微生物學和微生物學檢驗的課程簡介(編輯修改稿)

　

【文章內容簡介】 。致病性與免疫性，微生物學檢查及防治原則。梅毒螺旋體：形態染色、培養特性、抗原構造。致病性與免疫性，微生物學檢查及防治原則。[基本內容]一、生物學性狀1. 形態與結構 2. 培養特性 3. 抗原結構 4. 抵抗力二、臨床意義1. 性傳播疾病 2. 自然疫源性疾病 三、微生物學檢查 1. 鉤端螺旋體 2. 梅毒螺旋體和雅司螺旋體 3. 伯氏螺旋體 4. 其他螺旋體第二十二章 立克次氏體[教學學時] 。[重點] 熟悉立克次氏體的共同特性、主要病原性立克次氏體的傳播方式與致病特點、血清學試驗（外裴氏試驗）。[要點與基本要求]概述：主要種類及主要特點：形態染色、培養特性、抗原結構、抵抗力、致病性與免疫性。主要病原性立克次氏：普氏及莫氏立克次氏體、恙蟲病立克次氏體、Q熱柯克斯體的傳播方式與致病特點、微生物學檢查。[基本內容]一、命名與分類二、生物學性狀 1. 形態與結構 2. 繁殖與代謝 3. 抗原成分 4. 變異性 5. 生活力與抵抗力三、臨床意義 1. 立克次體病 2. Q熱 3. 桿菌性血管瘤桿菌性紫癜和貓抓病 4. 埃立克體病四、 微生物學檢查1. 標本采集與處理 2. 直接檢出 3. 分離與鑒定 4. 血清學診斷5. 實驗室檢查法評價第二十三章 衣原體[教學學時] 1學時。[重點] 熟悉衣原體的主要種類及主要特性，掌握衣原體沙眼變種的致病性，微生物學檢查。[要點與基本要求]概述：主要種類及主要特點：發育周期與形態染色、培養特征、抗原結構、抵抗力。主要病原性衣原體：沙眼生物變種的致病性與免疫性，微生物學檢查，性病淋巴肉芽腫生物變種的致病性。[基本內容]一、命名與分類二、生物學性狀 1. 生活周期 2. 抗原成分 3. 抵抗力三、臨床意義 1. 沙眼衣原體感染 2. 鸚鵡熱 3. 肺炎衣原體感染四、微生物學檢查 1. 標本采集與處理 2. 直接檢出 3. 分離與鑒定 4. 血清學診斷第二十四章 病毒學檢驗病毒的基本形狀[授課學時] 1學時[學習重點] 病毒的大小、型態、結構、增殖；噬菌體和亞病毒的有關特性。[基本概念]1．病毒：是一類體積極小的非細胞型微生物。2．病毒體：是具有完整病毒典型形態結構和感染性的成熟病毒顆粒。3．復制周期：動物病毒的復制，一般可分為吸附、穿入、脫殼、生物合成、組裝與成熟、釋放等6個階段，稱為復制周期。4．頓挫感染：病毒進入宿主細胞后，如細胞缺乏病毒復制所需的酶、能量和原料，病毒在其中則不能合成自己所需的成分，或雖能合成部分或全部的核酸與蛋白質，但不能組裝與釋放有感染性的病毒顆粒，稱為頓挫感染。5．缺損病毒：由于病毒基因組不完整或基因位點改變，病毒核酸復制時失去了正常的互補作用，使mRNA正常功能受阻，病毒蛋白質的合成失調，因而復制出不完整無感染性的病毒，稱為缺損病毒。6．輔助病毒：當缺損病毒與另一種病毒共同培養時，若后者能為缺損病毒提供所缺少的物質，使缺損病毒能增值出完整有感染性的病毒體，這種有輔助作用的病毒稱為輔助病毒。6．干擾現象：當兩種不同的病毒或兩株性質不同的同種病毒，同時或先后感染同一細胞或機體時，可發生一種病毒抑制另一種病毒增殖的現象，稱為病毒的干擾現象。7．干擾素：病毒作用于宿主細胞可誘生一種糖蛋白，具有廣譜抗病毒作用，稱干擾素。8．亞病毒：將具有病毒核酸或僅有蛋白質的感染性活體，暫分類為亞病毒。屬于非典型病毒，包括類病毒、擬病毒、和朊病毒。[基本要點]注意學習以下內容1．病毒的測量單位：納米2．病毒的形態：球形或近球形、桿狀、絲狀、彈形、磚形、蝌蚪形。3．病毒的基本結構：核心和衣殼構成核衣殼。核心含有一種類型核酸（DNA或RNA），構成病毒的基因組。病毒衣殼：是包圍在核酸外面的一層蛋白質，由數量不等的殼粒組成。形成三種對稱型：螺旋對稱性、20面體立體對稱型和復合對稱型。4．病毒的輔助結構：包膜、其它輔助結構（如觸須樣纖維）。5．病毒的增殖：特殊的自我復制方式，包括吸附、穿入、脫殼、生物合成、組裝與成熟、釋放6個階段。6．兩種病毒感染同一宿主細胞時的增殖情況：雙重感染、互補作用、加強作用、表型混合、病毒交叉。7．注意學習亞病毒的概念、生物學特性和致病特點。第一節 病毒的分離與鑒定[授課學時] 2學時 [學習重點] 標本的采集、運送及處理的方法和注意事項；病毒分離培養與鑒定的方法。[基本概念]1．組織培養：將人或動物離體組織塊或分散的活細胞，模擬體內的生理條件在試管或培養瓶內加以培養，使之生存和生長，稱為組織培養。目前一般所指的組織培養多指單層細胞培養。2．