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植株生理生長指標(biāo)的測定-資料下載頁

2026-03-29 23:15本頁面

　　

【正文】、葉綠素b的濃度；Cx?C為類胡蘿卜素的總濃度；A66A646和A470分別為葉綠素色素提取液在波長663nm、646nm和470nm下的吸光度。由于葉綠體色素在不同溶劑中的吸收光譜有差異，因此，在使用其他溶劑提取色素時，計算公式也有所不同。葉綠素a、葉綠素b在95%乙醇中最大吸收峰的波長分別為665nm和649nm，類胡蘿卜素為470nm，可據(jù)此列出以下關(guān)系式：Ca= （10）Cb= （11）Cx?C= （12）二、材料、儀器設(shè)備及試劑（一）材料新鮮（或烘干）的植物葉片。（二）儀器設(shè)備分光光度計、電子天平、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、擦鏡紙、滴管。（三）試劑95%乙醇（或80%丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉。三、實驗步驟（1）取新鮮葉片（或其他綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，用打孔器剪取葉片組或剪碎（去掉中脈），混勻。（2），共三份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉以及95%乙醇2~3mL（或80%丙酮，以下同），研磨成勻漿，再加95%乙醇10mL，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3~5min。（3）取濾紙一張，置漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻璃棒把提取液倒入漏斗中，過濾到25mL棕色容量瓶中，用少量95%乙醇沖洗研缽，研棒及殘渣數(shù)次，最后連同殘渣一起倒入漏斗中。（4）用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直到濾紙和殘渣中無綠色為止。最后用乙醇定容至25mL，搖勻。（5）把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95%乙醇為空白，在波長665nm、649nm、470nm下測定吸光度（如用丙酮提取，波長應(yīng)調(diào)整）。四、實驗結(jié)果計算與分析按公式10~12（如用80%丙酮，則按公式7~9）分別計算葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素的濃度（mg/L）。公式11相加即得葉綠素總濃度。求得色素的濃度后再按下式計算組織中各色素的含量（用mg/g鮮質(zhì)量或干質(zhì)量表示）：葉綠體色素的含量mgg=CVNW1000C—色素含量（mg/L）；V—提取液體積（mL）；N—稀釋倍數(shù)；W—樣品鮮質(zhì)量或干質(zhì)量（g）。1000—1L=1000mL。五、注意事項（1）為了避免葉綠素的光分解，操作時應(yīng)在弱光條件下進(jìn)行，研磨時間應(yīng)盡量短些。（2）葉綠體色素提取液不能混濁。完美DOC格式整理

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