畢業論文-常用植物香料提取液對黃曲霉抑制效果的研究-資料下載頁

　　

【正文】 形態變化， AC：培養于 PDB； DF：培養于含有孜然精油的 PDB；其中， A 與 D 培養 2h (400)， B 與 E 培養 6h (400） ， C 與 F 培養 10h (1000) 從上圖中可以看出，對照組中隨著 時間推移， 10 h 后，發芽管延伸，部分形成菌絲體。實驗組中，黃曲霉孢子未見發芽管，且孢子大小明顯小于對照組的；結果表明孜然精油能顯著抑制黃曲霉孢子的萌發，并對孢子有破壞作用 [ 17]。 有研究初步揭示對孢子萌發力抑制作用的機制在于核 DNA 的致死損傷。 采用顯微多道分光光度分析系統與單細胞凝膠電泳或稱彗星實驗（ et assay）圖像分析相結合，測定黃曲霉 DNA 損傷在國內尚屬首次。發現首先是通過改變膜的選擇性通透性而損傷質膜進入細胞，進入細胞后，又與 DNA 相互作用，使核 DNA 產生不可逆損傷，使有關基因 不能表達 (待專文報道 ） ，從而失去對代謝的調節控制以及自我復制的正常進行，最后導致孢子失去萌發力。該方法把鑒定 DNA 損傷的化學檢測推進到數值化研究范圍，對活態細胞代謝及毒理學的研究具有重要理論和應用價值 [25]。 A B C D E F 陜西科技大學畢業論文 22 4 結論與展望 結論 （ 1） 本次實驗中，采用的傳統水蒸餾法和亞臨界萃取法提取孜然種子中的精油，得率分別為 %， %，總體來說，得率不高。 （ 2） 抑菌實驗中，采用固體培養（揮發接觸發）法研究孜然精油對黃曲霉生長的抑制效果，水蒸餾精油與亞臨界精油的抑制率分別達到 %， %。 總體抑制效果較為明顯。 （ 3） 每隔 24 h 在 365 nm 紫外儀下拍照觀察其熒光性可知，孜然精油對黃曲霉 的產毒能力有一定的抑制作用，使其與對照組比較熒光性較弱。 （ 4） 孜然精油對黃曲霉菌絲體形態影響的實驗中，對照組與實驗組菌絲體形態差別明顯， 使黃曲霉菌絲體發生扭曲，收縮變形，嚴重破壞細胞壁的結構，阻止菌絲體的生長。 （ 5） 孜 然精油對黃曲霉孢子萌發的影響實驗中，每隔兩小時觀察一次孢子萌發的狀態，共觀察 10 h。對照組與實驗組差別明顯，實驗組孢子數較少， 能顯著抑制黃曲霉孢子的萌發，引起孢子收縮、塌陷，降低孢子表面的粗糙 度，破壞細胞壁結構，導致細胞死亡。 展望 （ 1）本研究發現，在孜然精油提取方面，采用的兩種方法提取率均不是很高，為了進一步提高其精油得率，在水蒸餾方法中，可在得出油水混合物后直接將油水分離開來，再加入一定量的無水硫酸鈉除去多余的水分，提高精油得率。在亞臨界萃取中，可選用不同的萃取劑，適當改變實驗條件這幾方面進行進一步的研究，來提高其得率。也可選用其他不同的方法如有機溶劑萃取等來提取精油并比較其精油得率。 （ 2）本研究發現了孜然精油能有效抑制黃曲霉 生長，但未研究其 最小抑菌濃度（ MIC）和最 小殺菌濃度（ MFC），應進一步在好的結果基礎上進行深入的研究 [18]，可采用微孔板培養法。 （ 3） 在固體培養熒光性觀察下，發現孜然精油對黃曲霉 產毒能力也有一定的抑制效果，但未進一步研究其機理，可采用 薄層層析法研究其對黃曲霉 產 AFB1能 力的影響 [ 22, 23,24]。 （ 4）本研究還可以從細胞膜完整率測定以及黃曲霉蛋白表達的抑制等不同方面來進行更深的研究。 常用植物香料提取液對黃曲霉抑制效果的研究 23 致 謝 大學四年一晃而過，最后的論文傾注了很多的心血，心中倍感充實，在論文即將完成之時，心中感概頗多，也愿為自己的大 學生活畫上圓滿的句號。 本論文是在 徐丹老師的悉心指導下完成的。首先要感謝我的徐丹老師， 從論文的選題、設計、試驗及論文的定稿，都傾注了大量的心血。從寒假開始，老師就提前督促我們完成實驗前期方案的設計，外文文獻的翻譯等工作。開學后從開題報告開始，一遍一遍的幫我們修改，指導實驗方案，老師嚴謹認真的工作態度，淵博的專業知識，寬厚仁慈的胸懷、積極樂觀的生活態度，為我樹立了一輩子學習的典范，我們就是應該這樣在人生的道路上積極的前行，不斷提高和充實自己。用知識來武裝自己。 我要感謝在實驗過程中在實驗儀器方面提供各種幫助給 我的化工學院的儀器管理老師杜老師，感謝在實驗室中提供給我各種幫助的研究生的學長學姐們，有不懂的地方總會耐心為我指導，讓我的實驗中少走了許多彎路。在此也要特別感謝石偉力學姐在實驗中的幫助，實驗原料儀器方面的購買都提供了很大的幫助。感謝舍友皇甫慧玲同學在我請假期間幫我記錄老師布置的任務以及實驗方案的改進內容。 很慶幸能有你們的幫助， 很榮幸能在這樣一個團結奮進、充滿朝氣和活力的學術團體中完成我的論文實驗工作 !感謝室友在四年的學習生活中與我互相鼓勵，共同奮斗！ 感謝我的親人和朋友，你們永遠是我最大的依靠，是 我的力量之源，我會繼續努力奮斗，堅持不懈！ 高迎利 2022 年 6 月 16 日 陜西科技大學畢業論文 24 參考文獻 [1] Davis ND, IyerSK, Diener UL. Improved method of screening for aflatoxin with a coconut agar medium[J]. Applied and environmental microbiology, 1987, 53(7): 15931595. [2] 許艷麗 , 鮑蕾 , 梁成珠等 . 黃曲霉毒素檢測及其生物防治方法的研究進展 [J]. 