微生物實驗室病原微生物評估報告-資料下載頁

　　

【正文】 去修理、維護前，要按照相關的規定消毒；在離開設施轉移前，要按照相關的規定打包運輸。（2）安全設備正確使用和保養生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護設施、或物理遏制裝置。確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程，包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。涉及高濃度或大體積的傳染源時，若選用密封轉頭或帶安全罩的離心機，若轉頭或安全罩僅在生物安全柜中打開，則可在開放實驗室內離心。當必須在生物安全柜外處理標本時，需采取面部保護措施（跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置），以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。在實驗室內，必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實驗室區域時，防護服必須留在實驗室內。防護服可以在實驗室內處理，也可以在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。可能接觸潛在傳染源、被污染的表面或設備時，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重復使用，不能用于接觸“潔凈”的表面（鍵盤、電話等），也不應當戴著到實驗室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套后，要洗手。假結核棒狀桿菌的生物危害評估報告一、細菌的傳播與致病 假結核棒狀桿菌廣泛分布于自然界的水和土壤中，是一種條件致病菌。主要引起家畜（羊、馬）的慢性淋巴淋巴管炎，偶爾也會引起人的淋巴結炎、肺炎等疾病。二、細菌的生物學特性 假結核棒狀桿菌屬于棒狀桿菌屬，是一種兼性厭氧，沒有芽胞、沒有莢膜，抗酸陰性的革蘭陽性桿菌。細菌末端膨大呈棒狀，菌體有時成單或成雙。有時菌體染色不均勻呈柵欄狀排列。它沒有動力，但觸酶呈陽性、尿素陽性。 所使用的培養基包括血和亞碲酸鉀，比如Hoyle 亞碲酸鹽培養基是一種很好的選擇性鑒別培養基。假結核棒狀桿菌可以在血平板上產生輕微的溶血。三、細菌的實驗室檢查及其它檢查：革蘭染色呈革蘭陽性桿菌、多型性、錐形或棒狀的細菌末端略有彎曲。菌體單個或成雙，時常呈“v”型。有些菌體染色微弱或不均勻，呈珠狀。:血平板－皮膚拭子培養：510％CO2 3537℃ 4048h；喉拭子培養：厭氧，3537℃ 1624h；菌落周圍有微小的B溶血環；Hoyle 亞碲酸鹽培養基： 3537℃ 1648h：灰色/黑色,非常干燥的透明菌落。：硝酸鹽 陰性；尿素 陽性；4. PCR 是一種快速的試驗，可以在接受到菌株后34 小時內完成檢測。，需要結合臨床癥狀考慮結果。四、細菌的生物安全防護 根據《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關規定，人間傳播的假結核棒狀桿菌屬于三類，BSL2。實驗室在處理過程中可能會產生氣溶膠，所以懷疑假結核棒狀桿菌的菌株必須在生物安全柜內處理。對于尿素試驗認為使用尿素斜面比使用尿素液體培養基安全。在運送時還應當遵守郵政局的危險品運送手冊，如果以上的初步試驗提示該菌株是假結核棒狀桿菌,需立即通知上級相關單位,并根據實驗室安全手冊進行隔離。志賀氏菌屬的生物危害評估報告一、細菌的傳播與致病志賀菌屬是主要的腸道病原菌之一，也是引起人類細菌性痢疾的病原體。本屬細菌分布于全世界,是炎癥性痢疾的典型病原菌,很多地區5%~10%的腹瀉性疾病是由該菌屬所致。