生物安全操作手冊(更新版)

　　

【正文】 50 八、實(shí)驗(yàn)室感染監(jiān)測與報告制度 55 九、實(shí)驗(yàn)室感染預(yù)防制度 57 十、督察和責(zé)任追究制度 59 十一、實(shí)驗(yàn)室安全保衛(wèi)制度 61 十二、菌 (毒 )種和生物樣本檔案管理制度 63 十三、臨床發(fā)現(xiàn)可疑高致病菌報告制度 64 十四、內(nèi)務(wù)管理制度 65 十五、菌（毒）種和生物樣本管理制度 67 第三章、生物安全評估 69 一、風(fēng)險評估 70 二、暴露途徑 72 三、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傳染因子的傳播途徑 73 四、生物安全等級 74 五、生物安全檢查 76 六、生物安全評估 77 七、工作內(nèi)容危害度評估 79 4 第四章、實(shí)驗(yàn)室操作程序文件 88 一、 生物安全柜的使用 89 二、生物危害物的運(yùn)輸 92 三、基礎(chǔ)生物安全操作 93 四、消毒和滅菌 97 五、廢棄物處理 105 六、運(yùn)送 108 七、移液管和移液輔助器的使用 111 八、 員工 避免感染 112 九、血清的分離 114 十、離心機(jī)的使用 115 十一、勻漿器、搖床、攪拌器和超聲處理器的使用 117 十二、組織研磨器的使用 118 十三、冰箱與冰柜的 維護(hù)和使用 119 十四、裝有凍干感染性物質(zhì)安瓿的開啟與儲存 120 十五、標(biāo)本的收集、標(biāo)記和運(yùn)輸?shù)?121 附錄：微生物實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險評估報告 123 5 第一章 程序文件 6 蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院 第 1 頁，共 2 頁 第一版 日期： 總則 一、 總 則 目的 為 加強(qiáng)本科室病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理，防止病原體通過實(shí)驗(yàn)室向外環(huán)境擴(kuò)散和實(shí)驗(yàn)室感染，保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員和公眾的健康，根據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》、《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（ GB194892020）、《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》（ GB 50346－ 2020）和衛(wèi)生部《人間傳染的病原微生物名錄》（以下簡稱《名錄》） 特制定實(shí)驗(yàn)室生物安全管理手冊。 院長組織并授權(quán)生物安全領(lǐng)導(dǎo)委員會負(fù)責(zé)生物安全工作，相關(guān)科室的主任應(yīng)對所轄科室的生物安全工作承擔(dān)相應(yīng)的領(lǐng)導(dǎo)責(zé)任。 ⑨ 負(fù) 責(zé)制定生物安全管理工作規(guī)范、操作技術(shù)指南及規(guī)范性技術(shù)文件并定期進(jìn)行評價和更新； ⑩ 提供生物安全相關(guān)技術(shù)和政策咨詢；有權(quán)力監(jiān)督實(shí)驗(yàn)室制度、操作規(guī)程的實(shí)施，發(fā)現(xiàn)不符合規(guī)定的行為或安全隱患有權(quán)要求有關(guān)人員進(jìn)行糾正。經(jīng)批準(zhǔn)向上級機(jī)構(gòu)上送菌株應(yīng)符合相應(yīng)的安全規(guī)定，并遵守國家關(guān)于道路、鐵路和水路運(yùn)輸危險材料的有關(guān)要求； ⑤ 執(zhí)行檢驗(yàn)人員健康狀況登記制度，及時報告和處理意外情況； ⑥ 內(nèi)務(wù)管理 ： 在實(shí)驗(yàn)室入口明顯位置張貼國際統(tǒng)一的生物危險標(biāo)志并表明實(shí)驗(yàn)室生物安全級別，出口處應(yīng)有發(fā)光指標(biāo)標(biāo)志。 BSL2 實(shí)驗(yàn)室入口處門上必須有人員出入限制標(biāo)志和相關(guān)信息，如實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任人的姓名、聯(lián)系電話等。 外送維修或處理的設(shè)備 13 已污染或可能污染的設(shè)備外送維修或處理必須盡可能徹底消毒，在設(shè)備上貼上生物危害警示。 