原代細胞培養：采用機械或胰蛋白酶等處理離體的新鮮組織器官，制成分散的單個細胞懸液，加入生長液后，分裝于培養管中培養，活細胞貼壁生長繁殖，數天后形成單層細胞，稱原代細胞培養。3．次代細胞培養：將原代細胞培養物輕微消化后，再洗下分裝至含新鮮培養液的培養管中繼續培養，即為次代培養。4．二倍體細胞株：原代細胞經過多次傳代仍能保持二倍體特性，稱為二倍體細胞株。5．傳代細胞系：來源于腫瘤細胞或細胞株在傳代過程中變異的細胞系，是能在體外無限傳代的細胞系。6．細胞病變效應（CPE）：病毒在細胞內增殖后，由病毒引起的細胞形態學改變，稱為細胞病變效應。[基本要點]注意學習以下內容：1．病毒檢驗的大致程序：臨床標本 → 分離培養 → 初步鑒定 → 最后鑒定。2．標本的采集運送及處理：發病初期從感染部位采集足量標本，低溫運送、保存，盡快送檢，分離培養前去除標本中的沉渣、細菌、真菌和毒性物質等，必要時需濃縮、提純。3．病毒分離培養方法：包括組織培養、雞胚接種、動物接種。4．根據細胞的來源、染色體特性及傳代次數，細胞培養可分為三種類型：原代和次代細胞培養、二倍體細胞株、傳代細胞系。其中傳代細胞系的增殖特性類似于惡性腫瘤細胞，不能用于疫苗生產，可選擇性地用于病毒的分離、鑒定等研究。5．雞胚接種常用于粘液病毒、皰疹病毒、痘類病毒等的原代培養，也可選擇性地用于疫苗生產。根據病毒種類的不同，接種病毒的部位也各異，包括雞胚尿囊腔接種、羊膜腔接種、卵黃囊接種和絨毛尿囊膜接種。6．動物接種分離病毒需要選擇敏感動物及合適的接種部位。7．病毒的初步鑒定依據：動物感染范圍及潛伏期、對雞胚的敏感性、細胞形態變化類型、紅細胞吸附、病毒干擾現象、血凝性質、理化性質（核酸類型測定、大小形態、乙醚敏感試驗、耐酸試驗）8．病毒的最后鑒定依據：主要是血清學方法（中和試驗、補體結合試驗、血凝抑制試驗）和分子生物學方法。9．分離病毒的病原學意義（1）從人體組織、腦脊液、血液、眼部、水泡液分離到任何病毒均可認為具有高度病原學意義。尿液中檢出病毒也具有病原學診斷意義。（2）從呼吸道、陰道、腸道標本分離病毒的病原學意義需要考慮這些病毒是否有無癥狀攜帶者和長期排毒者。如果同時從同一病人的多個部位分離到同一種病毒，其病原學意義較大；如果僅從某種標本分離到病毒，病原學意義則較小。（3）分離培養呈陰性結果時，應考慮細胞的敏感性、是否有細菌或真菌的污染、是否接種量或病毒含量過低等。（4）結合恢復期血清滴度與急性期血清滴度之比值判斷所分離到的病毒與某一特定疾病的關系。第二節 病毒血清學診斷[授課學時] 2學時 [學習重點] 重點學習各種血清學診斷方法的原理和檢測意義。[基本概念]1．補體結合試驗：應用抗原與抗體特異性結合后，能激活補體的原理而設計的方法。包括2個抗原抗體系統和補體5個成分，其中病毒特異性抗原與抗體為反應系統，綿羊紅細胞與溶血素為指示系統。當病毒抗原與抗體特異性結合，則加入的定量補體被結合，指示系統因無補體而不發生溶血，是為陽性結果。否則出現溶血為陰性結果。2．中和試驗：是病毒在細胞培養中或在活體內被特異性抗體中和，使病毒失去感染性的一種試驗。3．血凝抑制試驗：許多病毒，在一定溫度條件下，能夠凝集一定種類動物（雞、鴿子、豚鼠、人類）的紅細胞，稱為血凝現象。這種現象能被特異性抗體所抑制，稱為血凝抑制試驗。4．間接免疫熒光檢測：實驗體系包括病毒抗原 + 抗體 + 熒光素標記的抗抗體，在熒光顯微鏡下觀察熒光的強弱。[基本要點] 對于各種血清學方法，都應注意學習其原理、方法和檢測意義。可用已知抗體診斷未知病毒抗原，也可用已知病毒抗原檢則相應抗體的滴度。1．補體結合抗體出現早、消失快，可用于早期診斷，也可用已知抗體鑒定分離的病毒及其型別。2．中和試驗可用來檢查患病后或人工免疫后，機體血清中抗體增長情況，以便于輔助診斷和免疫效果評價；也可用已知抗體鑒定病毒。試驗中所用病毒量為100TCID50。3．血凝抑制試驗常用于正粘病毒和副粘病毒感染的診斷和病毒亞型鑒定及抗原變異的檢測。4．熒光試驗方法包括直接法和間接法，臨床血清學診斷常用間接法。5．酶聯免疫吸附測定的基本原理同免疫熒光檢測，只是標記物為辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶。第三節 病毒感染早期診斷[授課學時] 2學時 [學習重點] 早期診斷的一些常用方法。[基本概念]1．快速特異性診斷：指從患者采集分泌物、滲出物、刮取物、血液、腦脊液、活檢組織等，盡快地在3～4h內或者當天查出病毒抗原、核酸等。 [基本要點]病毒分離鑒定和血清學診斷一般需要較長時間才能判斷結果。早期診斷主要是應用具有高度特異敏感的快速診斷方