弗氏志賀菌和宋內志賀菌比鮑氏志賀菌和毒力特別強的痢疾志賀菌分布更廣。在英國臨床實驗室，大多數感染者為微生物學工作者。感染者和恢復期帶菌者的排泄物是傳染源,經糞口途徑直接傳播,經污染的食物或物體可間接傳播。蒼蠅可作為機械性媒介,水源性傳播不常見。衛生條件差的擁擠人群中最易發生流行,流行區的幼兒志賀菌病特別常見,而成人得病較輕。恢復期和亞臨床帶菌者是重要傳染源,但真正的長期帶菌者罕見。感染很少或不誘導產生免疫性,因此同一菌種的再感染是可能的。志賀菌可穿入低位腸段的粘膜,引起粘液分泌,充血,白細胞浸潤,水腫,并常有表淺粘膜潰瘍。志賀菌感染相關的水瀉由內毒素介導所致,因這種內毒素可引起腸道分泌增多。由志賀菌感染所導致的癥狀包括：（1）急性細菌性痢疾 經潛伏期1~4日,幼兒的起病突然,表現為發熱,煩躁不安,嗜睡,厭食,惡心或嘔吐,腹瀉,腹痛和腹脹以及里急后重。3日內大便中出現血液,≥20次/d,體重下降和失水嚴重。若不治療,患兒可在12日內死亡；若患兒存活,非粘液性腹瀉,急于排便,系軟便或含有粘液,膿及常有血液的水瀉。嚴重的里急后重可造成直腸脫垂和大便失禁。成人患病常可自愈：輕者4~8日,重者3~6周。伴有循環虛脫的明顯脫水和電解質喪失及死亡主要發生于＜2歲的嬰兒和衰弱的成人；（2）慢性細菌性痢疾 主要是因急性菌痢治療不徹底，造成反復發作遷延不愈，病程超過兩個月以上者；若是有病史、無癥狀，結腸鏡檢或糞便培養陽性者稱為隱匿型菌痢，在流行病學上亦具有重要的意義；（3）攜帶者 是指恢復期帶菌、慢性帶菌者和健康帶菌者三種類型，尤其是健康帶菌者是主要的傳染源。除此以外，還可發生繼發性細菌感染,特別是衰弱和脫水的病人。,但可有中毒性神經炎,關節炎,心肌炎和罕見的腸穿孔。小兒志賀菌病可并發溶血性尿毒癥綜合征。本病不會變成慢性,也不會成為潰瘍性結腸炎的病因學因素。但有HLAB27基因型的病人在志賀菌病后常常比較容易發生關節炎或明顯的Reiter綜合征。二、細菌的生物學特性志賀菌（Shigella）隸屬于腸桿菌科，分為A,B,C,D4個亞群——A群痢疾志賀菌、B群福氏志賀菌、C群鮑特志賀菌和D群宋內志賀菌，而各亞群又可分各種血清決定型。它們均為革蘭氏陰性桿菌，菌體短小、無芽胞無鞭毛，有菌毛，在胞質中存在著大小兩種質粒，與該菌的侵襲性和耐藥性有關。志賀菌為兼性厭氧菌，對理化因素的抵抗力較弱，對酸敏感，在1%的石炭酸中15~30min可被殺死，因此運輸時必須采用含有緩沖劑的培養基。它們最適的生長溫度為37℃，~，對營養的要求不高，可在普通培養基上生長。在腸道培養基上可形成不發酵乳糖的無色半透明菌落，而宋內志賀菌還常形成粗糙型的菌落，也因此可發生SR變異。志賀菌屬沒有H抗原，但有O抗原以及部分菌種的K抗原。O抗原可耐熱，100℃60min不被破壞，它是分類的依據，具有群特異性以及型特異性兩種抗原。正是依據O抗原的不同以及生化反應的結果將志賀菌分成了4個血清群和32個血清型；而K抗原存在于A群和C群的全部菌型以及B群種的部分菌種中，不耐熱，對分類無意義，但它的存在將阻斷O抗原與相應抗血清的凝集作用，故可先以100℃60min破壞之。志賀菌的致病因素主要有：；：各群志賀菌都能形成強烈的內毒素，其作用機制包括：破壞腸粘膜上皮,造成粘膜下層炎癥,并有毛細血管血栓形成,以致壞死,脫落,形成潰瘍,出現粘液膿血便；使腸壁通透性增高,促進毒素吸收,引起一系列毒血癥的癥狀,如發熱,神志障礙,甚至中毒性休克；作用于腸壁植物神經,使腸蠕動失調并痙攣,尤以直腸括約肌受累明顯,因而發生腹痛,腹瀉,里急后重等癥狀；：A群志賀菌Ⅰ型和Ⅱ型能產生志賀外毒素(ST), ST能引起Vero細胞病變,故也稱Vero毒素(VT)。 A亞單位鏈為毒性部分能抑制蛋白質的合成 。