生物安全負(fù)責(zé)人和 /或?qū)嶒?yàn)室生物安全責(zé)任人在用風(fēng)險組 2（生物安全水平 2）因子工作前必須到生物安全辦公室登記。 合適地使用生物安全柜能提供一個清潔的工作環(huán)境。 當(dāng)報廢、從科室搬走或從其他單位或制造商獲得生物安全柜時，須預(yù)先通知生物安全管理小組。使用操作針和注射器的時候戴乳膠手套。移液管的排出除應(yīng)該與液體或瓊脂水平盡可能地近，內(nèi)容物應(yīng)該沿著管壁或瓶壁排出，不要從高處排出。對儲存在冰箱或冷凍庫中的所有有傳染性的或有毒的材料進(jìn)行適當(dāng)分類。 （ 2）、 手套 應(yīng)符合舒服、合適、耐磨、耐撕的要求。在從事可能出現(xiàn)飛濺的工作時應(yīng)戴護(hù)目鏡，可避免實(shí)驗(yàn)物品飛濺對眼睛造成的傷害。培 18 訓(xùn)組織機(jī)構(gòu)應(yīng)采取有效方法對培訓(xùn)的效果進(jìn)行評估。 實(shí)驗(yàn)室人員 培訓(xùn)規(guī)劃 進(jìn)行崗位安全教育對于維持實(shí)驗(yàn)室工作人員和后勤保障人員的安全意識是很重要的。還應(yīng)包 括： A. 吸入危險（氣溶膠產(chǎn)物），如何使用接種環(huán)、劃線接種瓊脂平板、移液、 制作涂片、打開培養(yǎng)物、采血 /血清標(biāo)本、離心等。不同人員在資質(zhì)、讀寫、文化、口語以及培訓(xùn)前所掌握的技術(shù)水平等方面都可能不一致。培訓(xùn)評估通常包括下列四種方式： 檢查培訓(xùn)對象對所進(jìn)行培訓(xùn)的反應(yīng) ； 考核培訓(xùn)對象對所培訓(xùn)內(nèi)容的記憶和 /或操作執(zhí)行情況 ； 評估培訓(xùn)對象在工作中的行為變化 ； 按培訓(xùn)機(jī)構(gòu)的目的或目標(biāo)來考查是否已有明確的效果。對特殊的實(shí)驗(yàn)室工作人員醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序可以做一些預(yù)防測定，包括免疫、定期身體檢查和采集血清樣本。暴露于活性 TB 環(huán)境中的實(shí)驗(yàn)室工作人員必須報告在暴露初期的 TB 試驗(yàn)基礎(chǔ)值和暴露 3 個月后的暴露事件和 PPD 測試結(jié)果。可預(yù)先收集新進(jìn)實(shí)驗(yàn)室工作人員、傳染 病實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室工作人員的血清作為本底血清；如果有與相關(guān)生物因子病人接觸的實(shí)驗(yàn)室工作人員，應(yīng)增加收集這些實(shí)驗(yàn)室工作人員的血清樣品。實(shí)驗(yàn)室清潔后才準(zhǔn)許人員再次進(jìn)入。后暴露的觀察期取決于暴露的種類，與傳染因子的不同潛伏期有關(guān)。這些事件必須被記錄，記錄簿上應(yīng)包括涉及事件的設(shè)備種類和品牌、事件發(fā)生的工作區(qū)域、事件發(fā)生的原因。 明確事故處理的責(zé)任人員及其所承擔(dān)的職責(zé)。 二級生物安全實(shí)驗(yàn)室溢出 處理 應(yīng)迅速離開房間，避免吸入經(jīng)空氣傳播的物質(zhì)。 穿上防護(hù)衣（實(shí)驗(yàn)外套，面罩，實(shí)驗(yàn)手套，必要時穿上長統(tǒng)靴）。較小片的玻璃可以用鑷子收集在棉花或紙巾上。 用紙巾吸取血液放在一個生物危害袋中。 適用范圍 適用于所從事的工作內(nèi)容或所在崗位職責(zé)涉及病原微生物操作和管理的一切人員，包括行政管理人員、專業(yè)技術(shù)人員、質(zhì)量監(jiān)督人員、安全監(jiān)督員、廢棄物管理人員、洗滌人員、保潔人員和其它工勤人員、外來單位參觀、學(xué)習(xí)、工作人員以及中心職工跨科室開展實(shí)驗(yàn)活動人員等人員的準(zhǔn)入。 （ 4）、 實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員 具備相關(guān)專業(yè)教育經(jīng)歷，熟練掌握有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、儀器設(shè)備操作規(guī)程，通過所需的生物安全知識、技術(shù)考核，獲得相應(yīng)的上崗證，按要求參加生物安全知識和技術(shù)培訓(xùn)，掌握相關(guān)技 術(shù)規(guī)范，掌握與所承擔(dān)工作有關(guān)的生物安全基本情況，了解所從事工作的生物風(fēng)險，掌握常規(guī)消毒原則和技術(shù)，掌握意外事件和生物安全事故的應(yīng)急處置原則和上報程序。 （ 3）、 實(shí)驗(yàn)室人員在下列情況進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室特殊工作區(qū)需經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意： ① 身體出現(xiàn)開放性操作； ② 患發(fā)熱性疾病； ③ 呼吸道感染或其它導(dǎo)致抵抗力下降的情況； ④ 在使用免疫抑制劑或免疫耐受； ⑤ 妊 娠 ； ⑥ 已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域內(nèi)連續(xù)工作 6 小時以上； ⑦ 其它原因造成的疲勞狀態(tài)。 （ 5）、 化學(xué)性廢物：?實(shí)驗(yàn)室廢棄的化學(xué)試劑；?廢棄的過氧乙酸和戊二醛等化學(xué)消毒劑；?廢棄的汞血壓計(jì)和汞溫度計(jì)。 （ 2）、 各專業(yè)組負(fù)責(zé)員工健康監(jiān)護(hù)計(jì)劃的編制、執(zhí)行、記錄、擋案管理工作。臨時調(diào)離崗位的人 員在重新上崗前必須進(jìn)行體檢，體檢結(jié)果達(dá)到崗位健康要求后由科室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)其上崗，永久性調(diào)離崗位的需收回上崗證。 各科室制定年度免疫接種計(jì)劃，免疫接種情況記入健康監(jiān)護(hù)檔案。 （ 4）、 健康監(jiān)護(hù)檔案內(nèi)容包括 實(shí)驗(yàn)室人員崗位情況表 員 工健康檔案情況，包括體檢（含血清檢查）和免疫接種登記表 （ 5）、 健康檔案管理 所有實(shí)驗(yàn)室人員健康檔案由辦公室負(fù)責(zé)管理 個人健康檔案采用一人一檔的方法保存。包括：生物安全水平、要求的免疫接種、個人防護(hù)安全裝備和離開實(shí)驗(yàn)室的要求；必要時列出病原菌的名稱、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人姓名和聯(lián)系電話 戴角膜接觸鏡者戴安全眼鏡、護(hù)目鏡或面罩 對易感者或感染后可能導(dǎo)致其嚴(yán)重后果的人員進(jìn)入相關(guān)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有提示和限制 /不宜從事相關(guān)工作 從事高致病性病原微生物的人員預(yù)防接種和定期體檢 工作人員在開始工作前留本底血清并進(jìn)行有關(guān)檢測，進(jìn)實(shí)驗(yàn)室工作后進(jìn)行定期復(fù)檢，并有相應(yīng)記錄以及保留血清樣品 7 樣品的處置 實(shí)驗(yàn)室對樣品的唯一性識別系統(tǒng)，以保證在任何時候 對樣品的識別不發(fā)生混淆 樣品接收時的狀態(tài)，是否異常或與標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)有所不同 樣品的儲存、處置、準(zhǔn)備過程中的相關(guān)設(shè)施 樣品在特定的環(huán)境條件下貯存或處置時的維持、監(jiān)控和記錄 樣品的接收、保存或安全處置的程序文件 廢棄物處置是否符合國家有關(guān)規(guī)定 8 記錄 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有適合自身具體情況并符合現(xiàn)行規(guī)章的生物安全記錄制度 所有的原始觀測記錄、計(jì)算和導(dǎo)出數(shù)據(jù)、記錄和研究檢驗(yàn) 報告副本均應(yīng)歸檔并保存適當(dāng)?shù)钠谙? 記錄更改應(yīng)按適當(dāng)程序規(guī)范進(jìn)行 人員進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室工作日期和時間的工作日志 記錄應(yīng)包括參與抽樣、樣品準(zhǔn)備、研究與檢驗(yàn)人員的標(biāo)識 實(shí)驗(yàn)室事故（暴露）和工作人員曠工的制度和記錄 實(shí)驗(yàn)室溫度、壓力，冰箱溫度，消毒等記錄 43 人員培訓(xùn)記錄 工作人員健康檔案，體檢、接種、預(yù)防服藥記錄 儀器、設(shè)備檢測記錄 危害評估記錄 9 微生物操作和菌毒種保藏 生物安全管理部門是否建立菌（毒）種管理監(jiān)督 程序 菌毒種儲藏環(huán)境是否合乎規(guī)范并 具備相應(yīng)等級菌（毒）種的保藏的基本設(shè)備和生物安全保障設(shè)施 菌毒種儲藏設(shè)施是否雙人雙鎖 保藏的菌種，是否有詳細(xì)的背景和相關(guān)資料 菌（毒）種分離是否有標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)則（取樣程序