上海交大實驗動物學-實驗動物遺傳質量控制-資料下載頁

　　

【正文】 動物具有接受或排斥所植皮膚的能力。每個近交系的全部個體在遺傳上高度純合，所以，同品系的個體間能互相接受皮膚移植；而不同品系的個體間植皮就會互相排斥。 ? 皮膚移植也是的常用的遺傳質量檢測方法，在國家推薦標準（ GB/）《實驗動物近交系小鼠 \大鼠皮膚移植法》中，對該方法的基本操作步驟有詳細的介紹和規定。 皮膚移植 Shanghai Jiao Tong University ? 小鼠和大鼠的檢測中普遍采用的是快速、有效的尾部皮膚移植法。 ? 植皮后至少觀察 100天，只有在 100天以上植皮雙方均不發生排斥，才能證實待測小鼠或大鼠的遺傳純合性。 ? 在對已知品系檢測時，若急性排斥占手術例數 30%，須重新考慮采樣，以確認是技術性還是其他原因造成的結果。 皮膚移植 Shanghai Jiao Tong University 供 體 受 體 移植結果 近交系 同品系同性別 接受 近交系 不同品系 排斥 近交系 本品系同其他品系雜交 F1 接受 近交系♀ 同品系♂ 接受 近交系♂ 同品系♀ 排斥 雜交 F1 F1親代品系 排斥 雜交 F1 雜交 F2 接受 雜交 F2 雜交 F1 排斥（少數接受） 實驗動物皮膚移植規律 Shanghai Jiao Tong University ? 皮膚移植法優點： 易掌握、高度靈敏、經濟、不需昂貴設備、對植皮接果的排斥或接受容易判斷。 ? 皮膚移植法不足： 該方法費時：為檢測非 H2組織相容性基因的差異，需觀察100天 后才能作出判斷；飼養植皮動物需一定飼養空間；會出現一些系技術或其他非免疫因素植皮實驗失敗。該方法不是鑒別新品系的理想方法。 皮膚移植 Shanghai Jiao Tong University ? 下頜骨形態是高度遺傳的性狀，由多態性位點確定。下頜骨的形態和大小在小鼠的近交系間存在明顯差異，所以，下頜骨分析是一種合理的方法 ? 該方法是一種靈敏和有效的鑒別和檢測亞系變異（源于遺傳混雜和突變）的技術。 ? 正常環境因素及飼養管理對下頜骨形態幾乎沒有什么影響， ? 50日齡后下頜骨基本上不再生長，其形態也不再發生變化 。 下頜骨形態學分析 Shanghai Jiao Tong University ? 檢測前，制作測量用的標準直角坐標底板， 在近交系核心群中隨機取 60日齡以上的成年雄鼠，每次取樣 10只為 1組，制備下頜骨標本后， ? 在顯微鏡下，放大 10倍測量在直角坐標底板上下頜骨 11個形態特征參考點的距離 下頜骨形態學分析 Shanghai Jiao Tong University ? 將所測量值的平均數作統計分析，利用判別函數確定下頜骨形態。如果測量值集中，則表明在被測小鼠間無顯著的遺傳差異。 ? 下頜骨形態分析是一種靈敏、經濟、簡便、可同時檢驗大量的遺傳位點的遺傳監測方法。 ? 若配以掃描機將下頜骨形態掃入電腦，經電腦測量其形態特征參考點的距離，并由電腦完成統計分析，既可減少人為誤差，還可加快統計分析的速度。 下頜骨形態學分析 Shanghai Jiao Tong University ? 小鼠的毛色等位基因 A、 B、 C、 D、分別位于第 條染色體上。 A、 B、 C、 D基因對其相應的 a、 b、ｃ、 d等位基因是顯性； ? 而 C基因又是其它色素基因的上位基因，當 cc隱性基因存在時，細胞內缺乏酪氨酸酶而不能合成色素，因此不論其它控制色素生成的基因是什么，小鼠均表現為白化。 ? 所以根據遺傳學原理 ,使復隱性等位基因的小鼠與待測小鼠交配，能從其 F1仔鼠的毛色推測被檢小鼠的基因型 毛色基因交配測試 Shanghai Jiao Tong University ? “ A－ B－ C－ D－”為野生色 ? “ A－ bbC－ D－”為桂皮色 ? “ aaB－ C－ D－”為黑色 ? “ aabbC－ D－”為棕色； ? “ cc ”為白化 毛色基因交配測試 Shanghai Jiao Tong University ? (1)已知復隱性等位基因型小鼠的選擇 可選用純系 DBA/2小鼠， 它的基因型是“ aabbCCdd”。 ? (2)待測鼠 可以是白化小鼠，亦可是其他顏色的小鼠。 但一般都選用近交系作為待測鼠，以達到了解近交系毛色基因純合程度或新培育品系的基因型之目的。當然還可用非近交系作為對照組，以觀察其毛色基因分離情況。 ? (3)交配方式 選用 70 日齡左右的已知復隱性基因的雄性小鼠和同樣條件的待測雌性小鼠，按 1： 1或 1： 2，自行交配，觀察并記錄交配、生產等時間和各數據，以便于結果分析。 毛色基因交配測試 Shanghai Jiao Tong University ? F1代為同一毛色時待測小鼠基因的判斷 因為 F1代只有一種毛色，所以， 也只能有一個基因型，這樣首先可以肯定待測鼠的基因為純合，然后推導待測鼠基因型。例如用 DBA/2測 BALB/C毛色基因型。 DBA/2 BALB/C的 F1代為桂皮色，基因型為 AabbCcDd；與已知DBA/2(銀灰 )的 aabbCCdd基因型配對比較，可知 F1中 A， b， c， D 四個等位基因來自 BALB/C，又因為 F1只有一種桂皮色，故可以推斷該待測 BALB/C的毛色基因為純合 , 基因型為 AAbbccDD。 ? F1代為不同毛色時待測小鼠的基因型判斷 F1 代毛色不同則說明待測鼠的基因型不純，故不是純系動物。那么它的基因型怎樣確定呢？方法是把所有 F1代的毛色基因型與已知基因型對比，找出與已知基因型不同的基因，然后把它們按序排列即為待測鼠的基因型。 Shanghai Jiao Tong University ? 通常將 6070日齡待測小鼠雌鼠與已知毛色基因結構的 DBA/2（ aabbCC）雄鼠交配，根據雜交 F1的毛色確定待測小鼠主要毛色基因型，鑒定是否純合。 毛色基因交配測試 Shanghai Jiao Tong University 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAIT