植化方法學ppt課件-資料下載頁

　　

【正文】 薄層板暴露在紫外光下十分鐘 ， 由于催化氧化成牦牛兒酸 。 然后再將第二塊板滴加樣品檸檬醛在其上復加 1滴 10％ 氫化鋰鋁的乙醚溶液 ， 則檸檬醛被還原成牦牛兒醇 。 C O O HU VH 2 O 2 L i A l H 4C H OC H 2 O HH 雖然反應薄層在有的時候于薄層板上反應不能進行完全 ， 以致于有原始樣品與反應生成產物混合存在 。 但是許多情況下能夠通過這些有機的特殊反應只消耗 未知物極微量的樣品 （ 對天然產物尤其重要 ） 卻提供了大量的有關結構鑒別的情報 ， 操作又簡單是值得廣泛采用的 。 一 、 氧化 氧化反應所使用的氧化劑也有許多種 ， 操作方法也略有不同；有的將薄板上的樣品滴加一滴飽和的鉻酐 （ CrO3） 冰醋酸溶液進行氧化 。 有些樣品能用 30％ H2O2在 UV光下暴露十分鐘來氧化 ， 也可用臭氧 （Ozone） 處理薄層；將樣品滴加在薄層上， 再將有樣品的薄板放到內含 1015％ 臭氧的干燥器中 1520分鐘 ， 取出薄板放在空氣中除盡 O3， 再展開薄層 。 二 、 還原： 常用 LiAlH4來還原樣品；方法是加入一滴 10％ 氫化鋰鋁溶液來進行 ， 溶液試劑不要太濃 ， 以防試劑本身帶來的潮氣使反應太猛烈 。 用此試劑進行酯的還原需先在小試管或毛細管中進行；而后再將反應物滴加在薄板上 。 進行酯類的還原反應更重要的還原試劑是用異丙醇鋁來實現 。 三 、 脫水 萜醇類可以用加入濃硫酸到樣品的方法變成烴類 。 然后用環已烷展開 。 因為含氧的化合物極性大不能被環已烷展開 ， 而烴類可以從反應區域中被展開加以區別 。 氧氯化磷及無水吡啶 鉻酸也可作為 TLC脫水劑 ， 但需要先在小試管中進行然后將反應產物滴加在 TLC展開之 。 四 、 水解 薄層板放進充滿濃鹽酸蒸氣的槽內加熱 100℃ 1530min， 進行水解 。 除利用酸水解外 ， 也可以在 TLC上進行堿水解 ， 常用 5％ KOH和 2N NaOH加熱進行 。 在中草藥的研究中最重要的是還是苷類 （ 皂苷及黃酮苷等等 ） 的水解 ，以便鑒定水解后產生的糖及苷元 。 1． 純苷的鑒定 所要鑒定的苷若已分離成單一化合物 ， 而且量很少時 ， 用下述方法是比較有用的 。 將樣品的乙醇 （ 或甲醇 ） 溶液點在硅膠薄層板 ， 點樣量為 20100μg ， 取一個硬質玻璃缸， 缸中加入約 1cm厚的濃鹽酸 ， 并于 100C加熱 30分鐘 ， 使缸中充滿鹽酸蒸氣 ， 再將已載樣的薄層板迅速地放入缸內的玻璃架上 （ 勿接觸液面） 然后繼續在 100C加熱 20分鐘 ， 使苷在鹽酸蒸氣中水解 ， 取出薄層 ， 用吹風機吹盡鹽酸 ， 薄層就可以用不同展開劑鑒定水解生成的糖 。 水解條件： 室溫鹽酸蒸氣中放置 4小時 展開系統 ： CHCl3： MeOH： H2O 6： 4： 1（ 均相） 顯色劑： 10% H2SO4乙醇液 2． 混合苷的鑒定 一般用適當的展開劑將混合苷展開分離后 ， 再于薄層上用鹽酸氣將苷水解 ， 鑒定水解生成的糖 。 例如：將報春花屬植物根的乙醇或甲醇提出物或粗混合苷于硅膠薄層 （ 20x20cm） 的一個角上點樣 ， 用二氯乙烷 醋酸 甲醇 水 （ 10： 5： 3： 2） 展開 ， 分出五個皂苷點 ， 同上法用鹽酸蒸氣水解 ， 吹去鹽酸， 與第一次展開成 90176。 角的方向再用乙酸乙酯 甲醇 乙酸 水 （ i2： 3： 3： 2） 展開并顯色 ， 檢出有六種糖 。 第一次展開 第二次展開 五 、 衍生物的制備 用三氟醋酸酐直接在薄層上進行甾體上羥基的 酯化 。 用 5％ K2C03／ Me2CO（ 含微量水 ） 處理薄層 ， 令其干燥后用 50％ CH3I的丙酮溶液噴灑 ， 并放在用 CH3I ： Me2CO （ 1： 4）混合蒸氣飽和的槽內 50℃ 3個小時進行有機酸的 甲基化 。 硝化 wi1k等硝化多環烴類是將硅膠薄層上滴加樣品后放到一個含有五氧化二磷的槽內 ， 并且在槽內滴加 23ml濃 HNO3， 硝化完全需 10分鐘 。 Po1euk和 Ma， 用噴灑 90％ HNO3（ 應該避免過量酸 ） 在薄層上直接將化合物硝化 ， 噴灑試劑的板放到 105℃ 加熱 30分鐘以上 。 有很多衍生物可以在薄層上直接反應制備 ， 再展開層析譜以便進一步鑒定 。例如加入一滴苯肼到化合物樣品上可以把酮類制備成苯腙類化合物 。 應用 ％ 吉拉德試劑 （ Girard’s）[(CH3)3N+CH2CONHNH2]溶于 10％ （ v／ v）KHAc／ 甲醇溶液 ， 滴加在薄板上將羰基化合物制備成衍生物 。 甾酮類化合物的衍生物制備就是一例 。 六 、 混合反應 Bierl等在薄層上用磷酸反應來測定一個未知物中是否有環氧化物（ epoxides） 存在，并且進而能有助于測定其環氧化物的構型。 其方法是：在硅膠板上點加 10％ 磷酸水溶液的位置滴加未知混合物 ， 然后干燥 ， 另加入 5ul酸并令其干燥 20分鐘 ， 另取樣品2010Oug點加在沒有用酸處理的位置上 ，再將板干燥 1小時 ， 將板用乙醚 環已烷適 宜的比例展開 ， 環氧化物反應后的產物具有更大的極性與原來樣品中環氧化物對比它保留在靠近原點的位置上 。 如果測定其構型 ， 除操作上相同以外要取樣品量在 2535ug， 僅僅控制反應在 5分鐘。 順式環氧化物在此時間內反應完全斷裂或幾乎完全裂解 ， 而反式環氧化物在此反應時間內 （ 5分鐘 ） 不裂解或者僅僅是部分反應或是微量的反應 。