ST具有細胞毒素,腸毒素和神經毒素3種生物學活性：腸毒素性，；細胞毒性，它可以阻止小腸上皮細胞對糖和氨基酸的吸收；神經毒性，在痢疾志賀菌引起的重癥感染者可作用于中樞神經系統,造成昏迷或腦膜炎 ；ST在體外還可加重對血管內皮細胞的損傷。ST和內毒素的持續存在的聯合作用可能與志賀菌感染的溶血性尿毒綜合征等并發癥有關。二、細菌的實驗室檢查及其它檢查主要根據暴露史、臨床特征與實驗室檢查診斷。急性期有發熱、腹痛、腹瀉、里急后重及黏液膿血便，左下腹明顯壓痛。糞便鏡檢有多數白細胞或膿細胞及紅細胞即可診斷。確診則依賴于糞便培養出痢疾桿菌。　急性期白細胞總數輕至中度增高，多在（10~20）109/L，中性粒細胞亦增高。可用拭子從潰瘍處取材作涂片檢查或培養。這些拭子及大便標本均應立即鏡檢及培養，標本接種于腸道桿菌選擇培養基或鑒別培養基上,℃培養1824h,取可疑菌落進行生化反應和血清鑒定,以確定菌群和菌型；如不能立即培養,可放于30%甘油緩沖鹽水保存液中。　外觀多為黏液膿血便，無糞質。鏡檢有大量膿細胞或白細胞及紅細胞，如有巨噬細胞有助于診斷。糞便培養病原學檢查有利于確診，同時可做藥物敏感試驗以指導臨床合理選用抗菌藥物治療。糞便免疫學檢查與細菌培養比較具有早期快速診斷的優點，但由于糞便中抗原成分復雜，易出現假陽性，故目前臨床上尚未廣泛應用。,這點可鑒別細菌性和阿米巴痢疾(因阿米巴可破壞白細胞)。：將受試菌 37℃1824h 制備菌液(109/ml) 接種豚鼠結膜：發生炎癥,則Senery試驗陽性,說明受試菌有毒力,在顯微鏡觀察有無凝集現象。,培育48h后發現帶有熒光的菌球為陽性。,測定病人糞便中或增菌培養液中細菌及其可溶性抗原。，快速、敏感，可提高45%志賀菌標本的檢出率，目前尚未廣泛應用。、細菌性胃腸型食物中毒、其它病原菌引起的腸道感染、急性壞死性出血性腸炎及腸套疊相鑒別。三、細菌的防治首先是防治：1 早期發現,早期隔離和早期徹底治療病人外,查出帶菌者2 切斷傳染途徑, 操作食品前應徹底洗手。臟衣和床單應放在帶蓋的桶內用肥皂水浸泡然后再煮沸消毒。房屋應使用蚊帳紗和屏障。對病人和帶菌者應采取相應的隔離措施(特別是對糞便的隔離)。此外還包括加強水源管理及食品衛生監督等3 口服菌苗預防 有鏈霉素依賴 (Sd) 株及口服重組活菌苗。Sd株口服后,因腸道無鏈霉素它不生長也不立即死亡,而產生SIgA,但只對同型菌的再感染有保護作用,故使用此菌苗時應考慮到當地常見流行菌型。重組活菌苗由多個型別 (或種型) 的免疫原組成,具有廣譜保護作用 ,已開始生產。在治療方面：　腹瀉常引起等張性脫水(鹽和水的丟失相等)。無腹瀉的痢疾不會導致過多失水特別是氣候炎熱地區的嬰兒,通過出汗和呼吸的失水再加上嚴重腹瀉,可導致高張性脫水。過早地應用高滲性液體(牛奶,鼻飼、自制電解質混合液)可引起高張性損害,包括抽搐。　在決定應用抗生素時,應考慮到疾病的嚴重程度,病人的年齡、衛生狀況,進一步傳播的可能性和造成細菌耐抗生素的可能性等因素。此外,早期用適當的可吸收的抗菌藥物治療,可明顯減輕癥狀和減少志賀菌的排出：對兒童,TMPSMX中的TMP成分4mg/kg每12小時1次為首選方案；對成人,用雙倍加強片(TMP320mg)每12小時1次。成人還可用諾氟沙星400mg口服每日2次或環丙沙星500mg口服每日2次。很多志賀菌株可能對氨芐青霉素和四環素耐藥。3. 其他治療　熱水袋有助于緩解腹部不適,因為它們可引起腸道郁滯,延長發熱期,并使大便持續排菌。四、細菌的生物安全防護根據《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關規定，人間傳播的微生物名錄（待頒布）志賀菌屬于三類、BSL2。相關的防護事宜包括：（1）操作要求實驗時，未經實驗室主任同意，限制或禁止進入實驗室。不許在工作區域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應存放在工作區域以外專用櫥柜或冰箱中。所有的操作過程應盡量細心，避免產生和濺出氣溶膠。