微生物實驗室培養練習題(學生)(已修改)

　

【正文】 微生物實驗室培養與應用練習題一．解答題（共30小題）（一）微生物實驗室培養1．如圖所示是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程，圖乙是脲酶基因轉錄的mRNA部分序列．（1）圖中選擇培養基應以　　為唯一，鑒別培養基還需添加　　作指示劑，產脲酶細菌在該培養基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成　　色；（2）在5個細菌培養基平板上，培養一段時間后，平板上長出的細菌菌落數分別為11546178和191．該過程采取的接種方法是　　，每克土壤樣品中的細菌數量為　　108個，與血細胞計數板計數法相比，此計數方法測得的細菌數較　　；（3）現有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸，使圖乙序列中出現終止密碼，終止密碼有UAG、UGA和UAA，突變基因轉錄的mRNA中，終止密碼為　　，突變基因表達的蛋白含　　個氨基酸．2．牛奶中富含蛋白質，長期飲用有助于增強體質，但牛奶同時也是多種疾病的傳播載體．國家標準是每毫升牛奶中細菌數小于30000個．以下是牛奶消毒及細菌檢測實驗．（1）圖中步驟①稱為　　消毒法．步驟②是　　．（2）培養基中的蛋白胨可以為微生物提供　　．進行步驟③操作時，應選用下列中的哪種工具？　　．為了避免雜菌污染，此步驟應在　　附近進行．（3）將接種后的培養基和作為對照的　　同時放入37℃恒溫培養箱中，培養36小時．取出后統計各平板的菌落數，結果如表所示．應該選擇其中稀釋倍數為　　的平板進行計數，經過消毒后的牛奶中，細菌數大約是　　/mL．牛奶稀釋倍數10﹣210﹣310﹣4平板1菌落數87101平板2菌落數83121平板3菌落數851003．人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃，可用來發酵處理秸稈，提高秸稈的營養價值，為了增加發酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產菌株，并對其降解纖維素能力進行了研究，請回答下列問題：（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項不需要的是　　（填序號）①酒精燈 ②培養皿 ③顯微鏡 ④無菌水（2）在涂布平板時，滴加到培養基表面的菌懸液量不宜過多的原因是　　（3）向試管內分裝含瓊脂的培養基時，若試管口粘附有培養基，需要用酒精棉球擦凈的原因是　　（4）剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，但并不與纖維素降解產物纖維二糖和葡萄糖發生這種反應，研究人員在剛果紅培養基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落（見圖1），圖中降解圈大小與纖維素酶的　　有關，圖中降解纖維素能力最強的菌株是　　（填圖中序號）（5）研究人員用篩選到的纖維素酶高產菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進行發酵，測得發酵液中酶活性的結果見圖2，推測菌株　　更適合用于人工瘤胃發酵，理由是　　4．回答下列關于微生物和酶的問題．高溫淀粉酶在大規模工業生產中有很大的實用性．研究者從熱泉中篩選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖所示．（1）①過程稱為　　，②過程是為了　　．（2）Ⅰ號培養基稱為﹣﹣　　（按功能分）；該培養基中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營養成分　　． A．瓊脂 B．葡萄糖 C．硝酸銨 D．碳酸氫鈉（3）一般對配制的培養基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了　　．在高溫淀粉酶運用到工業生產前，需對該酶的最佳溫度范圍進行測定．圖中的曲線①表示酶在各種溫度下酶活性相對最高酶活性的百分比．將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性，由此得到的數據為酶的熱穩定性數據，即圖中的曲線②．（4）根據圖中的數據，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是　　．A．40℃一50℃B．50℃一60℃C．60℃一70℃D．70℃﹣80℃（5）據圖判斷下列敘述錯誤的是　　．A．該酶只能在最佳溫度范圍內測出活性B．曲線②35℃數據點是在80℃時測得的C．曲線①表明80℃是該酶活性最高的溫度D．曲線②表明該酶的熱穩定性在70℃之后急劇下降．5．多環芳烴菲在染料、殺蟲劑等生產過程中被廣泛使用，是土壤、河水中常見的污染物之一．如圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環芳烴菲的菌株Q的主要步驟．請回答：（1）步驟①→③的培養過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率；另一方面能　　．（2）步驟④用平板劃線法純化菌株Q過程中，在做第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，原因是　　．采用固體平板培養細菌時要倒置培養的目的是　　（3）接種環通過灼燒來滅菌，完成步驟④中劃線操作，共需灼燒接種環　　次（4）為了獲得分解多環芳烴菲能力更強的菌株，研究人員又對菌種Q進行了誘變處理，得到突變株K．為了進一步鑒定菌株K并比較兩種菌株降解多環芳烴菲的能力，設計了下列實驗，請補全實驗步驟：①取9只錐形瓶均分成三組，編號A、B、C②向A、B、C三組錐形瓶中加入　　的培養液．③向A、B、C三組培養液中分別加入　　．④28℃恒溫培養3天后，測定　　．6．【生物﹣﹣選修1生物技術實踐專題】從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養→純種分離→性能測定．富集培養指創設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環境條件，使其群落的數量大大增加，從而分離出所需微生物的培養方法．（1）接種前要對培養基進行　　處理．在整個微生物的分離和培養過程中，一定要注意在　　條件下進行．（2）不同微生物的生存環境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化．如培養纖維素分解菌的菌樣應從　　環境中采集．（3）從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制　　培養基，該培養基中需要加入纖維素粉作為唯一的　　．（4）經過梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養基上，在該培養基中需要加入的特殊染料是　　，當形成菌落以后可以根據菌落周圍是否產生　　來篩選纖維素分解菌．某同學在純化土壤中的細菌時，發現培養基上的菌落連成一片，最可能的原因是　　．7．某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗．實驗包括制備培養基、滅菌、接種及培養、菌落觀察計數．請回答與此實驗相關的問題．（1）培養基中含有蛋白胨、淀粉分別為細菌培養提供了氮源和　　．除此之外，培養基還必須含有的基本成分是　　和　　．（2）對培養基進行滅菌，應該采用的方法是　　．（3）為了盡快觀察到細菌培養的實驗結果，應將接種了湖水樣品的平板置于　　中培養，培養的溫度設定在37℃．要使該實驗所得結