安徽農業科學 , 2022, 35(32): 10210— 10212. [3] 中國科學院植物研究所主編 , 中國高等植物圖鑒 (補編第二冊 ), 科學出版社 , 1955 年 , P698. [4] C, G. Tassan, GF. Russell, J. Fodsei, 1975, 40: 1185 一 1188. [5] D. H. Freneh, The Biolosy and C hemistry of the eumbelliferae, Aeademic, Newyork , 1971 , P385. [6] 趙華 , 張金生 , 李麗華 . 植物精油提取技術的研究進展 [J]. 遼寧石油化工大學學報 , 2022, 26(4): 137140. [7] 王穎 , 姜子濤 , 李榮 , 胡耿輝 . 黑胡椒和白胡椒精油抗氧化性能及清除自由基能力的比較 . 中國調味品 , 2022, 34(5): 5058. [8] 曾 家豫 , 高亞娟 , 張繼 , 周興輝 , 唐功 . 孜然揮發油穩定性的研究 . 食品 科 技 , 2022, (3): 104107. [9] 閻建輝 , 唐課文 ,鐘明等 .氣相色譜 質譜法測定孜然芹揮發油的化學成分 . 2022, 20(6): 569572. [10]吳素玲 , 張衛明 , 孫曉明 , 楊艷 , 張鋒倫 . 不同產地孜然風味物質和黃酮等成分分析 .中國調味品 , 2022, 3(36): 9698 [11] 韓建華 , 祝木金 , 馮俊濤 . 27 種植物抑菌活性初步篩選 [J]. 西北農林科技大學學報 , 2022, 30(6): 134137. [12] 李偉 , 封丹 , 陸占國 . 孜然精油成分及其抗菌作 用 [J]. 食品科技 , 2022, (5): 182185. [13] 索菲婭 , 茍萍 , 生光 , 蘭燕維 . 藥孜然不同提取物抑菌作用的研究 [J]. 食品科學 , 2022, 27(4): 99101. [14] 謝喜國 , 阿布力米提 伊力 , 馬慶苓 , 阿吉艾克拜爾 艾薩 . 新疆和田產孜然揮發油成分和生物活性研究 [J]. 安徽農業科學 , 2022, 39(20): 1211612117. [15] 張應烙 , 馮俊濤 , 王汝賢 . 孜然提取物對幾種病菌生物活性的初步研究 [J]. 西北農林科技大學學報 , 2022, 31(5): 7779. [16] Sovova, H. Mathematical model for supercritical fluid extraction of natural products and extraction curve evaluation [J]. Journal of Supercritical Fluids, 2022, 33: 35~52. [17] 許鵬翔 , 賈衛民 , 畢良武 , 劉先章 , 趙玉芬 . 不同產地的迷迭香精油成分分析及品質研究 . 分析科學學報 , 2022. 19(4): 361363. [18] 衛生部藥典委員會 ,中華人民共和國藥典 (一部 ),廣州 :廣東化工出版社 . 常用植物香料提取液對黃曲霉抑制效果的研究 25 [19] 丁丁 , 胡梁斌 , 丁武等 . 紫外線照射對黃曲霉菌產毒影響的研究 . 江西農業學報2022, 24(10). [20].Geianna DR, Payne regulation of aflatoxin biosynthesis: from gene to genome[J]. Fungal Ge Biol, 2022, 46(2): 113125. [21] Shukla R, Kumar A, Prasad CS, etal. Antimycotic and antiaflatoxigenic potency of Adenocalymma alliaceum Miers. on fungi causing biodeterioration of food modities and raw herbal drugs[J]. International Biodeterioration amp。 Biodegradation, 2022, 62(4): 348351. [22] HH ES, HM M, MM of aflatoxins by some reference fungal strains[J]. Polish journal of Microbiology, 2022, 56(3): 215223. [23] Motomura M, Toyomasu T, Mizuno K, etal. Purification and characterization of an aflatoxin degradation enzyme from Pleurotus ostreatus[J]. Microbiological Research, 2022, 158. [24] Liu DL, Yao DS, Liang R, etal. Detoxification of aflatoxin B1 by enzymes isolated from Armillariella tabescens[J]. Food and Chemical Toxicology, 1998, 36(7): 563574. [25] 羅曼 , 蔣立科 , 鄒國林 . 檸檬醛致黃曲霉孢子喪失萌發力的機制 . 中國生物化學與分子生物學報 , 2022, 18 (2) :227～ 233.