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【正文】 rRNA II 類 TAF II 類起始因子 + 轉錄酶 II II類轉錄 TBP TFIID 復合體 mRNA III類 TAF III 類起始因子 + 轉錄酶 III III類轉錄 TFIIIB 復合體 tRNA 真核生物細胞中有三種轉錄方式，分別 由三種 RNA聚合酶（ Ⅰ 、 Ⅱ 和 Ⅲ ） 催化， 與之相對應有三種啟動子： ? RNA聚合酶 Ⅰ 啟動子 Ⅰ 類基因 ? RNA聚合酶 Ⅱ 啟動子 Ⅱ 類基因 ? RNA聚合酶 Ⅲ 啟動子 Ⅲ 類基因 ? 重點介紹 RNA聚合酶 Ⅱ 催化的 mRNA的轉錄 四、真核生物轉錄的起始 Ⅱ 啟動子 啟動子 Ⅱ 最為復雜 ， 它和原核的啟動子有很多不同： （ 1） 有多種元件： TATA框 ， GC框 ， CAAT框等； （ 2） 結構不恒定； （ 3） 它們的位置 、 序列 、 距離和方向都不完全相同； （ 4） 有的存在遠距離的調控元件 ， 如增強子； （ 5） 這些元件常常起到控制轉錄效率和選擇起始位點的作用； （ 6） 不直接和 RNA pol結合； (7) 需多種轉錄因子介入 。 Ⅱ 類基因的啟動子和調控區 TATA框：轉錄起始點上游 30處，又稱 Hogness框。 核心元件 起始子 （ initiator， Inr） ：一般由 Py2CAPy5構成 ， 位于 3～ +5 ， 可能提供 RNA pol Ⅱ 識別 。 CAAT box：轉錄起始點上游 75處 。 Ⅱ 類啟動子 上游元件組成 GC box：轉錄起始點上游 90處。 增強子 （ enhancer） 遠端調控區 減弱子 （ dehancer） 靜息子 （ sisencer） 上游激活序列 （ upstream activating seguences UASs） 起始子（ initiator， Inr） ? 起始點一般沒有同源序列 。 ? mRNA的第一個堿基傾向 A， 包括 A在內的兩側翼由Py組成稱為 起始子 （ initiator,Inr)。 在原核 CAT起始序列也有這種情況 ） 。 ? 一般由 Py2CAPy5構成 。 ? 位于－ 3～ +5處； ? 提供 RNA pol Ⅱ 識別； ? 無論 TATA是否存在 ， Inr起始子的強度和起始位點的選擇都很重要； ? 現已純化了 Inr結合蛋白 。 TATA box TATA框 又稱 Hogness框 ， GoldbergHogness 框 ， 俚語稱為金磚 （ Goldbrick） 。 ? 其一致序列是： T85A97T93A85A63A83A50 ； ? 常在－ 30區左右 ， 相當于原核的－ 10序列 。 其作用是： (1) 選擇正確的轉錄起始位點 ， 保證精確起始 ， 故也稱為 選擇子 （ selector） 。 (2) 影響轉錄的速率 。 上游啟動子元件（ UPE） 表 124 哺乳動物 RNA PolⅡ 上游轉錄因子結合的元件 元件 保守序列 結合 DNA的長度 蛋白質因子 TATAbox TATAAAA ～ 10bp TBP CAAT box GGCCAATCT ～ 22bp CTF/NF1 GC box GGGCGG ～ 20bp SP1 Octamer ATTTGCAT ～ 20bp Oct1 Octamer ATTTGCAT 23bp Oct2 KB GGGACTTTCC ～ 10bp NFKB ATF GTGACGT ～ 20bp ATF B. Lewin:《 GENES》 Ⅵ .1997,Table 增強子 （ enhancer） 增強子 是在 1981年由 Benerji， Rusconi小組和 Chambom 等發現的 ， 又稱 遠上游序列 （ far upstream seguence） 。 其特點是： ① 具有遠距離效應； ② 順式調節； ③ 無物種和基因的特異性； ④ 具有組織的特異性； ⑤ 有相位性 ， 其作用和 DNA的構象有關； ⑥ 有的增強子可以對外部信號產生反應 。 1 晚期區 SV40 無 核小體區 早期區 T 3 T 2 T 1 72bp 7 2 b p 2 1 2 1 2 2 O r i 2 5 0 1 0 7 1 0 3 47 T A T A 0 / 5 2 4 5 G G T G T G G A A A G C C G C C C 圖 1 2 S V 4 0 復制起始中的增強子 2.Ⅱ 型啟動子的轉錄因子 ? RNA聚合酶 Ⅱ 自身不能起始轉錄，必須在其他輔助因子 （轉錄因子）的作用下才能轉錄，酶與其他輔助因子組 成一個基礎轉錄裝置，起始 Ⅱ 類基因的轉錄； ? 轉錄過程需要很多的轉錄因子參與，他們按一定順序與 DNA結合形成復合物； ? 轉錄因子均為分子量大小不等的蛋白因子； ? 轉錄起始復合物形成的基本過程為 TBP及 TAFS先與 DNA的 TATA框附近區域結合，而后依次為 TFIIA、 TFIIB、 TFIIF、RNA聚合酶及 TFIIE。 polⅡ 的轉錄起始 TBP 轉錄復合體 TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE 五、轉錄終止 ? 轉錄酶 I （ rRNA）的轉錄終止 不論是從基因啟動子還是從間隔區啟動子轉錄，終止子都是相同的。終止子中有 Sal1 位點（稱為 Sal box），能與 TTF1 蛋白結合，使轉錄酶 I 不能通過，從而造成轉錄終止。 ? 轉錄酶 II （ mRNA）的轉錄終止 沒有固定的轉錄終點，一般都必須通過 poly A 尾巴添加位點之后才能終止。 ? 轉錄酶 III （ tRNA 及 5S rRNA）的轉錄終止 轉錄終止于編碼區 3? 端的一連串 U 處，一種稱為 La 的磷酸蛋白起著與細菌中 ? 因子相似的作用。 六、轉錄中核小體的命運 兩種研究結論 ? 結論 1：核小體組蛋白在轉錄時被完全置換過，即在轉錄酶通過時完全解體，轉錄酶通過后又重新形成。 ? 結論 2：轉錄時核小體核心沒有解體，仍松弛地結合在 DNA 上。 兩種模型（針對第一種結論） ? 模型 1：通過轉錄因子除去組蛋白。 ? 模型 2：核小體結構為負超螺旋，轉錄時開放復合體的前方會產生正超螺旋，促使核小體解體；后方則產生負超螺旋，有利于核小體重新形成。