戰略性新興產業發展專項項目可行性研究報告(編輯修改稿)

　

【文章內容簡介】 投入 100 億日元，主要開發 bFGF 治療糖尿病和心血管病及胃潰瘍，目前日本武田公司 bFGF 外用制劑已經上市；德國、意大利等國也在投入巨資進行 bFGF 藥物研究，目前處于臨床前和臨床研究階段。 . 國內技術現狀和發展趨勢 堿性成纖維細胞生長因子作為一種創面修復 的較理想的藥物，在國內已經被批準上市銷售。 經臨床前研究及前期臨床試驗證實， 堿性成纖維細胞生長因子 是一種多元性因子，可影響上皮細胞、血管內皮細胞、成纖維細胞、神經元細胞等多種細胞趨化和增殖作用，起到組織修復的調理作用。局部外用未發現明顯毒副作用，對人體各器官系統功能無損害。 目前國內自主研發的第一代外用重組牛 堿性成纖維細胞生長因子 凍干制劑已先后在珠海億勝藥業和長春長生基因藥業產業化，產生較明顯的經濟效益。 第 21 頁 共 53 頁 第二代外用重組人 堿性成纖維細胞生長因子 凍干制劑在南海朗肽制藥公司和北京雙鷺制藥公司進行生產。 第二代外用重組 人堿性成纖維細胞生長因子與第一代 外用重組牛 堿性成纖維細胞生長因子 凍干制劑 相比具有以下優點： （ 1）重組蛋白是人源化的基因表達產物，與人體 100%同源，應用于人體具有免疫原性和致敏性低。 （ 2） 采用大腸桿菌溫控表達系統生產，與第一代采用 IPTG 誘導型表達載體相比，大大降低了生產成本，具有極強的市場競爭力。 （ 3）在純化工藝上肝素親和層析和凝膠層析，每升發酵產物可得重組人堿性成纖維細胞生長因子約 50mg，純化收率 70%左右，純度≥ 98%，比活性可達 1 107，技術達到國際領先水平。 . 項目技術特點以及與現有技術或 工藝比較具有的優勢： . 基因來源于東方人血紅細胞，采用 RTPCR 方法直接克隆人的 bFGF 基因。 . 鑒于遺傳密碼有兼并性和大腸桿菌對氨基酸密碼子的偏愛與人體細胞的差異，本項目在不改變產物人 bFGF 的氨基酸組成與排列順序的基礎上，選用大腸桿菌偏愛密碼子，提高了 bFGF 基因在大腸桿菌中的表達水平。 . 重組蛋白是人源化的基因表達產物，與人體 100%同源，應用于人體具有免疫原性和致敏性低等優點。 . 本項目產品與傳統的創面治療藥物相比較均由的優越性 . 作用原理不同 常規用于治療創傷、潰瘍的藥物多數是從消炎殺菌、抗傷口感染入手， 利用人體自身的再生育和能力，來達到治療效果；而重組人堿性成纖維細胞生長因子則是通過促進細胞的生長與增值，主動修復傷口，一般正常愈合需要 7~10 第 22 頁 共 53 頁 天，而是用重組人堿性成纖維細胞生長因子后則只需要 5~7 天，大大縮短了愈合時間，減少了激發感染機會，節省了治療費用。 . 對瘢痕形成影響不同 常規藥物治療創傷、潰瘍由于是抗感染被動修復過程，因而容易留下瘢痕和色素沉著；而重組人堿性成纖維細胞生長因子質量創傷、潰瘍由于是主動修復過程，愈合時間段，因而可有效減少瘢痕形成和色素沉著。 . 對功能恢復的影響不同 常規治療創傷、潰瘍，多半 僅限于傷口愈合，但對受損傷的皮膚附屬功能器官，如神經末銷、血管、汗腺等的功能恢復不是十分有效；二重組人堿性成纖維細胞生長因子是一種多功能細胞生長因子，對神經元、血管等有保護和修復效果，因而使用重組人堿性成纖維細胞生長因子治療創傷、潰瘍除了有傷口快速愈合之外，更重要的是對受損的皮膚附屬供呢個器官，如神經末銷、血管、汗腺等的功能恢復有顯著療效，這在目前治療各種創傷、燒傷的藥物中是唯一具有此功能的藥物。 5. 項目的技術經濟指標 . 重組人堿性成纖維細胞生長因子產業化的主要技術經濟指標和水平 目的蛋白表達率將在 20~30%之間，產量可達每升培養物 80~100mg，目的蛋白收率可達 50%，純度≥ 98%，比活性≥ 1 106IU/mg；凍干收率達 95%以上，技術水平可達國內先進。新增項目達產后年平均銷售收入 2 億元，利潤總額 6000萬元。 . 重組人堿性成纖維細胞生長因子（ rhbFGF）系列制劑的研究開發的主要技術經濟指標和水平 第 23 頁 共 53 頁 . 建立重組人堿性成纖維細胞生長因子外用凝膠和滴眼液的穩定生產工藝和質量標準。 . 完成重組人堿性成纖維細胞生長因子滴眼液臨床前研究，獲得臨床試驗批件。 . 