正交試驗法優(yōu)化復方枳實厚樸湯的提取工藝畢業(yè)論文(編輯修改稿)

　

【文章內容簡介】 縮短， II 相時程延長，峰電位數(shù)增加，從而加強小腸運動 [7]。無論是使 IDMEC 的峰電位增高還是 使 MMC 活動相時程延長，均能使平滑肌收縮加強，從而對消化起到一定的促進作用。 對子宮的作用 藥理研究證實枳實能使家兔子宮收縮有力，張力增強，收縮節(jié)律增強，但對小鼠的離體子宮則主要表現(xiàn)為抑制作用，枳實水提醇沉物能興奮離體家兔環(huán)行陰道平滑肌，并能誘發(fā)肌條的節(jié)律性收縮活動或增強原有自發(fā)性收縮肌條的收縮力及收縮頻率 [8]。 對血液流變學的影響 枳實對健康大鼠及血癌模型大鼠均存在明顯的抗血小板聚集及抑制紅細胞聚集的作用，其作用優(yōu)于阿司匹林，并呈明顯的量效關系。枳實活血化瘀作用可能是通過對血小板聚集 、紅細胞聚集的抑制作用達到的，枳實有望作為一種有效的血小板聚集抑制劑在臨床中應用 [9]。 鎮(zhèn)痛作用 枳實的揮發(fā)油不但能夠對胃腸平滑肌產(chǎn)生效應，還能夠對大鼠離體腸平滑肌的收縮呈先興奮后抑制得作用，而且可明顯減少醋酸引起的小鼠扭體反應次數(shù)及自發(fā)活動次數(shù)，并表現(xiàn)出了一定程度的鎮(zhèn)痛和中樞抑制作用 [10]。 抗菌作用 枳實揮發(fā)油對耐藥金葡萄球菌存在抑制作用，檸檬烯則有鎮(zhèn)咳、祛痰、抗菌的作用 。芳樟醇則有防腐抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)靜的作用 [11]。 抗氧化作用 研究表明枳實提取物能夠有效地清除羥自由基、 超氧陰離子自由基、DPPH 自由基，還具有抑制脂質過氧化作用，具有進一步研究和開發(fā)的價值 [12]。 護肝和降血糖作用 枳實提取物治療組與糖尿病模型組比較，血糖水平明顯降低，谷胱甘肽含量顯著增加，谷胱甘肽過氧化物酶活性、丙二醛和 NO 含量顯著減小。超過氧化物歧化酶活性有所增強。光鏡下枳實提取物治療組肝組織細胞損傷較糖尿病組降低，顯示具有增強肝臟的抗氧化的能力，降低肝細胞損傷的作用，同時高劑量時能顯著降低血糖 [13]。 抗休克作用 低濃度枳實提取液，使豚鼠心室肌細胞 L 型鈣電流濃度依賴性地增 強，對鈣通道具有促進開放的作用。高濃度枳實提取液，可對心室肌細胞 L 型鈣電流具有抑制作用，并有抑制鈣通道開放的作用，臨床應用枳實提取液用于治療各種休克，江西中醫(yī)學院畢業(yè)論文 10 包括急性心肌梗塞心源性休克、感染性休克等均獲得較好的療效 [14]。 其他作用 枳實還具有抗?jié)冏饔谩⒗懽饔?、利尿作用、抗過敏作用等。 2．化學成分 枳實所含化學成分較為復雜，主要含有 3 種類型的有效成分： ①生物堿類成分 :上世紀 70 年代我國學者從枳實中分離得到兩種子選有升壓作用的有機堿辛費林和 N 甲基酪胺 [15]。 ②黃酮苷類 :主要在橙 皮苷、新橙皮苷和柚皮苷桔蜜黃素 , 3, 5, 6, 7, 8, 2, 3, 4 甲氧基黃酮等 [16]。 ③揮發(fā)油成分枳實揮發(fā)油成分以萜類經(jīng)合物中的單萜為主，分別是檸檬烯、芳樟醇、異松香烯等 [17]，主要為檸檬烯 [18]。 此外 ，枳實中還含有內酯類成分，為檸檬苦素此外，枳實中還含有內酯類成分，為檸檬苦素。有機酸類成分主要為檸檬酸酸和蘋果酸，并含根皮酸 β D 葡萄糖苷、糖類、維生素、鈣、磷、鐵等。國內外對枳實類藥材的化學成分定量研究主要集中在辛弗林和 N 藥材的化學成發(fā)定量研究主要集中在辛弗林和 N 甲基酪受 酸、橙皮苷、總黃酮含量及揮發(fā)油的測定 [19]。 3. 