生物化學維生素與輔酶章節考點總結(專業版)

　　

【正文】 Western Blotting 是研究克隆基因表達產物、鑒定克隆株的常用技術。 RNA 的制備（重點介紹 mRNA 的分離、純化） 用 ，上清中即為 RNA核蛋白（ RNP）。 復性速度可用 Co這也是核酸研究技術的基礎。 功能： rRNA是構成核糖體的骨架，與核糖體結合蛋白一起構成核糖體，為蛋白質的合成提供場所。 真核 mRNA （ 1）、 3’ 端有一段約 30300 核苷酸的 polyA。 H2A、 H2B、 H H4 各兩分子對稱聚集成組蛋白八聚體。 繩子的兩股以右旋方向纏繞，如果在一端使繩子向纏緊的方向旋轉，再將繩子兩端連接起來，會產生一個左旋的超螺旋，以解除外加的旋轉造成的脅變，這樣的超螺旋叫正超螺旋。功能還不完全清楚 ，但轉錄的終止作用與回文結構有關。 相對濕度 75%， DNA鈉鹽結晶， A— DNA。 GDP半乳糖、 GDP葡萄糖等是糖蛋白生物合成的活性糖基供體。 MH2+NAD+→ M+NADH+H+ 酶 底物 產物 輔酶 醇脫氫酶 乙醇 乙醛 NAD+ 異檸檬酸脫氫酶 異檸檬酸 α 酮 戊二酸 NAD+或 NADP+ 五、 維生素 B6 與磷酸吡哆醛輔酶 維生素 B6 包括：吡哆醛、吡哆胺、吡哆醇 P375 結構式 活性形式：磷酸吡哆胺、磷酸吡哆醛 功能：磷酸吡哆醛轉氨酶、磷酸吡哆胺轉氨酶 P376 轉氨反應過程 轉氨、脫羧、 消旋 六、 維生素 B7 生物素與羧化輔酶 P373 化學名稱：生物素 P373 生物素的結構 生物素是多種羧化酶的輔酶 酶蛋白的 Lysε — NH2 與生物素的羧基結合，生成 Enzbiotin 復合體 丙酮酸的羧化： EBiotin+HCO3 + ATP → EBiotinCOO + ADP + Pi EBiotinCOO + 丙酮酸 → 草酰乙酸 + EBiotin 活性位點： N1 P374 N1 羧化生素素 七、 維生素 B11 葉酸 P371 維生素 B11 又名葉酸，喋血谷氨酸 P372 結構式：葉酸 活性形式：四氫葉酸（ THF），傳遞一碳單位的輔酶 傳遞的一碳單位有：甲基、亞甲基（甲叉）、甲川基、甲酰基 、亞胺甲基 活性位點： N N10 舉例： P373 甲硫氨酸的合成 八、 維生素 B12 鈷胺素 化學名稱：鈷胺素。 活性形式： 1， 25 一二羥基膽鈣固醇。 水溶性： B B B B1 C 等，輔酶。 四、 維生素 K（ K K K3） P364 結構 來源 食物和腸道微生物合成；綠色蔬菜、動物肝臟、牛奶、大豆， 大腸桿菌、乳酸菌 功能 促進凝血。 第一節 核酸的化學組成 核酸是一種線形多聚核苷酸，基本組成單位是核苷酸。 3/、 5/磷酸二酯鍵是 DNA、 RNA的主鏈結構 。 寬 nm 寬 大溝 小溝 深 深 2nm 每圈螺旋含 10 個核苷酸 堿基堆積距離： 螺距： ，依靠彼此堿基間形成的氫鏈結合在一起。這對于復制和轉錄的起始十分重要，因為 G C 對有三個氫鍵，而 A T 對只有兩個氫鍵，此處雙鍵易解開。 P340 圖 258 松馳環、解鏈環、負超螺旋 ①連環數（ L） DNA雙螺旋中，一條鏈以右手螺旋繞另一條鏈纏繞的次數，以 L 表示。 ③ 天然 RNA分子都是單鏈線形分子，只有部分區域是 A型雙螺旋結構。 PolyA大大提高 mRNA在胞質中的穩定性。 