動物生理學實驗指導實驗報告-資料下載頁

　　

【正文】 踝關節水平用線結扎腓神經，并剪斷。也可剪斷腓神經而分離脛神經，制成坐骨神經—脛神經標本。圖215 坐骨神經標本背面示意圖 圖216 坐骨神經腓腸肌標本制備法標本制成后，浸于任氏液中1020分鐘，使其興奮性相對穩定后即可用于實驗。注意事項：①制備坐骨神經干標本時應作鈍性分離，避免過度牽拉或用金屬器械、手捏碰神經干；②制備標本時應隨時對神經干滴加任氏液，以保持神經濕潤，并將暫不用的神經置于任氏液培養皿中保存。 神經屏蔽盒的安裝：一對刺激電極相互盡量靠近，兩對記錄電極盡可能分開，神經槽的所有電極都需要用小刀刮亮除去銹蝕和氧化膜并使各電極處于同一水平，以免接觸不良。用鑷子夾住神經標本一端的結扎線，將標本放置于電極上，方向是標本的近中端接觸刺激電極，遠中端接觸引導電極。 連接：刺激電極與計算機程控刺激器的輸出端相連；距離刺激電極近的一對記錄電極與計算機一通道相連，距離刺激電極遠的一對記錄電極與另一通道相連；兩對記錄電極引導的生物電信號輸入計算機電位通道接口，經程控生物放大器放大，A/D轉換，計算機處理，顯示器顯示。（見圖2251） R1R2 r1 r2 地 r3r4刺激輸出CH1CH2圖2251打開計算機電源開關，點擊桌面上MS4000U生物機能實驗系統軟件標志，選擇實驗項目動作電位，進行觀察實驗。 雙相動作電位 用單脈沖電刺激，調節程控刺激器的波寬和幅度，逐漸增加刺激強度，觀察動作電位的大小。掃描時，可在屏幕上見到一個雙相動作電位，即前面一個大的向上的波，后面—個向下的波(圖252)。每次顯示動作電位的同時，系統可立即計算出動作電位的幅值、波寬、潛伏期。圖2252．神經干動作電位傳導速度的測定 調節兩對記錄電極的位置使其盡量分開，并與神經干緊密接觸；調節刺激器強度以產生最大動作電位；量出兩記錄電極之間的距離(d)；給神經纖維單脈沖刺激，該刺激經歷時間t1后，傳至距刺激電極較近的記錄電極r1，引導出第一個動作電位，同樣，該刺激經歷時間t2后，傳至距刺激電極較遠的記錄電極r2，引導出第二個動作電位；分別測出刺激傳到引導電極r1（近)和引導電極r2 (遠)的時間(潛伏期t1和t2)，二者之差(t2t1)就是動作電位傳導距離(d)所消耗的時間，所以，傳導速度v=d/(t2t1)，單位是m/s。【注意事項】1．神經標本盡量分離長，分離干凈，但不能損傷神經干。2．要避免標本干燥，但同時注意電極間不要有過多的任氏液，以免造成短路。各種生理鹽溶液的用途： 　　生理鹽水：即與血清等滲之NaCl溶液，%%，%%。 　　任氏溶液：用于青蛙及其他冷血動物。 　　樂氏溶液：用于溫血動物之心臟、子宮及其它離體臟器。用作灌注液者須于用前通入氧氣泡15分鐘。低鈣樂氏液（）用于離體小腸及豚鼠的離體支氣管灌注。　　臺氏溶液：用于溫血動物之離體小腸。 實驗四 蛙心起博點【實驗原理】哺乳類動的心臟特殊傳導系統都具有自動節律性，但各部分的自律性高低不同，以竇房結的自律性為最高，所以竇房結被稱為哺乳動物的正常起搏點。蛙和其它兩棲類動物的正常起搏點是靜脈竇。正常情況下，蛙靜脈竇起博細胞發出的沖動通過特殊傳導系統依次傳到心房和心室引起興奮?！緦嶒災康摹? 。 。