20xx高中生物實驗總結(全)(已修改)

　

【正文】 1（人教版新課標） 考綱要求 ：理解實驗目的、原理、方法和操作步驟，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用。 補初中實驗：認識顯微鏡的結構，學會使用顯微鏡 實驗目的：認識顯微鏡的結構，初步掌握使用顯微鏡的方法。 一、光學顯微鏡的結構、呈像原理、放大倍數計算方法 結構： 光學部分：目鏡、鏡筒、物鏡、遮光器（有大小光圈）和反光鏡（有平面鏡和凹面鏡） 機械部分：鏡座、傾斜關節、鏡臂、載物臺（上有通光孔、壓片夾）、鏡頭轉換器、粗、細準焦螺旋。 注 意 ：目鏡無旋轉螺絲，鏡頭越長，放大倍數越小；物鏡有旋轉螺絲，鏡頭越長，放大倍數越大。 呈像原理：映入眼球內的是倒立放大的虛像。（物鏡質量的優劣直接影響成像的清晰程度） 放大倍數：目鏡和物鏡二者放大倍數的乘積） 注：顯微鏡放大倍數是指直徑倍數，即長度和寬度，而不是面積。 二、顯微鏡的使用 ：置鏡（裝鏡頭）→對光→置片→調焦→觀察 2 1． 安放。顯微鏡放置在桌前略偏左，距桌緣 8— 10cm 處，裝好物鏡和目鏡（目鏡 5 物鏡 10） 2．對光。轉動轉換器，使低倍鏡對準通光孔，選取較大光圈對準通光孔。左眼注視目鏡，同時把反光鏡轉向光源，直至視野光亮均勻適度。調節視野亮度只可用遮光器和反光鏡，光線過強，改用較小光圈或用平面反光鏡；光線過弱，改用較大光圈或用凹面反光鏡。選低倍鏡→選較大的光圈→選反光鏡（左眼觀察） 3．觀察。將切片或裝片放在載物臺上，標本正對通光孔中心。轉動粗準焦螺旋（順時針），俯首側視鏡筒慢慢下降，直到物鏡接近切片（約 ），左 眼觀察目鏡，（反時針）旋轉粗準焦螺旋，使鏡筒慢慢上升，看到物像時輕微來回旋轉細準焦，直到物像清晰。（找不到物像時，可重復一次或移動裝片使標本移至通光孔中心）。．觀察時兩眼都要睜開，便于左眼觀察，右眼看著畫圖。側面觀察降鏡筒→左眼觀察找物像→細準焦螺旋調清晰 4．高倍鏡的轉換。找到物像后，把要觀察的物像移到視野中央，把低倍鏡移走，換上高倍鏡，只準用細準焦螺旋和反光鏡把視野調整清晰，直到物像清楚為止。 順序：移裝片→轉動鏡頭轉換器→調反光鏡或光圈→調細準焦螺旋 注：換高倍物鏡時只能移動轉換器，換鏡后，只準調節細 準焦和反光鏡（或光圈）。 問 1：低倍鏡換為高倍鏡后，若看不到或看不清原來的像，可能原因？（ ABC） A、物像不在視野中 B、焦距不在同一平面 C、載玻片放反，蓋玻片在下面 D、未換目鏡 問 2：放大倍數與視野的關系： 放大倍數越小，視野范圍越大，看到的細胞數目越多，視野越亮，工作距離越長； 放大倍數越大，視野范圍越小，看到的細胞數目越少，視野越暗，工作距離越短。 故裝片不能反放。 5．裝片的制作和移動：制作：滴清水→放材料→蓋片 移動：物像在何方，就將載玻片向何處移。（原因：物像移動的方向和實際移動玻片的方 向相反） 6．污點判斷： 1）污點隨載玻片的移動而移動，則位于載玻片上； 2）污點不隨載玻片移動，換目鏡后消失，則位于目鏡；換物鏡后消失，則位于物鏡； 3）污點不隨載玻片移動，換鏡后也不消失，則位于反光鏡上。 7．完畢工作。使用完畢后，取下裝片，轉動鏡頭轉換器，逆時針旋出物鏡，旋進鏡頭盒；取出目鏡，插進鏡頭盒，蓋上。把顯微鏡放正。 實驗一 觀察 DNA、 RNA 在細胞中的分布 （必修一 P26） 一．實驗目的：初步掌握觀察 DNA 和 RNA 在細胞中分布的方法 二．實驗原理： 1．甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對 DNA 和 RNA 的親和力不同，甲基綠使 DNA 呈現綠色，吡羅紅使 RNA呈現紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色，可以顯示 DNA 和 RNA 在細胞中的分布。 2．鹽酸能夠改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時使染色休中的 DNA 和蛋白質分離，有利于DNA 與染色劑結合。 三．方法步驟： 操作步驟 注意問題 解釋 取口腔上皮細胞制片 載玻片要潔凈， 滴一滴質量分數為 %的 NaCl 溶液 用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內側壁上輕刮幾下取細胞 將載玻片在酒精燈下烘干 防止污跡干擾觀察效果 保持細胞原有形態 消毒為防止感染，漱口避免取材失敗 固定裝片 （細胞已死亡） 水解 將烘干的載玻片放入質量分數為 8%的鹽酸溶液中，用 300C水浴保溫 5min 改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，促進染色體的 DNA 與蛋白 3 質分離而被染色 沖冼涂片 用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片 10S 洗去殘留在外的鹽酸 染色 滴 2 滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色 5min 兩種溶液混合，現配現用 觀察 先低倍鏡觀察，選擇染色均勻、色澤淺的區域，移至視野中央，調節清晰后才換用高倍物鏡觀察 使觀察效果最佳 實驗二 檢測生物組織中 的糖類、脂肪和蛋白質 （必修一 P18） 一．實驗目的： 嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質 二．實驗原理：某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物，產生特定的顏色反應。 1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發生作用，可生成磚紅色的 Cu 2O 沉淀。如： 加熱 葡萄糖 + Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓（磚紅色） + H 2O，即 Cu ( OH ) 2 被還原成 Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）。