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2026-06-21 03:54本頁面

　　

【正文】 kg。2．藥品與器材25％烏拉坦溶液，葡萄糖溶液，生理鹽水，腎上腺素，%肝素，3%戊二醛，TNFα檢測試劑盒，IL6檢測試劑盒等。兔手術(shù)臺，電子稱，天平，生物信號處理系統(tǒng)，動物呼吸機，顯微鏡，酶標儀、低溫離心機、電動勻漿機、手術(shù)器械，動脈夾，動脈插管，氣管插管，注射器。（四）實驗基本過程1．按照實驗要求，以及提供的動物、實驗器材與藥品，自主設計不同類型缺血再灌注損傷的病理模型（含原理和觀察指標確立）。（1）立題：以實驗小組為單位，根據(jù)以往學的知識和預習相關(guān)章節(jié)的內(nèi)容，或查閱有關(guān)文獻資料，開展集體醞釀、討論確立缺血再灌注損傷實驗方案（包括觀察指標和抗再灌注損傷措施）。但是，一定要注意動物實驗立題的科學性、現(xiàn)實性和可操作性，以及實驗思路的新穎和獨特性。（2）方案設計的格式與內(nèi)容：每實驗小組在缺血再灌注損傷實驗平臺的基礎上，依據(jù)實驗目的編制出動物實驗的設計方案。實驗設計方案的內(nèi)容應詳細和具可操作性，具體的內(nèi)容和格式要求如下：①題目；②立題依據(jù)（實驗的目的、原理）；③實驗動物品種與數(shù)量；④實驗器材（型號、規(guī)格和數(shù)量）與藥品（規(guī)格、劑型和使用量），包括特殊儀器與藥品需要（器材型號、規(guī)格和數(shù)量與藥品規(guī)格、劑型和使用劑量）；⑤實驗內(nèi)容（方法和操作步驟），以及觀察指標；⑥實驗觀察結(jié)果記錄表格制作；⑦預期結(jié)果；⑧注明參閱文獻資料。2．缺血再灌注的動物模型復制（1）心臟缺血再灌注模型制備：1）動物分組與處理：將家兔分成A、B動物，A為缺血再灌注的對照動物，B為去甲腎上腺素預處理動物。2）用20%烏拉坦（5ml/kg）靜脈麻醉，固定于兔臺。頸部去毛，手術(shù)分離氣管和右頸總動脈，并進行氣管插管和動脈插管。氣管插管與呼吸機連接（潮氣量50ml，吸呼比2: 1, 呼吸頻率40次/min）；動脈插管與血壓換能器連接；四肢連接心電圖導聯(lián)，記錄心電圖。3）剪去胸壁左側(cè)被毛，沿胸骨左緣2～4肋剪斷肋軟骨，打開胸腔。開胸后立即行正壓呼吸。4）用眼科剪剪開心包，暴露心臟，用止血鉗輕輕提起左心耳，于冠狀動脈左支起始部約2mm處用縫合針繞其穿一無創(chuàng)縫合線，穩(wěn)定15min。，各持續(xù)3min。待心率基本穩(wěn)定后，墊線結(jié)扎冠脈左支，20min后松開結(jié)扎線，再灌注30min。復制模型的可靠性用連續(xù)監(jiān)測之ECGⅡ?qū)?lián)的變化來判斷，以ST段抬高為心肌缺血存在，以深大Q波出現(xiàn)確定心肌壞死形成。（見圖773）圖72 缺血再灌注損傷ECGⅡ?qū)?lián)圖71 正常ECGⅡ?qū)?lián)（2）肝缺血再灌注模型制備：1）家兔術(shù)前禁食12h。2）動物分組與處理：將家兔分成A、B動物，A為缺血再灌注損傷的對照動物，B為缺血再灌注損傷的干預與治療動物。3）用戊巴比妥鈉（3%）30mg/kg，靜脈注射麻醉，固定于兔臺。頸部去毛，手術(shù)分離氣管和右頸總動脈，并進行氣管插管和動脈插管。4）剪去腹部被毛，自腹正中切口入腹，于尾狀葉上方用直角鉗游離尾狀葉與其它葉（左側(cè)葉、左中央葉、右中央葉）之間的管道。用血管鉗一并夾住血管和膽管。鉗夾后，尾狀葉保持原色不變，其它肝葉可見色變成暗黃紫色，10min后可見肝略為腫脹。與尾狀葉完全不同。鉗夾15min后松開血管鉗，待肝臟顏色恢復原色（轉(zhuǎn)紅）即為再灌注，關(guān)腹。然后分別干預和觀察。（3）腎缺血再灌注模型制備：1）動物分組與處理：將家兔分成A、B動物，A為缺血再灌注損傷的對照動物，B為缺血再灌注損傷的干預與治療動物。2）用戊巴比妥鈉（3%）30mg/kg，靜脈注射麻醉，固定于兔臺。頸部去毛，手術(shù)分離氣管和右頸總動脈，并進行氣管插管和動脈插管。3）剪去腹部被毛，自腹正中切口入腹。摘除左側(cè)腎臟（注意血管結(jié)扎與止血），取下的左腎下極組織放入3%戊二醛中固定。找到右側(cè)腎臟的腎動脈，分離腎動脈和夾閉血流1h，松開夾子恢復血液再灌注。術(shù)后6h擊昏動物，取右腎下極組織放入3%戊二醛中固定。（4）腸缺血再灌注模型制備：1）動物分組與處理：將家兔分成A、B動物，A為缺血再灌注損傷的對照動物，B為缺血再灌注損傷的干預與治療動物。2）用戊巴比妥鈉（3%）30mg/kg，靜脈注射麻醉，固定于兔臺。頸部去毛，手術(shù)分離氣管和右頸總動脈，并進行氣管插管和動脈插管。3）剪去腹部被毛，用紗布將內(nèi)臟輕輕地向左推移，見到右腎門垂直向腹主動脈處，于左側(cè)腎上腺右上方找到橫向行走的系膜上動脈，并分離出系膜上動脈（避免誤傷靜脈），用縫合針繞其穿一無創(chuàng)稍粗的縫合線備用。動物穩(wěn)定15min后，結(jié)扎細線1h造成腸缺血（注意不要打死結(jié)），松開結(jié)扎線恢復其血流即再灌注。3．按實驗的自行設計方案完成動物實驗操作步驟和指標觀察。（七）討論分析1．對實驗目的、原理進行闡釋，實驗結(jié)果進行總結(jié)與歸納。2．對實驗中出現(xiàn)的各種觀察指標變化進行分析，探討其變化的發(fā)生機制。3．如實驗結(jié)果不理想，請分析其失敗的原因和提出改進的措施。（八）時間節(jié)點1．完整、詳細的實驗設計方案必須在實驗課的前一周完成，設計方案不合格者將取消實驗資格。2．實驗操作時間必須控制在1天以內(nèi)。3．一周后以小組為單位用多媒體匯報實驗結(jié)果和討論分析。（九）附錄及注意事項1．家兔正常生理指標(見第二章)。2．移動內(nèi)臟時，動作要輕柔，不要認為過度牽拉損傷腸管，臟器不要移出腹腔外并用紗布蓋好。3．實驗過程不得危害人體健康和污染環(huán)境。（李稻） 17

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