【實驗材料】 蟾蜍或蛙。 蛙類手術器械、計時器等。 品 任氏液。【實驗步驟及觀察項目】1. 取蟾蜍一只，用探針搗毀其大腦脊髓，將其仰臥固定于蛙板上，用鑷子提起腹部皮膚，剪一小口，然后向左右兩側鎖骨外側方向剪開并剪去皮膚，使成為一個倒三角形，并將肌肉、胸骨等剪掉，再用眼科剪剪開心包膜，暴露心臟。2. 從心臟的腹面可以看到一個心室，左右兩個心房，動脈園錐和左右主動脈干（圖231甲）。房室之間有一房室溝。用玻璃針將心室翻向頭端，就可以看到兩心房的下端有與兩心房相連的靜脈竇（圖231 乙、 丙）。心房和靜脈竇之間有一個半月形白色條紋稱竇房溝。靜脈竇與前后腔靜脈相連。圖2313. 觀察靜脈竇、心房、心室收縮順序，并記錄各部分博動頻率。4. 用鑷子在主動脈干下穿一線備用，用玻璃針將心尖翻向頭端，暴露心臟背面，然后將主動脈干下的線在竇房溝處結扎，以阻斷靜脈竇和心房之間的傳導，此為斯丹尼氏第一結扎。于是心房、心室立即停止跳動，而靜脈竇仍然照常跳動。記錄靜脈竇每分鐘的跳動次數。5. 待心房、心室恢復跳動后，再取一線在房室溝作第二次結扎。阻斷房室之間的傳導后，觀察心房、心室跳動情況。分別記錄單位時間內靜脈竇、心房和心室博動的次數?！窘Y果記錄】觀察項目心博頻率三者頻率是否一致靜脈竇心房心室結扎前第一結扎后第二結扎后【注意事項】。第一結扎竇房溝時不能扎靜脈竇，第二結扎只能扎房室溝，不能扎心房或心室。線要扎緊。，以保持其興奮性。【思考題】？。實驗五 期前收縮與代償間歇【實驗原理】心肌每興奮一次，其興奮性可經過有效不應期、相對不應期和超常期的周期性變化，其特性是有效不應期較長，約相當于整個收縮期和舒張早期。在此期間，任何強大的刺激均不能引起心肌興奮和收縮。隨后進入相對不應期和超常期，則相當于舒張中、晚期，此時，若給心室施加一次有效刺激，便可在正常竇性節律到達心室之前，引起一次擴布性的興奮與收縮，稱為期前收縮。期前收縮也有自己的有效不應期，這樣當緊接在期前收縮之后的竇房結（兩棲類為靜脈竇）的興奮傳至心室時，常常落在期前收縮的有效不應期內，因而不能引起心室心奮和收縮，而出現一段較長的間歇期，此時心室外于舒張狀態，直至再一次竇房結的興奮傳到心室時才引起心室收縮。這種在期前收縮之后出現的較長時間的間歇期，稱為代償間歇。【實驗目的】學習在體蛙心搏曲線的記錄方法，觀察期前收縮與代償間歇，驗證心肌有效不應期長的特性。【實驗材料】 蟾蜍或蛙 MS4000U生物機能實驗系統、張力換能器、蛙類手術器械、蛙心夾、鐵支柱、雙凹夾、刺激電極。 任氏液【實驗步預約與觀察項目】，破壞腦和脊髓，暴露心臟，在心舒期用蛙心夾住心尖約1毫米。，即二通道連張力換能器，四為刺激輸出接刺激電極。 選擇“實驗項目”、“循環實驗”、“期前收縮與代償間歇”CH1刺激輸出圖241` （標簽面朝上）的受力片上，調整松緊度，觀察心博曲線。曲線上升支表示心室肌收縮，下降支表示心室肌舒張。，分別在心縮期和心舒早、中、晚期刺激心室，注意心博曲線有無變化。【注意事項】1. 刺激電極與心室要接觸好。2. 滴加任氏液保持心臟濕潤?！舅伎碱}】1. 心肌興奮性有何特點？其生理意義是什么？2. 期前收縮之后是否一定伴有代償間歇，為什么？3. 解釋期前收縮幅度較低的原因。22