病原微生物實驗室生物安全管理手冊-資料下載頁

【導讀】蝿螆肂蕿蒈羈薈薁螅芇薇蚃羀芃薆裊螃腿薆薅聿肅薅蚇袁莃薄螀肇艿薃袂袀膅螞薂肅肁艿蚄袈羇羋袆肅莆芇薆羆節芆蚈膂膈芅螀羅肄芄袃螇莂芃薂羃羋莃蚅螆膄莂螇羈肀莁蕆螄肆莀蠆聿蒞荿螁袂芁莈襖肈膇莈薃袁肅莇蚆肆罿蒆螈衿芇蒅蒈肄膃蒄薀袇腿蒃螂膃肅蒂襖羅莄蒂薄螈芀蒁蚆羄膆蒀蝿螆肂蕿蒈羈薈薁螅芇薇蚃羀芃薆裊螃腿薆薅聿肅薅蚇袁莃薄螀肇艿薃袂袀膅螞薂肅肁艿蚄袈羇羋袆肅莆芇薆羆節芆蚈膂膈芅螀羅肄芄袃螇莂芃薂羃羋莃蚅螆膄莂螇羈肀莁蕆螄肆莀蠆聿蒞荿螁袂芁莈襖肈膇莈薃袁肅莇蚆肆罿蒆螈衿芇蒅蒈肄膃蒄薀袇腿蒃螂膃肅蒂襖羅莄蒂薄螈芀蒁蚆羄膆蒀蝿螆肂蕿蒈羈薈薁螅芇薇蚃羀芃薆裊螃腿薆薅聿肅薅蚇袁莃薄螀肇艿薃袂袀膅螞薂肅肁艿蚄袈羇羋袆肅莆芇薆羆節芆蚈膂膈芅螀羅肄芄袃螇莂芃薂羃羋莃蚅螆膄莂螇羈肀莁蕆螄肆莀蠆聿蒞荿螁袂芁莈襖肈膇莈薃袁肅莇蚆肆罿蒆螈衿芇蒅蒈肄膃蒄薀袇腿蒃螂膃肅蒂襖羅莄蒂薄螈芀蒁蚆羄膆蒀蝿螆肂蕿蒈羈薈薁螅芇薇蚃羀芃薆裊螃腿薆

　　

【正文】 最好將血液先放置 12 個小時，再用 3000 離心 15 分鐘，吸出上清液備用，如在幾天內檢測可放在 28℃ 冰箱中，如要貯存，置于 20℃ 冰箱。 ，按試劑盒要求時間恢復室溫。 、溫箱溫度。 ，標明空白、陰性對照、陽性對照、外部質控血清以及檢測樣本的位置：登記日期和實驗起止時間，記錄環境條件及試劑盒廠家、批號、效期：整 個實驗過程中每一步操作都要在原始記錄表上詳細登記。 。 根據樣品數量將合適數量的酶標板條固定在板架上，為了不損壞洗扳機，每道上的酶標板條 24 必須保持完整 {不足部分可用廢棄的微孔添充 }，檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符，按照原始記錄表表明的位置加入各種質控品和檢測樣品，注意：空白只加標本稀釋液。加樣量和稀釋度嚴格按照試劑盒說明書規定的操作，一般先加樣品稀釋液后再加入樣品。加樣要準確， 小心不要使吸頭碰著酶標板空上是包被抗原。為保證加樣的準確，最好使用多孔道加樣器，使用時注意防止吸頭間的交叉污染。 貼好封板膜，按照試劑盒要求的溫度和時間進行溫育，最好選擇濕育方法。 開啟洗板機前，先檢查洗板機廢液瓶是否已排空，開啟后先用蒸餾水沖洗管道，再換上洗液瓶。按照試劑盒的要求，選擇、修改洗扳方式、洗滌次數和浸泡時間，根據所用酶標板的條數確定洗板道數，根據酶標板的位置調節洗頭的位置，然后開始洗板，洗板結束后用蒸餾水沖洗管道。 ELISA實驗需加 酶結合物，按試劑盒要求完成。 ，需加自配的底物應現配現用。 在規定的時間內用試劑盒中的或根據要求自行配置的終止液終止反應。 酶標儀讀物 按照試劑盒的要求選擇濾光片，確定空白孔位置，選擇合適達的打印報告格式，讀數并打印結果。 。 根據試劑盒說明書要求的陰陽對照 OD 值范圍判斷實驗的準確性，陰陽性對照 OD值在范圍之內，試驗方可成立，超出范圍，試驗失敗，整個實驗重做。 S/CO值，判斷實驗結果是否被接受。 ，根據試劑盒要求計算 cutoff 值。小于 cutoff 值的標本為陰性，大于或等于 cutoff值得標本為陽性，在 cutoff177。10%的標本為灰色帶反應。陽性及灰色反應區標本，用原有的試劑盒另一種試劑重復試驗。 結果登記和報告 將試驗結果登記在級路標和標本試劑表上，將 OD值打印結果貼在原始記錄表上，檢查原始記錄表是否填寫完整，操作者，復核者簽字。陰性結果出具 HIV 抗體篩查報考，陰性結果填寫 HIV抗體篩查陽性送檢單。 標本留存轉送 陰性標本收集血清冷凍保存一年。并填寫陰性血清保存記錄表，陽性標本收集血清封口包好，冷藏運送送確認實驗室。 4. 支持性文件 全國艾滋病監測工作規范 艾滋病實驗室安全操作及防護措施 （二）、結核桿菌實驗室生物安全規程 （ 1）實驗室入口處必須貼上生物危險標志，注明危險因子，生物安全級別，試驗室負責人和相關負責人姓名和電話。 （ 2）實驗室應有明顯的區域劃分，清潔區，辦污染區和污染區。 （ 3）無論進入實驗室時間長短，必須填寫 工作日志。要嚴格遵守實驗室的一切操作規程。 （ 4）進行結核菌操作時，需有兩名工作人員同時進入實驗室，盡量避免單獨工作。 （ 5）在對大批量的痰標本和菌株進行分離培養和藥敏試驗前，英語中心新主任和實驗室主任討論，必要時加強預防措施。 （ 6）試驗室人員應做結核菌素試驗，試驗結果為陰性時，應接種卡介苗，并做好登記記錄。 25 （ 7）外來進修，參觀人員必須學習實驗室的一切規章制度和有關操作規程，經試驗室主任批準方可進入實驗室。 （ 1） 標本采集人員的防護：痰標本有病人自 行留取，采集咽拭子等特殊標本，采集人員應穿防護服，戴一次性口罩，帽子，戴醫用手術手套。 （ 2）采集標本污染器材的處理：采集標本的痰盒，試管等污染器材軍需高壓處理。 痰標本需留置在特制的痰盒內（直徑 4cm，高 2cm 的光口蓋密閉的塑料盒），并放置在專用的痰標本運送箱內 ,運送過程中切勿倒置 ,嚴防痰液外溢。由有專人送至痰檢實驗室 ,標本送達后痰標本運送箱及時用乙醇或是碳酸等化學消毒劑或高壓的辦法徹底消毒。 （ 1）結核病細菌學實驗室要求 結核病細菌學實驗室應為生物 安全 Ⅲ 級實驗室 ,用于臨床診斷 ,教學 ,屬中度危險 .應具備安全設備 ,緩沖間實驗室條件應滿足工作任務的要求 ,有完善的試驗設施 ,試驗室的環境應清潔 ,衛生 ,安靜 ,無污染 ,試驗室內的管線 設置應整齊 ,要有安全管理措施和報警 ,應積及急救設施 ,房間數量不少于七間 ,包括實驗室準備室 ,培養機制備室 ,顯微鏡檢查室 ,圖片檢查室 ,接種室 ,培養室高壓消毒室等。具備完善的質量保證體系中應有明確的分級責任制度 ,以確保檢驗的工作質量 ,保證檢驗 ,復核 ,科研結果等各項報告的準確可靠性。 （ 2）實驗室儀器設備及功能的要求 結核菌素檢查 時必須在二級生物安全柜內進行 ,無菌操作內禁放雜物 , 并應制定地面 ,門窗 ,墻壁 ,設施等的定期清潔 ,滅菌規程 ,操作間沒有紫外線燈 。實驗室內應光線明亮 .具備性能良好的 Ⅱ 型生物安全柜 ,恒溫培養儀器 ,雙目生物顯微鏡 ,蒸汽凝固滅菌箱 ,高壓蒸汽滅菌鍋等儀器設備 ,并對各種儀器專人管理 ,定期叫閻檢定 ,對不合格 ,待修 ,待檢的儀器 ,要有明顯德狀態標志 ,并應及時進行相應的處理。一起使用人應經考核合格后方可操作儀器。 （ 3）對檢驗人員的安全要求 : 從事結核菌工作的人員須經培訓后方能參加操作 ,并嚴格按照操作規則和其他國家標準進行 各項試驗 ,準確治療試驗結果 .培訓標準由各等級的實驗室根據國家標準和規定自行制訂 ,通過考核后 ,還須與有資格的工作人員一同工作 3 個月 ,才能獲得操作資格 .非專業技師人員 ,無專業技術職稱者不得從事檢驗的技術工作。 （ 4）進入實驗室的規章制度 。 ,吸煙 ,接待訪客和喧嘩。 ,需有兩名工作人員同時進入實驗室。 ,發熱 ,感冒和妊娠六個月以上者 ,不能進入讀君實驗室。 ,檢查各實驗室水 ,電 ,防火設備 ,打開防盜報警裝置。 ,7日內不可離開實驗室所在城市。如出現身體不適現象 ,應在實驗室所在地進行醫學觀察 .因工作原因必須離開時 ,用口服抗結核藥物預防。 （ 5）意外事故及處理 ,操作臺或地面的污染 ,如菌液溢出 ,打破結核分枝桿菌培養皿和藥敏管等 ,應立即噴灑消毒液 ,待消毒液徹底浸泡 30 分鐘后 ,進行清理 .清理后的物品 ,高壓滅菌。 ,如污染物濺落在身體表面 ,或有割傷 ,燒傷 ,燙傷 ,感染動物咬傷等情況 ,應立即進行緊急處理 :皮膚表面用消毒液清洗 ,傷口以碘酒究竟消毒 ,眼睛用無菌生理鹽水沖洗。事故的 26 情況應報告實驗室主任和上級領導。 ,如發生氣溶膠污染 ,應立即關閉實驗室 ,用消毒液噴霧和紫外線照射污染的區域 ,24小時后再進行終末消毒。 ,有疑似癥狀出現時 ,應立即向實驗室主任報告 ,觀察就醫。 （ 6）污染物處理及消毒 ,吸管及其他器械 ,需裝載加蓋不漏的容器內 ,經高壓滅菌后 ,拿出實驗室。 b.培養物及污物 ,經高壓滅菌后 ,拿出實驗室。 :先用消毒液浸泡手套 5 分鐘 ,依次除去口罩 ,眼鏡 ,防護 服 ,三角頭巾 ,鞋 ,在浸泡手套后脫去手套。 75%酒精棉球擦面部裸露部位 ,用 3%硼酸水漱口 ,離開實驗室。 ,未經消毒的污水禁止直接排入公共排水系統 .以消毒的污物集中倒入專用污物坑 (污物坑的深度 23米 ),不許混入居民生活垃圾。 生物標本保管安全要求 結核分枝桿菌菌株必須由專人負責 ,按照衛生部（ 1985）《中國醫學微生物菌種保藏管理辦法》規定執行。應在 4℃ 專用冰箱內保存 ,并要求雙人雙鎖 ,有嚴格的菌株領取和銷毀制度。