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2026-04-15 22:12本頁面

　　

【正文】方不表達或很少表達，依靠單親的性狀傳遞某種遺傳性狀的現象8. 印跡的特點1) 正反交結果不一致2) 印跡即為抑制，母本印跡父本表達；父本印跡母本表達3) 印跡可發生在一個基因上，一條染色體區段上，整條染色體上甚至全部來源的單條染色體10. 印跡的階段：建立階段；維持階段；重建階段11. 核外遺傳的特點：子代獲得母體基因，表現與母體相同的性狀12. 核外遺傳：研究的是細胞核染色體以外的遺傳物質的結構，功能及遺傳信息傳遞的知識體系13. 核外基因遺傳的特征：，閉合，環狀分子，分子量小第十一章 1. 基因工程是指在分子水平上采取工程建設方式，按照預先設計的藍圖，借助于實驗室技術將某種生物的基因或基因組轉移到另一種生物中去，使后者獲得新遺傳性狀的一門技術。:手術刀－限制性核酸內切酶、核酸外切酶。縫紉機－連接酶。復印機－ DNA聚合酶、逆轉錄酶：目的基因的獲得。目的基因與載體的連接成重組DNA分子。重組DNA分子導入受體細胞。篩選重組克隆。基因表達與產物分離，是一類能識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列并具有專一切割位點的脫氧核糖核酸水解酶。類別反應必須因子專一性活性 I型S腺苷基蛋氨酸，ATP，Mg2+識別部位和切點不同，無特定切割位點內切甲基化 II型Mg2+特定識別、特定切割、切點在識別序列內部只有限制酶活性III型ATP，Mg2+特定識別，切割隨機，切點在識別序列一側一定距離（3，端726bp）內切甲基化6. II 型限制性內切酶的特性 1）II型限制酶的識別特異性回文識別序列 II型限制酶的識別序列大多是具有雙重對稱結構，或稱回文序列 (Palindromic Sequence) 2）識別特定的核苷酸序列，其長度一般為4－8個核苷酸。 3）具有特定的酶切位點和酶切末端。切割方式有兩種：平頭末端；粘性末端7載體：.將外源 DNA 或基因攜帶入宿主細胞（host cell）的工具稱為載體。8. 基因工程載體的分類：（1）質粒載體（2）噬菌體載體（3）病毒載體（4）人工構建合載體9. 理想質粒載體的基本要求：1）能夠在宿主細胞中大量復制。（2）具有一種或多種限制酶的單一切割位點，并在此位點插入外源DNA片段。（3）分子量盡量小。（4）應包含一個可供選擇的標記基因，這個基因中間可插入一段外源DNA 而失活，導致表型改變。（5）還應包含一個標記基因（性狀），以區別轉化細胞和未轉化細胞。10. 一般質粒的性質：質粒的復制；質粒的拷貝；質粒的不相容性；質粒的宿主范圍；轉移性；遺傳標記；11. 兩個質粒在同一宿主中不能共存的現象稱質粒的不相容性，它是指在第二個質粒導入后，在不涉及 DNA 限制系統時出現的現象。：松馳型質粒: 分子量較小，不具傳遞能力，復制不需要質粒編碼的功能蛋白，完全依賴于宿主提供的半衰期較長的酶(如DNA聚合酶Ⅰ、Ⅲ，依賴于DNA和RNA聚合酶等)來進行。嚴緊型質粒: 復制要求同時表達一個由質粒編碼的蛋白質。多半是一些具有自身傳遞能力的質粒，分子量較大，其DNA復制與宿主染色體復制相偶聯。13. 獲得目的基因的方法：PCR法；分離；化學合成14. PCR與大腸桿菌復制不同之處類別大腸桿菌復制PCR引物RNA單鏈DNA聚合酶DNA聚合酶3TaqDNA聚合酶解鏈方式拓撲異構酶、解旋酶、SSBP共同完成熱變性溫度37度變性、退火、延伸校對功能DNA聚合酶DNA聚合酶1無校對功能的酶，容易引入突變循環一個生命周期一次循環進行，30個循環（23h），形成cDNA文庫(cDNA library) 。克隆某一生物體的所有基因，形成基因組文庫(Genomic library) 。克隆基因片段形成表達文庫（expression library）。: cDNA片斷的集合稱為cDNA文庫(cDNA library)。，用物理方法或酶法將DNA降解成預期大小的片段，然后將這些片段與適當的載體連接，轉入受體細菌或細胞，這樣每一個細菌或細胞接受了含有一個基因組DNA片段與載體連接的重組DNA分子，而且可以繁殖擴增，許多細胞一起組成一個含有基因組各DNA片段克隆的集合體，就稱為基因組DNA文庫。：粘性末端連接法；人工接頭連接；平末端連接法；同聚物加尾連接：（基于堿基互補配對） Southern雜交 DNA片段Northern雜交 RNA原位雜交：將人工分離和修飾過的基因導入到生物體基因組中，由于導入基因的表達，引起生物體的性狀的可遺傳的修飾，稱之為轉基因技術。轉基因動物：是指以實驗方法將外源基因導入動物染色體基因組內穩定整合并能遺傳給后代的一類動物。：顯微注射法：將DNA注射到胚胎的細胞核內，再把注射過DNA的胚胎移植到動物體內，使之發育成正常的幼仔。體細胞核移植方法：先在體外培養的體細胞中進行基因導入并篩選。然后將帶轉基因體細胞移植到去掉細胞核的卵細胞中，生產重構胚胎。3．逆轉錄病毒感染法：最早用來得到轉基因小鼠的方法，利用逆轉錄載體將遺傳信息以RNA分子的形式，在逆轉錄整合酶和逆轉錄基因組末端的特異性核酸序列的作用下，反轉錄并整合到宿主基因組中去，最終得到轉基因小鼠。4．胚胎干細胞法：將轉染的胚胎干細胞注射入受體囊胚腔，可參與嵌合體的形成，將來出生的動物的生殖系統就有可能整合上外源基因，通過雜交繁育得到純合目的基因的個體，即為轉基因動物。：不經過受精過程而獲得動物新個體的方法：不經過生殖細胞而直接由體細胞獲得新的動物個體資料僅供參考，希望大家積極備考，勤學如春起之苗，不見其增日有所長，輟學如磨刀之石，不見其損日有所虧。請相信，天道酬勤。 ————動科124班團支部22

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