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2025-09-30 15:39本頁面

　　

【正文】將痘病毒的部分 DNA插入細菌載體中 , 借助同源序列的重組作用整合到病毒基因組中 U3 R U5U3 R U5U3 R U5U3 R U5 g a g p o l e n v PB(+)SDSAΨ PB()RU5 U3 R g a g p o l e n v Ψ AAAA 339。539。+RU5 U3 R e n v AAAA 339。539。DNAm R N ASDSAPI RE SI R ESInte r n a l R ib o s o m e Entry S iteApr o r i逆病毒的結構和載體結構 3. 昆蟲核型多角體病毒載體該類病毒載體是病毒整合型表達載體，具有以下優點： 1）外源基因可獲得高表達： 1500mg/L 培養物 2）表達產物仍具有生物學活性 3）重組效率高 BacPAK6Viral DNATransfer VectorTarget genecDNACotransfectintoinsect cellsIncubate 23 daysHarvest virusPlate to obtain individualplaques (optional)Infect insect cells(largescale)Amplify virusTiter amplified virus(remended)Harvest expessedproteinFigure BacPAK Baculovirus System.昆蟲桿狀病毒表達系統 B a c P A K 6 ( 1 3 7 k b )O R F 1 6 2 9O R F 6 0 3l a c ZB s u 3 6 1B s u 3 6 1B s u 3 6 1o r i2 0 9 9 b pA c M N P V S V 4 02 4 9 3 b pA c M N P VM 1 3 o r ip A c U W 3 1 8 . 5 k bP o l y A+Pp 1 0Pp o l y h e d r i nP o l y A+S i g n a lA m prM 1 3 o r i1 4 3 3 b pA c M N P Vo r i 1 2 5 0 b pA c M N P Vp B a c PA K 8 / 9 5 . 5 k bPp o l y h e d r i nP o l y A+S i g n a lAmpr昆蟲桿狀病毒的轉移載體和表達載體三 . 標記基因 1. tk基因和 dhfr基因 (胸苷激酶和二氫葉酸還原酶基因 ) 需相應的突變體 2. gpt基因（來自）非轉化細胞可生長在加有氨基喋呤和霉酚酸，腺嘌呤的培養基中。若培養基中不加入鳥嘌呤而改用黃嘌呤則此細胞不能生長，但轉化性細胞則能在此培養基中生長。前體 X MP G MPA MP腺嘌呤霉酚酸黃嘌呤次黃嘌呤鳥嘌呤氨基嘌呤脫氨酶I M P Tn 5的氨基糖 ― 3’磷酸轉移酶基因可抗 neomycin， Kanamycin， G418（抑制真核細胞的蛋白質合成） , 潮霉素抗性基因等。

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