提取工藝 揮發(fā)油的提取 方法 1 取 2kg枳實粗粉 ， 加入蒸餾器中 ,以水浸泡后 ， 直接加熱蒸餾 ， 直到無油餾出 ，停止蒸餾 ， 冷卻 ， 分層 ， 收集油層將油相脫膠 ， 脫色后得到淡黃色揮發(fā)油 29g。 方法 2 將枳實粗粉置于有孔隔層板網(wǎng)上 ， 加熱底部的水產(chǎn)生蒸 汽， 揮發(fā)油隨水蒸氣蒸餾出。揮發(fā)油是一類具有芳香氣味的油狀液體 ， 主要有萜類化合物、芳香族化合物、脂肪族化合物組成 ， 常呈無色或淡黃色液體 ， 不溶于水 ， 可隨水蒸氣而蒸餾出 [19]。 果膠的提取 提取揮發(fā)油后的渣以熱水提取，果膠、辛弗林、柚皮苷、新橙皮苷溶于熱水而被提取出?？疾炝怂挠昧?、提取時間、提取溫度對 4種成分提取得率的影響 ,可知 20倍量 (V/m)的水在 90℃下提取 15h,4種成分可最大限度地被提取出。水液調 pH = 2后以 732型陽離子交換樹脂吸附，用水洗脫出不被樹脂吸附的果膠、柚皮苷、新橙皮苷，而辛弗林成鹽后形成陽離子被樹脂吸附從而達到分離，水洗脫液濃縮，醇沉，將柚皮苷、新橙皮苷溶于江西中醫(yī)學院畢業(yè)論文 11 醇液而沉淀出果膠。果膠分離中主要考察濃縮液的密度、醇的濃度及醇的用量。分別取50g枳實渣以正交試驗進行考察， 可知最佳工藝 :水液質量濃度 16g/mL，醇沉質量分數(shù)80%，乙醇用量 20倍 (V/m )。粗果膠以水熱溶后加入 5%活性炭在 80℃下保溫 30min，趁熱過濾，濾液濃縮至干，真空干燥粉碎得白色膠粉，稱重 76g，測得含量為 93%質量分數(shù) [20] 。 柚皮苷的提取 。醇液濃縮回收乙醇得浸膏，利用柚皮苷和新橙皮苷在不同酸度下的溶解性差異將 2者分離。將 50 g枳實渣的醇浸膏以澄清石灰水溶解、過濾 ,濾液以梯度酸沉淀將其分離，鞣質類成分與鈣離子螯合。主要考察了石灰水的堿度、用量 及剩余殘渣的量。殘渣的量不變說明浸膏中能被堿水溶出的成分已全部溶出 ,因此以殘渣的量研究石灰水溶解的最佳工藝，以 pH =14的澄清石灰水 8倍量 (V /m)溶解可很好地溶解有效成分而去除雜質。得到的淡黃色結晶物過濾，固形物以熱乙醇溶解后，加入少量活性炭在 60℃保溫 30min，趁熱過濾，濾液澄清透明，減壓濃縮至小體積，結晶 ,得類白色結晶 26 g，測其含量為 %[21]。 新橙皮苷提取 將上一步中的沉淀出柚皮苷的液體再次調酸堿度 ， 析出黃色新橙皮苷 ， 結晶物以乙醇溶解 ， 加入少量活性炭 ， 在 60℃ 保溫 30m in后趁熱過濾 ， 濾液濃壓濃縮至適當體積 ， 靜置析出類白色結晶新橙皮苷為白色針狀晶體由稀乙醇或稀醋酸結晶 ， 熔點 236 ～ 237℃ ，加 2%鹽酸或硫酸水解產(chǎn)生桔皮素。新橙皮苷也屬于黃酮類化合物 ,在橙皮苷的提取中也隨之提出 ,但與柚皮苷性質相似 ， 調酸后游離但無沉淀析出 ， 可能是因為含量較低的緣故 [22]。 辛弗林的提取 中的以 732型強酸性陽離子樹脂吸附辛弗林 ， 以氨水洗脫 ， 薄層色譜 TLC 檢查 ，直至無辛弗林洗出時為止 ， 將含辛弗林的成分濃縮、結晶、重結晶 ,得白色晶物 g,含量 % 。 辛弗林屬麻黃堿類 ， 易溶于酸水中 ， 因此在果膠的提取中與果膠同時提出 ， 由于分子結構中存在酚羥基和氨基 ， 具有兩性 ， 可與堿成鹽 ， 而游離的辛弗林不溶于水 ， 易溶于有機溶劑 ， 成鹽后則易溶于水而難溶于有機溶劑 ， 在離子交換樹脂層析時易發(fā)生消旋。在辛弗林的提取中也可以分離出鯨魚胺生物堿 [23]。 橙皮苷的提取 枳實水提后的渣干燥后分別取 50g以飽和石灰水提取 過濾提取液 以 10%鹽酸調至酸性后沉淀 ， 過濾沉淀物 ， 水洗至中性再將沉淀物溶于