圖 在相同條件下， DNA不被水解。 變性后 粘度降低，浮力密度升高。 A． 1 個核苷酸對（ ） 圖上查出 Cot1/2=4 若濃度為 Co= mol/L 則復性 50%所需時間 t= 秒 若要全部復性， Cot=104 t= 秒 B． 106 堿基對 圖上查出 Cot1/2=10 若濃度 Co= umol/L 則復性 50%所需時間 t=107 秒，約 115 天。 II 型酶的切割頻率 識別位點 4 44=256 6 46=4096 8 48=65536 Not I GCGGCCGC 限制酶的命名： 第一位： 屬名 E（大寫） 第二、三位： 種名的頭兩個字母小寫 co 第四位： 菌株 R 第五位： 羅馬字，從該細菌中分離出來的這一類酶的編號。 圖 鏈的增長反應是引物 DNA的 3’OH，對脫氧核糖核苷三磷酸的α 磷原子親核進攻的結果。 例如 HindIII AAGCTT 四、 DNA 物理圖譜及構建 （限制酶切圖譜、 DNA酶切位點圖譜） 在研究某一種 DNA 時，弄清該 DNA 分子有哪些限制酶切位點是很重要的。 條件溫和，防止過酸、過堿。 ② GC含量與 Tm值成正比， GC含量高，則 Tm越高，測定 Tm，可推知 GC 含量。 純 RNA的 A260/A280 應為 。 舉列： MS2病毒 mRNA， 3569 b，有三個順反子，分別編碼 A 蛋白、外殼蛋白和復制酶三種蛋白質。 結構特點 ①分子量在 25kd 左右， 7090b，沉降系數 4S 左右 ②堿基組成中有較多稀有堿基 圖 ③ 3’末端為? CpCpAOH，用來接受活化的氨基酸，此末端稱接受末端。 五、 染色體的結構 大腸桿菌染色體 大腸桿菌染色體是由 106bp 組成的雙鏈環狀 DNA分子，約 3000 個基因。 ZDNA 左手螺旋的 DNA。 ③磷酸基上的負電荷與介質中的陽離子或組蛋白的正離子之間形成離子鍵，中和了磷酸基上的負電荷間的斥力，有助于 DNA穩定。 b. DNA的堿基組成具有種的特異性，即不同生物的 DNA皆有自己獨特的堿基組成。 二、 核苷 核苷由戊糖和堿基縮合而成，糖環上 C1 與嘧啶堿的 N1 或與嘌呤堿的 N9 連接。 缺乏癥：腳氣病、多發性神經炎。 當全反視黃醛變成 11順式視黃醛時，部分全反視黃醛被分解為無用物質，故必需隨時補充維生素 A，每日補充量 1 mg。 11順式視黃醛，在暗光下經視網膜圓柱細胞作用后，與視蛋白結合成視紫紅質，形成一個視循環。 功能（ TPP） 脫羧輔酶。 RNA由 A、 G、 C、 U 堿基構成。 P334 表 5— 4。 GC 含量越多，越穩定。 RNARNA、 RNADNA雜交分子具有這種結構。 ②拓撲異構酶酶 II（擰松） 能使松馳環狀 DNA 轉變成負超螺旋形 DNA，每次催化使 L 減少 2，同時能使正超螺旋轉變成松馳 DNA。 已知一級結構的 tRNA有 160 種，每種 tRNA可運載一種特定的 ，一種 或多種 tRNA運載。沒有 5/帽子和 3/polyA。 酶水解 生物體內存在多種核酸水解酶 RNA水解酶 RNase DNA水解酶 DNase 核酸外一切酶 核酸內切酶 最重要的：限制性核酸內切酶 三、 光吸收性 堿基具有共軛雙鍵，使堿基、核苷、核苷酸和核酸在 240~290nm 的紫外波段有強烈的光吸收， λ max=260nm 鑒定