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微生物的遺傳變異和育種待定-資料下載頁

2026-01-05 00:16本頁面

　　

【正文】 F質粒或其攜帶的核基因組傳遞給后者，使后者獲得若干新遺傳性狀的現象。 ? 能進行結合的微生物種類 ? 主要在細菌和放線菌中存在； ? 研究得最清楚的是； ? ，決定性別的是一種質粒，即 F因子 ——是屬于附加體的質粒。 ? 根據 F因子在細胞內的存在方式，將型： ? F+ 菌株 ? 含有游離的 F因子，在細胞表面還有性菌毛 ? F菌株 ? 不含 F因子，細胞表面沒有性菌毛。 ? Hfr（高頻重組）菌株 ? F因子整合在核染色體組特定位點上 ? F’菌株 ? Hfr菌株內的 F因子因不正常切離而脫離核染色體組時形成的游離的但攜帶一小段核染色體基因的特殊 F因子 ? 初生的 F’菌株大腸桿菌的四種類型 F質粒的 4種存在方式及相互關系大腸桿菌的接合方式 ? F+ F ? F+ + F+ ? Hfr F ? Hfr + F （多數情況下） ? Hfr F ? Hfr + Hfr （少數情況下） ? F’ F ? F’+ F’ ? F因子轉導 ? 以 F’質粒通過接合來傳遞供體基因的方式 F質粒的接合 F+ F F+ F F+ F+ F+ F+ Donor Recipient F+ 中斷實驗（四）原生質體融合 (protoplast fusion) ? 通過人為的方法，使遺傳性狀不同的兩細胞的原生質體發生融合，借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩定重組子的過程。此重組子稱為融合子。 ? 能進行原生質體融合的細胞極其廣泛 ? 原核生物、真核生物、高等動植物、人體原生質體融合的主要步驟： ? 1 選擇親本 ? 有特殊價值 ? 有選擇性遺傳標記 ? 2 獲得原生質體 ? 脫壁酶去除細胞壁（細菌、放線菌、真菌） ? 3 原生質體融合 ? 促融合劑 PEG(聚乙二醇 )或電脈沖 ? 4 篩選穩定的融合子原生質體融合的主要步驟：各種融合子長成菌落影印接種 [] 檢出 [A+B+] 篩選優良性狀的融合子篩選 [+] 原生質體融合的特點 ? ? ? ，可獲得生產性狀更為優良的新物種 ? ，對等融合形成（雙向轉移）原生質體融合二、真核微生物的基因重組 ? 基因重組的方式：有性雜交、準性雜交、原生質體融合和遺傳轉化； ? （一）有性雜交 ? 指不同遺傳型的兩性細胞之間發生的接合和隨之進行的染色體重組，進而產生新遺傳型后代的一種育種技術。 ? 舉例 —釀酒酵母 ? 酒精酵母：產酒精率高但對葡萄糖的發酵力弱 ? 面包酵母：產酒精率低但對葡萄糖的發酵力強比較項目雙倍體單倍體細胞菌落液體培養在產孢培養基上大，橢圓形大，形態均一繁殖較快，細胞較分散會形成子囊小，球形小，形態變化多繁殖較慢，細胞常聚集成團不形成子囊 ? 準性生殖 ? 是一種類似于有性生殖，但比它更為原始的一種生殖方式，它可使同種生物兩個不同菌株的體細胞發生融合，且不以減數分裂的方式而導致低頻率的基因重組并產生重組子。 ? 準性生殖過程 ? 菌絲聯結 ——頻率低 ? 形成異核體 ——質配后兩個單倍體核集中到同一細胞。 ? 核融合 ——異核體中的兩個細胞核，低頻率產生雙倍體雜合子 ? 體細胞染色體交換和單倍體化 — 雙倍體雜合子不穩定，在進行有絲分裂過程中，極少數核內的染色體會發生交換和單倍體化，從而形成具有新性狀的單倍體雜合子。（二）準性雜交比較項目準性生殖有性生殖參與接合的親本細胞獨立生活的異核體階段接合后雙倍體的細胞形態雙倍體變為單倍體的途徑接合發生的幾率形態相同的體細胞有與單倍體基本相同有絲分裂偶然發現，幾率低形態或生理上有分化的性細胞無與單倍體明顯不同減數分裂正常出現，幾率高準性生殖和有性生殖的比較準性雜交育種 ? 選擇親本：營養缺陷型 ? 強制異合：分生孢子相互混勻 ?[] ? 移單菌落：長出的菌落接種到 []斜面 ? 檢驗穩定性：夾層法 ? 促進變異：誘變處理 ?增加新性狀第四節基因工程 ? 一、基因工程的基本操作 ? 目的基因的獲得 ? 載體的選擇 ? 目的基因與載體 DNA 的體外重組 ? 重組載體導入受體細胞 ? 重組受體細胞的篩選和鑒定 ? “ 工程菌 ” 的大規模培養 ? 二、基因工程的應用第五節菌種的衰退、復壯和保藏 ? 一、菌種保藏的原理 ? 根據微生物的菌種生理、生化特性，在人工創造的條件下盡量降低微生物細胞的代謝強度，使細胞基本上處于休眠狀態，生長繁殖受到抑制但又不至于死亡，以減低菌種的變異率。低溫、干燥、真空是用于菌種保藏的重要手段。 ? 復壯 ? 狹義：使衰退的菌種重新恢復原來的優良特性稱為復壯。 ? 廣義：在菌種衰退前，有意識地選擇到自發的正變個體 ? 衰退 ? 菌種經過長期傳代培養或保藏，由于自發突變的作用而引起某些優良特性變弱或消失的現象。二、菌種衰退與復壯三、防止菌種衰退的方法 ? 控制傳代次數 ? 創造良好的培養條件 ? 利用不易衰退的細胞傳代 ? 采用有效的菌種保藏方法四、菌種復壯的方法 ? 純種分離法 ? 通過宿主體復壯 ? 淘汰已衰退的個體 ? 理化因素誘變 ? 五、菌種的保藏方法 ? 低溫斜面保藏 ? 液體石蠟保藏 ? 砂土管保藏 ? 真空冷凍干燥保藏在一定時間內使菌種不死、不變、不亂基本要求：基本方法：生活態休眠態培養基傳代培養寄主傳代培養冷凍干燥斜面、平板液氮、低溫冰箱沙土管、冷凍真空干燥中國微生物菌種保藏管理委員會 CCCCM ? 普通微生物菌種保藏管理中心 ? 中科院北微所（ AS）：真菌、細菌 ? 武漢病毒所（ ASIV）：病毒 ? 農業微生物菌種 ? 農科院土肥所（ ISF） ? 工業微生物菌種 ? 食品發酵所（ IFFI） ? 抗生素菌種 ? 醫科院醫藥生物技術所（ IA） ? 四川抗研所（ SIA）：新抗菌種

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