獲得重組人堿性成纖維細胞生長因子外用凝膠的生產批件。 . 重組人堿性 成纖維細胞生長因子（ rhbFGF）美容化妝品的主要技術經濟指標 . 使重組人堿性成纖維細胞生長因子（ rhbFGF）在美容化妝品中活性損失率小于 20%，活性穩定性問 24 個月。 . 開發出 10~20 個重組人堿性成纖維細胞生長因子（ rhbFGF）美容化妝品。 6. 項目發展進度 . 2020 年 10 月至 2020 年 10 月，實現外用重組人堿性成纖維細胞生長因子產業化。 . 2020 年 7 月至 2020 年 7 月，完成重組人堿性成纖維細胞生長因子凝膠劑的臨床試驗。 . 2020 年 8 月至 2020 年 12 月，獲得重組人堿性成纖維細胞生長因子凝膠劑的生產批件。 . 2020 年 10 月至 2020 年 12 月，完成重組人堿性成纖維細胞生長因子滴眼液臨床前研究。 . 2020 年 12 月至 2020 年 12 月，獲得重組人堿性成纖維細胞生長因子滴眼液臨床批件。 三、 項目技術路線 第 24 頁 共 53 頁 1. 技術總路線 從人血細胞提取 mRNA 反轉錄 PCR bFGF 基因 分子克隆技術 構建基因工程菌株 發酵生產 分離純化 rhbFGF 原料 保護劑 rhbFGF 外用凝膠、外用溶液、滴眼液 真空凍干 rhbFGF 凍干制劑成品 2. 關鍵技術及創新點分析 . 重組人堿性成纖維細胞生長因子（ rhbFGF）產業化 重組人堿性成纖維細胞生長因子（ rhbFGF） 產業化需要解決的首要問題是原料來源，本項目通過優化發酵工藝和純化工藝，使得目的蛋白重組人堿性成纖維細胞生長因子的表達量大大提高至 100mg/L，已經達到國內外領先水平，保證了產業化及后續制劑開發的原料來源問題；其次，通過優化凍干工藝，使得重組人堿性成纖維細胞生長因子凍 干制劑的水分在 3%以下，既保證了重組人堿性成纖維細胞生長因子的活性穩定性，又保證了凍干粉的外觀形狀。解決上述兩個問題之后，為重組人堿性成纖維細胞生長因子及其系列制劑的研究開發及 第 25 頁 共 53 頁 產業化奠定了結實基礎， ，建立解決蛋白類藥物普遍存在的“瓶頸”技術平臺。 . 重組人堿性成纖維細胞生長因子（ rhbFGF） 外用 凝膠 的 關鍵技術和創新點分析 目前國內外 rhbFGF 只有凍干制劑上市， rhbFGF 凝膠劑完成后將為臨床提供基于濕性愈合理論的新藥，與凍干制劑比，臨床使用頻率由每日使用、每日兩次該成隔日使用、每日一次，而且減少換藥粘連、 提高療效。同時，在 rhbFGF凝膠劑基礎上，將 rhbFGF 包裹于脂質體中并制備成凝膠劑，充分利用了脂質體與細胞的親合、緩釋作用和水凝膠的屏障及易清洗性，顯著地提高了藥物穩定性、生物相容性和療效。 rhbFGF 凝膠劑處方中的卡波姆和透明質酸的合理配比使其兼具緩釋和保濕功能 ； 凝膠劑加入可與 bFGF 特異結合的肝素，以增強 bFGF 與受體的結合能力，并增強對酸、堿、熱等因素的抗性，加入肝素后，生物學活性提高至少 2倍，提高了產品的質量標準 ； 脂質體主要由天然磷脂和膽固醇組成，進入體內后可被生物降解，不會積累在體內，且免疫 原性小。重組人 bFGF 包埋在脂質體內，從脂質體中緩慢釋放，使藥效持續較長時間。通過細胞內吞和融合作用，脂質體可直接將藥物送入細胞內，避免使用高濃度游離藥物 ； 凝膠劑作為脂質體局部給藥的載體，可在脂質體周圍形成一道屏障控制脂質體中藥物釋放的速率，避免藥物的突釋效應，同時凝膠劑手感細膩，易清洗。 . 重組人堿性成纖維細胞生長因子（ rhbFGF） 外用溶液 的 關鍵技術和創新點分析 由于凍干制劑的劑型特點，采用了凍干粉與溶媒分開的包裝形式，使用時需將溶媒加至凍干粉中以溶解，并倒回溶媒瓶方能使用，操作過程麻煩，且由 第 26 頁 共 53 頁 于操作過程中 不能保證無菌環境，增加了被污染的可能，不適用于一些嚴格要求無菌的創面。外用溶液是在加入可與 FGF 特異結合的肝素，以增強 FGF 與受體的結合能力，并增強對酸、堿、熱等因素的抗性，同時，加入生物活性保護劑海藻糖，從而實現 FGF 的液體保存狀態，減少了復溶過程可能的污染，成本更低，使用更安全。 另外， 通過此項研究，篩選出一批既能保護蛋白質活性又便于使用的輔料組合，建立了若干混合成分中特異蛋白質活性的檢測方法。 . 重組人堿性成纖維細胞生長因子（ rhbFGF） 滴眼液 的 關鍵技術和創新點分析 眼表疾病是我國最主要和最 常見的致盲眼病之一，該病病因復雜，治療棘手，常因診治延誤導致愈合延遲或者不愈合，甚至致盲。重組人堿性成纖維細胞生長因子（ rhbFGF）作用于眼表病變部位，可激活調控與修復有關細胞的增殖、移行，促進細胞代謝、改善營養，主動促進修復，加速愈合。 蛋白質 類滴眼液的研制，關鍵是解決這類藥物的穩定性問題，在一定溶液條件下， rhbFGF 分子中 Met、 Cys、 His、 Trp 及 Tyr 的某些基團與各種活潑氧具有很高的反應性易受到氧化，從而導致蛋白質的活性下降，容易發生水不溶性聚集而沉淀。本 項目 研究人員經過大量試驗， 篩選出 rhbFGF 保護劑配方，該配方可以保證 rhbFGF在水溶液狀態下穩定保存 18 個月以上 。 另外，本項目在國內率先建立動物角膜上皮激光損傷模型并建立定量評價角膜上皮恢復指標： 角膜上皮損傷修復，難于進行定量評價，因此很難科學評價一個藥物對角膜上皮細胞的修復程度。通常的定量評價指標僅限于用熒光素鈉染色，檢測角膜損傷斑面積的大小。鑒于角膜損傷修復后透光率的大小間接反 第 27 頁 共 53 頁 應角膜的修復情況，損傷修復后角膜上皮細胞數量反應角膜細胞的再生水平，本項目藥效學評價中建立了三個科學可行的定量評價指標：角膜透光率 OD 值，MTT 方法檢測角膜上 皮細胞數量，角膜損傷斑面積。 四、 現有研發及生產條件 1. 項目承擔單位基本條件 南海朗肽制藥有限公司是由南海能興（控股）集團有限公司和暨南大學（醫藥生物技術研究開發中心）合作興建的有限責任公司。能興集團以房地產、商業、陶瓷等產業為主營業務，是年納稅超億元的中國 500 強企業，暨南大學是具有百年歷史的嶺南名校，在生物工程、企業管理等領域具有傳統優勢。 公司擁有近 3000 m2 的生產車間和附屬設施，可生產凍干制劑，噴霧劑和小容量注射劑等，公司于 2020 年 10 月取得國家食品藥品監督管理局的藥品 GMP認證證書， 2020 年被列 為國家高新技術產業化示范基地，同年被廣東省列為 “ 省十大重點工程高新技術產業工程項目 ” ， rhbFGF 凍干粉一類新藥還被列入 2020年 “ 國家重點新產品計劃 ” 。截止至 2020 年 6 月 30 日，公司已生產外用重組人堿性成纖維細胞生長因子 80 萬支，生產工藝穩定，成品一次檢驗合格率達100%，原液一次檢驗合格率為 99%，據正在進行考察的穩定性數據顯示產品穩定性良好。 在小規模生產取得經驗與成功的基礎上，公司目前已投資 億元建立了一個符合 GMP 標準的生產基地，以實現此項目的產業化并打入國際市場。此生產基地包括生產車間 5000m2，質檢研發中心 1000 m2，綜合樓 6000m2，及庫房與公用輔助用房 2200m2。 目前 ， 該 生產基地 已 建設完成，已經通過消防、環保驗收，并已經通過國家食品藥品監督管理局 GMP 認證 。 新生產基地 可進行 多種 生 第 28 頁 共 53 頁 物原料的生產和多種劑型的制造，如凍干制劑，噴霧劑，凝膠劑，滴眼劑，膜劑 和小容量注射劑等，總產量可達年產 800 萬支外用重組成纖維細胞生長因子及相關系列產品。 另外，暨南大學作為百年名校，在生物醫藥領域具有雄厚的研發實力，承載著包括上述基因工程藥物國家工程研究中心以及廣東省生物制藥重點試驗室、教育 部基因組藥物工程中心等高水平研發平臺，擁有華僑醫院等 5 家三甲附屬醫院。溫州醫學院通過近 10 年的銳意進取，在生物制藥領域同樣具備了較為雄厚的研發實力，目前， 已建立了一個符合 GLP 要求的藥物開發研究室和符合 GMP 要求的藥物中試研究基地，總面積超過了 3000 平方米，設備總投資超過2020 萬元，同時建有浙江省生物技術制藥工程重點實驗室、國家新藥開發工程研究中心制劑工程研究基地 、浙江省遺傳學重點實驗室等科研平臺，擁有 1 個SPF 級動物實驗中心和 7 家附屬三甲醫院，建立了 2 個國家 GCP 臨床研究基地。 2. 人才團隊等軟件條件 項 目承擔單位和 參與單位擁有強大的專業技術和管理隊伍，目前已經形成了一支學術水平高、戰斗力強的人才隊伍，中青年研究人員占比大，科研人