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第二章--樣品預處理方法(編輯修改稿)

2025-09-05 15:40 本頁面

　

【文章內容簡介】萃取小柱固相萃取（ SPE）技術 ? 固相萃取技術是基于同液相色譜同樣技術開發(fā)的產(chǎn)品，分離復雜樣品中的不同組份 ? 固相萃取技術（ SPE）的重要性 ? 實驗室中 60~80%的成本及工作量在樣品制備上 ?加速樣品的制備時間 ?降低樣品前處理的成本 ?提高分析的準確性及回收率 ?更容易自動化 ?減少樣品處理步驟 ?降低對不穩(wěn)定樣品的影響 ?提高安全性 SPE小柱 ? SPE 小柱的應用領域 ? 除去雜質及干擾組份 ? 把樣品分成不同極性的組進行分析 ? 富集微量的組份 ? SPE 小柱的主要種類 ? 反相 ? 正相 ? 離子交換 SPE小柱的種類反相正相離子交換固定相非極性極性帶電荷溶劑從極性到非極性從非極性到極性 PH或離子強度（低到高） ? 根據(jù) SPE小柱的種類及樣品的性質，選洗脫強度不同的溶劑把樣品分開 ? 讓樣品的各組份在固定相上吸附、解吸附，或不與固定相作用第一步：讓所感興趣的樣品留在小柱，雜質通過小柱第二步：用不同極性的溶劑，使所感興趣的樣品通過小柱各種 SPE小柱（一） ? 正相 ? 使用方法 ?可先用 6到 10倍柱體積的非極性溶劑平衡 ?加入樣品 ?用非極性溶劑洗脫不想要的組份 ?用極性溶劑洗脫第一組感興趣的組份 ?用極性更強的溶劑洗脫剩下的感興趣的組份 ? 在不同條件下，有些填料可以用于反相或離子交換，如 ∶ NH2 / CN ? 確認回收率各種 SPE小柱（二） ? 反相 ? 使用方法 ?可先用 6到 10倍柱體積的甲醇或乙腈活化，再用 6到 10倍柱體積的水或緩沖液平衡，不要讓小柱干了 ?樣品溶解在強一些極性的溶劑中 ?加入樣品 ?用強極性溶劑洗脫不想要的組份 ?用極性弱些的溶劑洗脫第一組感興趣的組份 ?用極性更弱的溶劑洗脫剩下的感興趣的組份 ? 確認回收率各種 SPE小柱（三） ? 離子交換 ? 使用方法 ?可先用 6到 10倍柱體積的去離子水或弱緩沖液平衡， ?樣品溶解在去離子水或弱緩沖液中 ?加入樣品 ?用弱緩沖液洗脫不想要的組份 ?用強一些緩沖液（改變 pH或離子強度）洗脫第一組感興趣的組份 ?用更強的緩沖液洗脫剩下的感興趣的組份 ? 確認回收率 SPE小柱的方法開發(fā) ? SPE方法開發(fā)的幾個關鍵因素 ? 文獻查閱 ? 流速控制 ?同色譜理論：以 10ml/min潤濕小柱， 1～5ml/min加載樣品 ?離子交換填料或固定相少于 100mg的小柱，用更低的流速加載樣品 ?以 1～ 5ml/min流速洗脫樣品 ? 注意樣品本底的不同 ? 注意載荷量及加樣方式四、生物樣品的制備技術植物：花、葉、莖、根、果實體液：尿、血液、唾液、胃液、膽汁等生物樣品動物毛發(fā) 肌肉組織器官：心、肝、肺、腦、胃、腎、胰腺等微生物 ?生物樣品中需分析的組分：植物體內 — 營養(yǎng)成分、農(nóng)藥殘留等動物體內 — 藥物及代謝產(chǎn)物、糖類及有關化合物、脂類、維生素、核甘、核甘酸及其衍生物、磷酸酯類化合物、固醇類化合物、氨基酸、多肽、蛋白及其衍生物、某些生物大分子生物樣品中待測組分存在的形式及處理方法 ? 待測組

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