路徑長，落在大分子后面；而凝膠電泳中整塊膠板相當于一個分子篩，故大 分子受到的阻力大而遷移慢，落在小分子后面。 （ BSA）稀釋液，每一種溶液取 進行 Bradford 法測定。對適當的空白測定 595nm波長處的光吸收（ A595）。結果如下表所示： 所有試卷資料免費下載 corundum 整理 13 BSA濃度（ mg L1） A595 BSA 濃度對 A595作圖得標準曲線。 （ ）測得的 A595為 。根據標準曲線算出 中的蛋白質濃度。 [] 解：標準曲線略。由標準曲線可知，當 A595為 ， BSA 濃度為 。 第八章 酶通論 ？ 答：酶是細胞所產生的，受多種因素調節控制的具有催化能力的生物催化劑，與一般非生物催化劑相比較有以下幾個特點： 酶易失活； 具有很高的催化效率； 具有高度專一性； 酶活性受到調節和控制。 ？酶的專一性有哪些？如何解釋酶作用的專一性？研究酶的專一性有何意義？ 答：酶的專一性是指酶對催化的反應和反映物有嚴 格的選擇性。酶的專一性分為兩種類型： 結構專一性，包括絕對專一性、相對專一性（族專一性或基團專一性、鍵專一性）； 立體異構專一性，包括旋光異構專一性、幾何異構專一性。 通過對酶結構與功能的研究，確信酶與底物作用的專一性是由于酶與底物分子的結構互補，誘導契合，通過分子的相互識別而產生的。 對酶的專一性研究具有重要的生物學意義。它有利于闡明生物體內有序的代謝過程，酶的作用機制等。 ，試說明之。 答：酶的調節和控制有多種方式，主要有： （ 1） 調節酶的濃度：主要有 2種方式：誘導或抑制酶的合 成；調節酶的降解； （ 2） 通過激素調節酶活性、激素通過與細胞膜或細胞內受體相結合而引起一系列生物學效應，以此來調節酶活性； （ 3） 反饋抑制調節酶活性：許多小分子物質的合成是由一連串的反應組成的，催化此物質合成的第一步的酶，往往被他們終端產物抑制； （ 4） 抑制劑和激活劑對酶活性的調節：酶受大分子抑制劑或小分子物質抑制，從而影響酶活性； （ 5） 其他調節方式：通過別構酶、酶原的激活、酶的可逆共價修飾和同工酶來調節酶活性。 ４ .輔基和輔酶有何不同？在酶催化反應種起什么作用？ 答：輔酶通常指與脫輔酶結合比較松弛的小分子有機物質。通過透析方 法可以除去，如輔酶Ⅰ和輔酶Ⅱ等。輔基是以共價鍵和脫輔酶結合，不能通過透析除去，需要經過一定的化學處理才能與蛋白分開，如細胞色素氧化酶中的鐵卟啉，丙酮氧化酶中的黃素腺嘌呤二核苷酸（ FAD）都屬于輔基。它們的區別只在于它們與脫輔酶結合的牢固程度不同。輔酶、輔基在酶催化反應中通常是起著電子、原子或某些化學基團的傳遞作用。 ５ .酶分哪幾大類？舉例說明酶的國際系統命名法及酶的編號。 答：國際酶學委員會根據酶所催化反應的類型，把酶分為６大類：即氧化還原酶類、轉移酶類、水解 所有試卷資料免費下載 corundum 整理 14 酶類、裂合酶類、異構酶類和連接酶類。分別利用 6來表示。例如： 酶，作用于 CHOH 基團，受體是分子氧。根據底物中別所用的基團或鍵的特點將每一大類分為若干亞類，每一個亞類又按順序變成 3??等數字；每一個亞基可再分亞亞類，仍用 3??編號，每一個酶的分類編號由 4 個數字組成，數字間由由“”隔開。第一個數字指明該酶屬于哪一個大類；第二個數字指明酶屬于哪一個亞類；第三個數字指出該酶屬于一個亞亞類；第四個數字則表明該酶在亞亞類中的排號。編號之間冠以 EC（ Enzyme Commision）。 和比活力？測定酶活力應注意什么？為什么測定酶活力時以測定初速率為宜，并且底物濃度遠遠大于酶濃度？ 答：酶活力指酶催化某一化學反應的能力，其大小可用在一定條件下所催化的某一化學反應的反應速率來表示；酶的比活力代表酶的純度，根據國際酶學委員會的規定比活力用每 mg 蛋白質所含的酶活力單位數表示。 酶的催化作用受測定環境的影響，因此測定酶活力要在最適條件下進行，即最適溫度、最適 pH、最適底物濃度和最適緩沖離子強度等。只有在最適條件下測定才能真實反映酶活力的大小。 隨時間的延長，酶促反應中底物濃度降低，產物濃度增加，加 速逆反應的進行，產物對酶抑制或激活作用以及隨時間的延長引起酶本身部分分子失活等，酶促反應速率降低，因此測定活力，應測定酶促反應的初速率，從而避免上述種種復雜因素對反應速率的影響。 底物濃度太低時， 5%以下的底物濃度變化實驗上不易測準，所以在測定酶的活力時，往往使底物濃度足夠大，這樣整個酶反應對底物來說是零級反應，而對酶來說卻是一級反應，這樣測得的速率就比較可靠地反映酶的含量。 ？它們的發現有什么重要意義？ 答：具有催化功能的 RNA叫核酶。它的發現，表明 RNA 是一種既能攜帶遺傳信息又有 生物催化功能的生物分子。因此很可能 RNA 早于蛋白質和 DNA，是生命起源中首先出現的生物大分子，而一些有酶活性的內含子可能是生物進化過程中殘存的分子“化石”。酶 RNA 的發現，提出了生物大分子和生命起源的新概念，無疑促進對生物進化和生命起源的研究。 抗體酶是 20 實際 80年代后期才出現的一種具有催化能力的蛋白質，其本質上是免疫球蛋白，但是在易變區被賦予了酶的屬性，所以又稱“催化性抗體”，抗體酶的發現，不僅為酶的過渡態理論提供了有力的實驗證據，而且抗體酶將會得到廣泛的應用。 ： （ 1） 生物酶工程：酶學和 以 DNA 重組技術為主的現代分子生物學技術相結合的產物。 （ 2） 固定化酶：將水溶性酶用物理或化學方法處理，使之成為不溶于水的、但仍具有酶活性的狀態。 （ 3） 活化能：在一定溫度下 1mol底物全部進入活化狀態所需要的自由能（ kJ/mol） （ 4） 酶的轉化數：在一定條件下每秒鐘每個酶分子轉換底物的分子數。 （ 5） 寡聚酶：由兩個以上亞基組成的酶。 （ 6） Kat單位：在最適條件下，每秒鐘催化 1mol底物轉化為產物所需的酶量，為 Kat單位。 （ 7） 酶偶聯分析法：由于分光光度法有其獨特的優點，因此把一些原來沒有光吸收變化的酶反應，可以通過與一些能引起光吸收變 化的酶反映偶聯使第一個酶反應的產物轉變成第二個酶的具有光吸收變化的產物來進行測量。 （ 8） 誘導契合說： 1958年 Koshland提出，當酶分子與底物分子接近時，酶蛋白受底物分子誘導，其構象發生有利于底物結合的變化，酶與底物在此基礎上互補契合進行反應。 （ 9） 反饋抑制：許多小分子物質的合成是由一聯串的反應組成的，催化此物質生成的第一步的酶，往往被它們終端產物抑制。這種抑制叫反饋抑制。 （ 10） 多酶復合體：由幾種酶靠非共價鍵彼此嵌合而成。 所有試卷資料免費下載 corundum 整理 15 AgNO3對在 10ml 含有 ，需用 mol AgNO3，求該酶的最低相對分子質量。 解： Mr=10 103/ 106=29240Da g 純酶（ Mr:92 103）在最適條件下，催化反應速率為 mol/min，試計算：（ 1）酶的比活力。[500U/mg]（ 2）轉換數。 [] 解：（ 1）比活力 = mol/min/1μ g=500U/mg （ 2）轉換數 =247。 [1/（ 92 103） ]= 40單位的某種酶，其轉換數為 6 104min1，試計算 該酶在細胞內濃度（假設新鮮組織含水 80%，并且全部在細胞內）。 [ 107 mol/L] 解： [106/（ 6 104)] 40247。 [（ 1 80%） /103]= 107 mol/L ，其相對分子質量為 120 103，由 6個相同亞基組成。純酶的 Vmax為 2800U/mg 酶。它的一個活力單位規定為：在標準測定條件下， 37℃、 15min內水解 10μ mol焦磷酸所需要的酶量。問：（ 1）每 mg酶在每秒鐘內水解多少 mol 底物？ [ 105mol]。（ 2） 每 mg酶中有多少 mol的活性部位（假設每個亞基上有一個活性部位）？ [5 108mol活性中心 ]。（ 3）酶的轉換數是多少？ [622s1或 622mol焦磷酸 /（ s mol）酶活性中心 ] 解：（ 1） 2800 [（ 10 106） /（ 15 60） ]= 105 mol （ 2）（ 1 103） /（ 120 103） 6=5 108 mol （ 3） {（ 105） /[（ 1 103） /（ 120 103） ]}/6=622 25mg 蛋白酶粉配制成 25ml 酶溶液，從中取出 酶液，以酪蛋白為底物，用 Folin酚比色法測定酶活力，得知每小時產生 1500μ g 酪氨酸。另取 2ml 酶液，用凱氏定氮法測得蛋白氮為 ，若以每分鐘產生 1μ g 酪氨酸的酶量為 1 個活力單位計算，根據以上數據，求出：（ 1） 1ml 酶液中所含蛋白質量及活力單位。 [ 蛋白質， 250U]（ 2）比活力。 [400U/mg 蛋白質 ]（ 3） 1g 酶制劑的總蛋白含量及總活力。 [， 105U] 解：（ 1）（ ） /（ 2 25/25） = （ 1500/60） /（ 25/25） =250U （ 2） 250/=400U/mg （ 3） [（ 1 25/25） ] 103= 1