對于污染的銳器，必須時刻保持高度的警惕，包括針、注射器、玻片、加樣器等。注射和吸取感染材料時，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體的）。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進行人工處理，要不將之小心放入不會被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，轉移至處理區消毒，最好高壓殺菌。打碎的器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前，應按照相關的規定進行消毒。所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前，均應使用可行的消毒方法進行消毒，如高壓滅菌。轉移到就近實驗室消毒的物料應置于耐用、防漏容器內，密封運出實驗室。離開該系統進行消毒的物料，在轉移前應包裝，其包裝應符合有關的法規。濺出或偶然事件中，明顯暴露于傳染源時，要立即向實驗室主任報告。進行適當的醫學評估、觀察、治療，保留書面記錄。按日常程序、在有關傳染源的工作結束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染源污染后，實驗室設備和工作臺面應當使用有效的消毒劑消毒。污染的設備在送去修理、維護前，要按照相關的規定消毒；在離開設施轉移前，要按照相關的規定打包運輸。（2）安全設備正確使用和保養生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護設施、或物理遏制裝置。確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程，包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。涉及高濃度或大體積的傳染源時，若選用密封轉頭或帶安全罩的離心機，若轉頭或安全罩僅在生物安全柜中打開，則可在開放實驗室內離心。當必須在生物安全柜外處理標本時，需采取面部保護措施（跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置），以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。在實驗室內，必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實驗室區域時，防護服必須留在實驗室內。防護服可以在實驗室內處理，也可以在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。可能接觸潛在傳染源、被污染的表面或設備時，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重復使用，不能用于接觸“潔凈”的表面（鍵盤、電話等），也不應當戴著到實驗室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套后，要洗手。 陰溝腸桿菌的生物危害評估報告一、細菌的傳播與致病陰溝腸桿菌廣泛分布于環境中，土壤、水、污水、腐爛蔬菜和乳制品亦可發現，在陰溝污水中含量可高達10７/g。它是存在于人和動物腸道內的條件致病菌，易致泌尿道和呼吸道感染，它也可發生傷口感染、菌血癥和敗血癥，尤其易發于下列危險因素的患者：如長期住院（特別是在ICU）、患嚴重疾病、長期應用廣譜抗生素、進行侵襲性操作、應用放療或化療及免疫抵制劑等患者。據報道：在重癥監護病房（ICU）的革蘭陰性菌感染中，腸桿菌屬細菌的感染僅次于銅綠假單胞菌，居第二位。二、細菌的生物學特性陰溝腸桿菌屬于腸