淀粉遇碘變藍色。 3．蛋白質與雙縮脲試劑發生作用，產生紫色反應。（蛋白質分子中含有很多肽鍵，在堿性 NaOH 溶液中能與 雙縮脲試劑中的 Cu2+作用，產生紫色反應。） 三．實驗材料 1．做可溶性還原性糖鑒定實驗，應選含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。（因為組織的顏色較淺，易于觀察。） 2．做脂肪的鑒定實驗。應選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實驗前一般要浸泡 3~4 小時（也可用蓖麻種子）。 3．做蛋白質的鑒定實驗，可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清。 四、實驗試劑 斐林試劑（包括甲液：質量濃度為 ：質量濃度為 ）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括 A 液：質量 濃度為 ：質量濃度為 CuSO4 溶液）、體積分數為 50%的酒精溶液，碘液、蒸餾水。 五、方法步驟： （一）可溶性糖的鑒定 操 作 方 法 注 意 問 題 解 釋 1. 制備組織樣液。 （去皮、切塊、研磨、過濾） 蘋果或梨組織液必須臨時制備。 因蘋果多酚氧化酶含量高，組織液很易被氧化成褐色，將產生的顏色掩蓋。 2. 取 1 支試管，向試管內注入 2mL 組織樣液。 3. 向試管內注入 1mL 新制的斐林試劑，振蕩。 應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲 存，使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑； 切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。 斐林試劑很不穩定，甲、乙液混合保存時，生成的 Cu ( OH ) 2 在 70~900C 下分解成黑色 CuO 和水； 甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發生反應，無Cu ( OH ) 2 生成。 4. 試管放在盛有 50650C 溫 最好用試管夾夾住試管上部，使 防止試管內的溶液沖出試 4 水的大燒杯中，加熱約 2 分鐘，觀察到溶液顏色：淺藍色 → 棕色 → 磚紅色（沉淀） 試管底部不觸及燒杯底部，試管口不朝向實驗者。 管，造成燙傷； （二）脂肪的鑒定 操 作 方 法 注 意 問 題 解 釋 花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片，將薄片放在載玻片的水滴中，用吸水紙吸去裝片中的水。 干種子要浸泡 3~4 小時，新花生的浸泡時間可縮短。 因為浸泡時間短，不易切片，浸泡時間過長，組織較軟，切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些，便于觀察。 在子葉薄片上滴 2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液，染色 1 分鐘。 染色時間不宜過長。 用吸水紙吸去薄片周圍染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時，酒精是脂溶性溶劑，可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。 用吸水紙吸去薄片周圍酒精，滴上1~2 滴蒸餾水，蓋上蓋玻片。 滴上清水可防止蓋蓋玻片時產生氣泡。 低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處，可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。 裝片不宜久放。 時間一長，油滴會溶解在乙醇中。 三、蛋白質的鑒定 操 作 方 法 注 意 問 題 解 釋 制備組織樣液。 （浸泡、去皮研磨、過濾。） 黃豆浸泡 1 至 2 天，容易研磨成漿，也可購新鮮豆漿以節約實驗時間。 鑒定。加樣液約 2ml 于試管中，加入 雙縮脲試劑 A，搖勻；再加入雙縮脲試劑 B 液 3~4滴，搖勻，溶液變紫色。 A 液和 B 液也要分開配制，儲存。鑒定時先加 A 液后加B 液。 CuSO4 溶液不能多加。 先加 NaOH 溶液，為 Cu2+與蛋白質反應提供一個堿性的環境。 A、 B 液混裝或同時加入，會導致 Cu2+ 變成 Cu ( OH ) 2 沉淀，而失效。 否則 CuSO4 的藍色會遮蓋反應的真實顏色。 可用蛋清代替豆漿。 蛋清要先稀釋。 如果稀釋不夠，在實驗中蛋清粘在試管壁，與雙縮脲試劑反應后會粘固在試管內壁上，使反應不容易徹底，并且試管也不易洗干凈。 附：淀 粉的檢測和觀察 用試管取 2ml 待測組織樣液，向試管內滴加 2 滴碘液，觀察顏色變化。 碘液不要滴太多 以免影響顏色觀察 5 實驗三 用顯微鏡觀察多種多樣的細胞 （必修一 P7） 一．實驗目的： 1）使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞，比較不同細胞的異同點 2）運用制作臨時裝片的方法 二．實驗原理： 利用高倍鏡可以看到某些在低倍鏡下無法看到的細胞結構，例如：可以看到葉綠體、線粒體等細胞器，從而能夠區別不同的細胞。 三．方法步驟： 第一步：轉動反光鏡使視野明亮 第二步：在低倍鏡下觀察清楚后，把 要放大觀察的物像移至視野中央 第三步：用轉換器轉過高倍物鏡 問（ 1）是低倍鏡還是高倍鏡的視野大，視野明亮？為什么？ 提示：低倍鏡的視野大，通過的光多，放大的倍數小；高倍鏡視野小，通過的光少，但放大的倍數高。 問（ 2）為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察？ 提示：如果直接用高